本文關(guān)鍵詞：CYP4A11和CYP4F2基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓和冠心病的相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南方醫(yī)科大學(xué)》 2012年

CYP4A11和CYP4F2基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓和冠心病的相關(guān)研究

劉俊花  

【摘要】：研究目的 高血壓(Hypertension)是一種以動脈血壓持續(xù)升高為主要特征的慢性疾病,其病理過程常涉及動脈血管壁增厚、心肌纖維化、左室肥大和腎血管硬化等,可引起高血壓靶器官的損害,是腦卒中、心肌梗死、充血性心力衰竭和高血壓性腎病發(fā)病、死亡的主要危險因素。高血壓根據(jù)病因可分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類,繼發(fā)性高血壓是由某些確定的疾病或病因(如腎臟疾病、內(nèi)分泌疾病、心血管病變、顱腦病變等)引起的血壓升高,約占所有高血壓的5%；在絕大多數(shù)患者中,高血壓的病因不明,稱為原發(fā)性高血壓(essential hypertension, EH),約占全部高血壓患者的95%以上,通常簡稱為高血壓。冠狀動脈粥樣硬化性心臟病指冠狀動脈粥樣硬化使血管狹窄或阻塞,或(和)因冠狀動脈功能性改變(痙攣)導(dǎo)致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟病,簡稱冠心病(coronary heart disease, CHD),亦稱缺血性心臟病,包括心絞痛和心肌梗死。冠心病是動脈粥樣硬化導(dǎo)致器官病變的最常見類型,也是嚴重危害人民健康的常見病。 世界衛(wèi)生組織(WHO)的調(diào)查報告顯示,冠心病至今仍是人類死亡的主要原因之一,且發(fā)病率逐年上升,其治療尤其是預(yù)防顯得極為重要。肥胖、血脂異常、高血壓、糖尿病、吸煙、飲酒等一些傳統(tǒng)危險因素與冠心病的發(fā)生有關(guān),其預(yù)防主要是對各種危險因素進行控制,而原發(fā)性高血壓是冠心病的重要危險因素之一,其發(fā)生與冠心病密切相連,有效預(yù)防高血壓也因此備受關(guān)注。高血壓的傳統(tǒng)危險因素包括高鹽飲食、抽煙、飲酒和長期精神緊張等。EH和CHD都是遺傳和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果,是多基因相關(guān)疾病,具有明顯的家族聚集性,遺傳因素在其發(fā)病起重要作用。隨著分子生物學(xué)的迅速發(fā)展及人類基因組計劃的進行,尋找心血管疾病易感基因并從基因水平闡明其發(fā)病機制成為醫(yī)學(xué)研究的熱點。大規(guī)模篩查EH和CHD易感人群,實施有效預(yù)防措施,對延緩或防止心血管疾病的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。 研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性花生四烯酸(Arachidonic acid, AA)及其代謝產(chǎn)物對心血管系統(tǒng)具有重要的調(diào)節(jié)作用。早期研究發(fā)現(xiàn)AA主要由環(huán)氧化酶(cyclooxygenase, COXs)和脂質(zhì)氧化酶(lipoxygenase, LOXs)代謝,后研究發(fā)現(xiàn)AA還可通過細胞色素P450表氧化酶和ω-羥化酶代謝,分別生成表氧化二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids, EETs)和羥化二十碳四烯酸(hydroxyeicosenoic acids, HETEs)。20-HETE是腎、腦、腸系膜和骨骼肌小動脈的強效收縮劑,在腎臟中又能促進尿鈉排泄,具有升壓和降壓雙重作用；還能抑制血管內(nèi)皮超極化因子介導(dǎo)的冠脈舒張,加重冠脈缺血引起的心肌損傷程度。在不同病理狀態(tài)下,20-HETE在心血管功能的改變中發(fā)揮重要作用,參與EH、CHD等心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展。 細胞色素P450(cytochrome P450, CYP)是最重要的微粒體混合功能氧化酶,參與體內(nèi)外眾多物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化,主要包括CYP1-4家族和A、B、C、D、E、F等亞家族。