本文選題：心肌梗塞　切入點：骨髓　出處：《中國組織工程研究》2017年29期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:課題組前期研究發(fā)現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細胞移植能夠改善大鼠心肌梗死后心功能,但整體效果并不太理想,骨髓間充質(zhì)干細胞在體內(nèi)局部梗死微環(huán)境中的分化效率低下,其向心肌細胞分化的能力極其有限。目的:采用lncRNA-Bvht體外轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞,觀察其對骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的影響。方法:構建含lncRNA-Bvht的病毒載體p LVX-IRES-Zs Green1-lncRNA-Bvht,對骨髓間充質(zhì)干細胞進行l(wèi)ncRNA-Bvht轉(zhuǎn)染并檢測轉(zhuǎn)染效率。分離培養(yǎng)C57BL/6小鼠的骨髓間充質(zhì)干細胞,并將第3代細胞分為3組:骨髓間充質(zhì)干細胞組、空載體組和lncRNA-Bvht組。各組細胞培養(yǎng)48 h后用5-氮雜胞苷進行誘導分化24 h再進行正常培養(yǎng)2周,熒光顯微鏡觀察骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化情況,免疫熒光染色、Western blot、qRT-PCR檢測心肌分化標記物肌鈣蛋白T和肌節(jié)蛋白的表達。結果與結論:①誘導分化后細胞形態(tài)發(fā)生改變,細胞之間形成連接,排列方向趨于一致;②免疫熒光檢測結果顯示lncRNA-Bvht組肌鈣蛋白T和肌節(jié)蛋白表達呈現(xiàn)強陽性;肌鈣蛋白T陽性細胞的比例顯著增加;③qRT-PCR和Western blot檢測結果顯示lncRNA-Bvht組肌鈣蛋白T和肌節(jié)蛋白的表達較空載體組和骨髓間充質(zhì)干細胞組均明顯升高(P0.01);④結果提示,lncRNA-Bvht轉(zhuǎn)染能夠有效促進骨髓間充質(zhì)干細胞在體外向心肌樣細胞發(fā)生分化。
[Abstract]:Background: our previous study found that bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can improve cardiac function after myocardial infarction in rats, but the overall effect is not very good, the differentiation efficiency of bone marrow mesenchymal stem cells in the microenvironment of local infarction in vivo is low. Its ability to differentiate into cardiomyocytes is extremely limited. Objective: to transfect bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) with lncRNA-Bvht in vitro. Methods: the virus vector p LVX-IRES-Zs Green1-lncRNA-Bvhtcontaining lncRNA-Bvht was constructed to transfect bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocyte-like cells. LncRNA-Bvht transfection and transfection efficiency were detected. Bone of C57BL / 6 mice was isolated and cultured. Marrow mesenchymal stem cells, The third passage cells were divided into three groups: bone marrow mesenchymal stem cells group, empty carrier group and lncRNA-Bvht group. After 48 h culture, 5-azacytidine was used to induce differentiation for 24 h and then normal culture for 2 weeks. The differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocytes was observed by fluorescence microscope, and the expression of troponin T and ganglion protein, which was the marker of myocardial differentiation, was detected by Western blottqRT-PCR. The expression of troponin T and ganglion protein was strongly positive in lncRNA-Bvht group. The expression of troponin T and ganglion protein in lncRNA-Bvht group was significantly higher than that in blank vector group and bone marrow mesenchymal stem cell group. The results showed that the expression of troponin T and sarcomere protein in lncRNA-Bvht group was significantly higher than that in blank vector group and bone marrow mesenchymal stem cell group. It can effectively promote the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocyte-like cells in vitro.
【作者單位】： 中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院急診科;
【基金】：國家自然科學基金(81070125)“抗凋亡與促血管生成miRNA-378干預MSCs治療心梗后心衰的機制研究”;國家自然科學基金(81270213)“ANGⅡ/AT1/SMAD/CX43通路在心肌干細胞提高心梗大鼠心電生理學穩(wěn)定性和室顫閾值的作用機制研究”;國家自然科學基金(81670306)“心肌干細胞經(jīng)IGF-1/STAT/miR-155通路下調(diào)AT1R改善心肌梗死后心電生理穩(wěn)定性機理研究” 廣東省科技計劃項目(2014A020211002)“LncRNA-Bvht/MESP1/N-cadherin通路調(diào)控MSCs向心肌細胞定向分化的機制研究”;廣東省科技計劃項目(2010B031600032)“抗凋亡與促血管生成miRNA-378干預MSCs治療心梗后心衰的機制研究” 高校基本科研業(yè)務費中山大學青年教師重點培育項目(13ykzd16)“PPAR-γ/TGF-β1/Smad/CX43通路在PPAR-γ干預MSCs治療心梗后心衰的療效及機制研究” 廣東省醫(yī)學科研基金(A2016264)”心肌干細胞經(jīng)由HIF-1α/Apelin/APJ/ACE2通路下調(diào)ANGII改善心肌梗死大鼠心電生理學穩(wěn)定性的機制研究”~~
【分類號】：R54

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 董紅燕,周中新,于紅麗,徐夏紅,張中明;內(nèi)皮素-1在兔骨髓間質(zhì)干細胞體外誘導為心肌樣細胞中的作用[J];徐州醫(yī)學院學報;2004年03期

