本文關鍵詞： 低氧性肺動脈高壓 低氧誘導因子α Brm蛋白 內(nèi)皮細胞　出處：《中國病理生理雜志》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:本研究擬探討低氧誘導因子1α(HIF-1α)在低氧誘導的血管內(nèi)皮細胞Brm表達上調中的作用及機制,為低氧性肺動脈高壓的防治提供理論依據(jù)。方法:在內(nèi)皮細胞中過表達或siRNA干擾HIF-1α的表達,并給予1%低氧處理24 h后,運用螢光素酶報告基因檢測方法檢測Brm啟動子的轉錄活性,運用RT-qPCR檢測Brm的mRNA表達水平,運用Western blot檢測Brm的蛋白表達水平。運用ChIP技術檢測低氧條件下HIF-1α與Brm啟動子區(qū)域的結合變化情況。結果:過表達HIF-1α可顯著上調Brm的啟動子活性、mRNA及蛋白表達,而siRNA干擾HIF-1α可顯著抑制Brm的啟動子活性、mRNA及蛋白表達,ChIP實驗揭示低氧可顯著增強HIF-1α與Brm啟動子的結合。結論:低氧上調內(nèi)皮細胞中Brm的表達依賴HIF-1α的轉錄調控作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the role and mechanism of hypoxia inducible factor-1 偽 (HIF-1 偽) in the up-regulation of Brm expression in cultured vascular endothelial cells induced by hypoxia. Methods: overexpression of HIF-1 偽 in endothelial cells or siRNA interference with HIF-1 偽 expression were observed after treatment with 1% hypoxia for 24 h. The transcriptional activity of Brm promoter was detected by luciferase reporter gene assay, and the mRNA expression level of Brm was detected by RT-qPCR. Western blot was used to detect the expression of Brm protein, and ChIP technique was used to detect the binding changes of HIF-1 偽 and Brm promoter region under hypoxia. Results: overexpression of HIF-1 偽 could significantly up-regulate the expression of HIF-1 偽 and protein in Brm promoter. However, siRNA interference with HIF-1 偽 could significantly inhibit the expression of Brm promoter activity mRNA and protein. The experiment showed that hypoxia could significantly enhance the binding of HIF-1 偽 to Brm promoter. Conclusion: hypoxia upregulated the expression of Brm in endothelial cells dependent on the transcriptional regulation of HIF-1 偽.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學高原軍事醫(yī)學系病理生理學與高原病理學教研室;第三軍醫(yī)大學高原軍事醫(yī)學系全軍高原醫(yī)學重點實驗室;第三軍醫(yī)大學高原軍事醫(yī)學系高原特需藥品與衛(wèi)生裝備研究室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81501626) 軍隊重大項目(No.AWS14C007) 國家科技部“973”項目(No.2012CB518201)
【分類號】：R544.1

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本文編號：1543599