CYP同工酶在腎臟、肝臟、心臟、血管內(nèi)皮和平滑肌等多種組織中表達,其中CYP4A11和CYP4F2是代謝AA的重要ω-羥化酶,能夠代謝AA生產(chǎn)20-HETE。CYP4A11定位于染色體1p33,長約12.57kbp,有12個外顯子和11個內(nèi)含子,編碼519個氨基酸；CYP4F2定位于染色體19p13.11,長約20kbp,由13個外顯子和12個內(nèi)含子組成,編碼520個氨基酸。CYP4A11和CYP4F2這兩個基因的突變位點很多且具有明顯的種族差異,在中國漢族人群中普遍存在且具有功能意義的突變主要是-845AG (rs9332978)、-296CI、8590TC (rs1126742)及CYP4F2rs2108622和rs1558139,研究發(fā)現(xiàn)這些位點可能與原發(fā)性高血壓和冠心病具有相關(guān)性,但未得出一致結(jié)論,因此研究中國人CYP4A11和CYP4F2基因多態(tài)性與高血壓和冠心病的相關(guān)性具有重要的科學(xué)價值和廣泛的社會效益。本研究通過病例-對照法探討了CYP4A11的-845AG、-296CT、8590TC和CYP4F2rs1558139基因多態(tài)性與中國漢族人群原發(fā)性高血壓和冠心病的易感性。 研究對象 所有原發(fā)性高血壓和冠心病病人均為廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院住院病人,對照組為同期在健康體檢中心體檢的人。其中原發(fā)性高血壓患者132例,冠心病患者168例,原發(fā)性高血壓和并冠心病患者196例,對照者297例。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析各病例組與對照組年齡、性別、吸煙率、飲酒率等條件具有可比性。 1.EH患者入選標準： 納入標準：根據(jù)美國JNC7及2003年ESH/ESC歐洲高血壓指南標準,即坐位時收縮壓/舒張壓≥140/90mmHg (1mmHg=0.133kPa),且在第1次診斷后的2個月內(nèi)3次偶測血壓均符合上述標準,已確診為原發(fā)性高血壓；或目前正在服用降壓藥物者。 排除標準：1)繼發(fā)性高血壓； 2)肝腎移植患者或肝腎功能不全者； 3)腦卒中患者； 4)患有惡性腫瘤患者； 5)患有糖尿病、甲狀腺疾病等其它內(nèi)分泌代謝疾病及其它嚴重的全身性疾病患者； 6)未進行有效避孕的育齡婦女、妊娠和哺乳期婦女。 2.CHD患者入選標準： 納入標準：經(jīng)冠脈造影冠脈狹窄≥50%確診為冠心病者；或有典型心絞痛史患者。 排除標準：1)肝腎移植患者或肝腎功能不全者； 2)腦卒中患者； 3)患有惡性腫瘤患者； 4)患有糖尿病、甲狀腺疾病等其它內(nèi)分泌代謝疾病及其它嚴重的全身性疾病患者； 5)未進行有效避孕的育齡婦女、妊娠和哺乳期婦女。 3.健康受試者入選標準：納入標準：1)排除高血壓病和冠心��； 2)血常規(guī)、尿常規(guī)、凝血功能、胸部X光及血生化、心電圖檢查正常,無肝腎疾病； 3)無惡性腫瘤； 4)無糖尿病、甲狀腺疾病等內(nèi)分泌代謝疾病及其它嚴重的全身性疾病； 5)無妊娠計劃或正在哺乳的婦女。 研究方法 實驗對象空腹8小時以上,取靜脈血采用標準酶比色法測定總膽固醇(totalcholesterol, TC)、甘油三脂(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(high density liprotein eholesterol, HDL-C)。另取5m1靜脈血置于EDTA-K2抗凝管中,按人血液DNA提取試劑盒操作步驟提取白細胞基因組DNA,所提DNA采用高分辨率熔解曲線(high resolution melting, HRM)分析法進行基因型分析。 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行處理,計量資料用均數(shù)±標準差(x±s)表示,采用兩樣本t檢驗比較高血壓組和對照組符合正態(tài)分布的計量資料；等位基因頻率是否符合Hardy-Weinberg平衡定律和基因型頻率和等位基因頻率分析應(yīng)用卡方檢驗,危險因素分析采用多元logistic回歸分析；連鎖不平衡分析(LD)用Haploview4.2軟件,單體型分析應(yīng)用R2.14.2分析軟件；以雙側(cè)P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果 1.本研究建立了一種操作簡便、成本低、通量高、速度快、靈敏度高、特異性強的高分辨率熔解曲線(high resolution melting, HRM)分析法檢測CYP4A11-845AG、-296CT、8590TC和CYP4F2rs1558139基因型,該HRM分析法實現(xiàn)了真正的閉管操作,減少交叉污染。 