2 方志成;王瑋;黃從新;王曉勛;何朝榮;;骨髓間充質(zhì)干細胞體外定向誘導心肌樣細胞的實驗研究[J];重慶醫(yī)學;2006年02期

3 編輯部;;科學家成功構建出心肌樣細胞[J];中國醫(yī)藥科學;2012年09期

4 蘇立,陳運貞,張曉剛,張潤峰,馬旭;5-氮胞苷誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的實驗研究[J];重慶醫(yī)科大學學報;2004年03期

5 方志成,王瑋,王衛(wèi)民,湯天軍;臍血間充質(zhì)干細胞體外定向誘導心肌樣細胞超微結構特征研究[J];實用醫(yī)學雜志;2005年17期

6 賈紹斌,馬萍,劉曉方,仇玉民,徐清斌,戴貴東;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外定向誘導分化為心肌樣細胞的實驗研究[J];中國心血管雜志;2005年05期

7 李為真;嚴軼文;戴秋艷;張治;朱彥琪;孫寶貴;;人外周血單個核細胞向心肌樣細胞分化的研究[J];中華老年心腦血管病雜志;2007年02期

8 李寧;侯相麟;;人骨髓間充質(zhì)干細胞分化為心肌樣細胞的研究[J];中國臨床藥理學與治療學;2007年04期

9 馬健;唐海沁;翟志敏;朱薇波;李結華;;人骨髓間充質(zhì)干細胞體外純化及心肌樣細胞定向誘導分化后的特征分析[J];中國老年學雜志;2007年09期

10 佟鐵壁;孫旗;胡煜;;骨髓干細胞體外培養(yǎng)誘導為心肌樣細胞的研究[J];實用醫(yī)學雜志;2006年19期

相關會議論文 前5條

1 姜輝;王輝山;汪曾煒;朱洪玉;李新民;;不同濃度5-氮胞苷體外誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞轉(zhuǎn)化為心肌樣細胞[A];中華醫(yī)學會第七次全國胸心血管外科學術會議暨2007中華醫(yī)學會胸心血管外科青年醫(yī)師論壇論文集心血管外科分冊[C];2007年

2 曾俊義;魏云峰;汪泱;謝安;婁遠蕾;張梅;應國秋;徐信群;;間接接觸共培養(yǎng)下骨髓間充質(zhì)干細胞分化為心肌樣細胞及相關調(diào)控基因的時序表達[A];江西省第四次中西醫(yī)結合心血管學術交流會論文集[C];2008年

3 陳新云;曾智;饒莉;陳玉成;李勝富;;CT-1對骨髓間充質(zhì)干細胞分化為心肌樣細胞的作用[A];第十次中國中西醫(yī)結合學會心血管病學術大會暨第五次江西省中西醫(yī)結合學會心血管病學術大會論文匯編[C];2010年

4 單志新;余細勇;林秋雄;李曉紅;符永恒;鄧春玉;楊敏;林曙光;;人骨髓間充質(zhì)干細胞來源的心肌樣細胞中microRNA和干細胞基因的表達[A];第六屆海峽兩岸心血管科學研討會論文摘要集[C];2007年

5 周娜;朱靜;田杰;李婭莎;鄧兵;;MSCs特化心肌樣細胞過程中與GCN5促分化作用相關蛋白的篩選[A];第八次全國醫(yī)學遺傳學學術會議(中華醫(yī)學會2009年醫(yī)學遺傳學年會)論文摘要匯編[C];2009年

相關博士學位論文 前2條

1 許皓;Islet-1促MSCs向心肌樣細胞分化中甲基化/乙�；换プ饔脵C制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2016年

2 孔曉丹;骨髓源性成體干細胞體外轉(zhuǎn)化為心肌樣細胞的研究[D];大連醫(yī)科大學;2006年

相關碩士學位論文 前10條

1 沈晗;wnt5b誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的實驗研究[D];蘇州大學;2015年

2 孫國棟;不同濃度胎牛血清培養(yǎng)下骨髓間充質(zhì)干細胞誘導為心肌樣細胞的比較[D];山西醫(yī)科大學;2015年

3 夏波;骨髓和胎盤基蛻膜來源間充質(zhì)干細胞在小腸黏膜下層三維培養(yǎng)體系中成心肌樣細胞分化能力比較[D];四川醫(yī)科大學;2015年

4 原暉華;整合素連接激酶過表達促進豬骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化[D];南京大學;2014年

5 謝新林;黃芪甲苷聯(lián)合5-氮胞苷誘導hUCB-MSCs分化為心肌樣細胞并抑制其凋亡[D];南華大學;2015年

6 陳玉梅;LYRM1基因沉默致心肌樣細胞凋亡的線粒體機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2016年

7 劉源;FGF-2聯(lián)合Wnt-11誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞定向分化的實驗研究[D];河北北方學院;2016年

8 高辰瑋;骨形態(tài)蛋白2聯(lián)合丹酚酸B誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的研究[D];河北北方學院;2012年

9 才曉君;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外定向誘導分化為心肌樣細胞的實驗研究[D];山東大學;2005年

10 張曉瓊;BMSCs向心肌樣細胞誘導后治療大鼠心肌缺血性損傷的實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學;2014年

，

本文編號：1572625