ox-LDL經(jīng)由LOX-1受體對PPARγ-LXRα-ABCA1通路激活的作用研究
本文選題:血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體 切入點:氧化型低密度脂蛋白 出處:《中國動脈硬化雜志》2017年10期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)經(jīng)由血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體1(LOX-1)受體對PPARγ-LXRα-ABCA1通路激活的作用。方法濃度梯度ox-LDL(0~40 mg/L,12 h)刺激J774A.1巨噬細(xì)胞,檢測LXRα、ABCA1的表達(dá)。構(gòu)建293T細(xì)胞LOX-1過表達(dá)的PPARγ雙熒光素酶報告基因系統(tǒng),激光共聚焦及Western blot檢測LOX-1的分布與表達(dá),雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測PPARγ的轉(zhuǎn)錄活化情況。對J774A.1巨噬細(xì)胞分別進(jìn)行LOX-1 siRNA和PPARγsiRNA沉默,ox-LDL(30 mg/L,12 h)孵育后檢測LXRα、ABCA1蛋白的表達(dá)。結(jié)果ox-LDL可顯著上調(diào)J774A.1細(xì)胞LXRα和ABCA1的表達(dá)(P0.01,n=3)。LOX-1過表達(dá)的PPARγ雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測顯示ox-LDL能夠通過LOX-1增加PPARγ的轉(zhuǎn)錄活性;對J774A.1巨噬細(xì)胞分別進(jìn)行LOX-1siRNA、PPARγsiRNA沉默后發(fā)現(xiàn),LXRα和ABCA1的表達(dá)均顯著降低(P0.01,n=3)。結(jié)論 ox-LDL可通過LOX-1受體激活PPARγ轉(zhuǎn)錄活性,從而上調(diào)LXRα、ABCA1蛋白表達(dá),完成PPARγ-LXRα-ABCA1信號通路的激活。
[Abstract]:Objective to investigate the oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) via lectin like oxidized low density lipoprotein receptor 1 (LOX-1) of PPAR -LXR receptor gamma alpha activation of the -ABCA1 pathway. Methods the concentration gradient ox-LDL (0~40 mg/L, 12 h) J774A.1 stimulated macrophages, detection of LXR alpha, ABCA1 expression. Construction of 293T cell LOX-1 PPAR gamma expression of the dual luciferase reporter assay system. The expression and distribution of confocal laser scanning microscopy and Western blot detection of LOX-1 transcription, dual luciferase reporter assay system for detection of PPAR gamma activation of macrophages. J774A.1 LOX-1 were siRNA and PPAR gamma siRNA silencing, ox-LDL (30 mg/L, 12 h) was detected after incubation of LXR alpha, the expression of ABCA1 protein. Results the expression of ox-LDL was significantly increased in J774A.1 cells of LXR alpha and ABCA1 (P0.01, n=3) PPAR gamma.LOX-1 overexpression of dual luciferase reporter assay showed that ox-LDL can increase PP by LOX-1 The transcriptional activity of AR gamma; on J774A.1 macrophages were analyzed by LOX-1siRNA and PPAR gamma siRNA silencing and found that expression of LXR and ABCA1 were significantly decreased (P0.01, n=3). Conclusion ox-LDL can activate PPAR transcriptional activity by LOX-1 receptor, leading to upregulation of LXR alpha, ABCA1 protein expression, after activation of PPAR gamma -LXR alpha -ABCA1 signal pathway.
【作者單位】: 遼寧省糖脂代謝重點實驗室大連大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;大連理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81270361)
【分類號】:R543.5
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