2.采用HRM分析法對328例無血緣關(guān)系的原發(fā)性高血壓患者及297例健康對照者進行CYP4A118590TC、-296CT、-845AG和CYP4F2rs1558139基因分型,結(jié)果顯示：CYP4A118590C、-296T、-845G和CYP4F2rs1558139T等位基因在中國漢族原發(fā)性高血壓人群中的分布頻率分別為0.265、0.085、0.168和0.291,其中CYP4A11-845G等位基因頻率與對照組有差異(P=0.049)。采用logistic回歸分析排除傳統(tǒng)危險因素的影響,對于全體,CYP4A11-845AG顯性模型(AA versus AG+GG)仍存在顯著性差異(P=0.031)。對于女性,高血壓組和對照組CYP4A118590TC、-296CT和-845AG的顯性模型(分別為TTversusTC+CC、CCversusCT+TT和AA versus AG+GG)仍然有差異,P值分別為0.032、0.020和0.045；高血壓組的T-C-G單體型頻率顯著高于對照的T-C-A單體型(P=0.016),其發(fā)病率提高了1.909倍。 3.采用HRM分析法對364例(其中196例患有原發(fā)性高血壓病)無血緣關(guān)系的冠心病患者及年齡和性別相匹配的429例(其中132例患有原發(fā)性高血壓病)健康對照者進行CYP4A118590TC、-296CT、-845AG和CYP4F2rs1558139基因分型,結(jié)果顯示：CYP4A118590C、-296T、-845G和CYP4F2rs1558139T等位基因在中國漢族冠心病人群中的分布頻率分別為0.276、0.076、0.176和0.372。采用logistic回歸分析排除傳統(tǒng)危險因素的影響,對于全體,冠心病組和對照組的CYP4A11-845AG顯性模型(AA versus AG+GG)仍存在顯著性差異(P=0.026)。對于女性,冠心病組和對照組的CYP4A11-845AG顯性模型(AA versus AG+GG)存在顯著性差異(P=0.045)。冠心病組和對照組CYP4A11-845AG的基因型(AA versus AG versus GG)存在差異(P=0.034),但顯性模型(AA versus AG+GG)差異則消失(P=0.125)。 冠心病組和對照組都排除高血壓病患者后,采用logistic回歸分析排除傳統(tǒng)危險因素的影響,對于全體,冠心病組和對照組的CYP4A11-845AG顯性模型(AA versus AG+GG)仍存在顯著性差異(P=0.039)；對于女性,冠心病組和對照組CYP4A11-845AG的基因型(AA versus AG versus GG)差異則消失(P=0.073)。單體型分析結(jié)果顯示冠心病組的T-C-G單體型頻率顯著高于對照的T-C-A單體型(P=0.021),其發(fā)病率提高了1.633倍。 結(jié)論 1.CYP4A11-845AG位點的AG+GG基因型增加中國漢族原發(fā)性高血壓病的風(fēng)險,與男性不相關(guān),與女性相關(guān)。 2. CYP4A118590TC和-296CT基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性與性別有關(guān),8590TC+CC和-296CT+TT增加女性人群患病風(fēng)險。 3. CYP4A118590TC、-296CT和-845AG三個SNPs建立單體型,高血壓組的T-C-G單體型頻率顯著高于對照T-C-A單體型,其發(fā)病率提高了1.909倍。 4. CYP4A11-845AG的AG+GG基因型增加冠心病的患病風(fēng)險,主要是在女性人群中。 5.冠心病組和對照組都排除高血壓這一危險因素后,CYP4A11-845AG的AG+GG基因型仍然增加冠心病的患病風(fēng)險,說明G等位基因可作為冠心病的危險標志基因。 6.排除高血壓病例后,冠心病組的T-C-G單體型頻率顯著高于對照的T-C-A單體型(P=0.021),其發(fā)病率提高了1.633倍。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R544.1;R541.4
【目錄】：

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【相似文獻】

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  本文關(guān)鍵詞：CYP4A11和CYP4F2基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓和冠心病的相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：154597