本文關鍵詞： 內皮祖細胞 磁性納米粒子 捕獲 鐵支架　出處：《西南交通大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：在心血管支架介入治療的過程中,有可能會導致支架內再狹窄和晚期血栓,影響治療的安全性和長期療效。過去的幾十年里,研究者們已經(jīng)采用多種改性技術來提高血管支架的生物相容性和血液相容性,血管支架經(jīng)歷多次變革,目前已發(fā)展到包括裸金屬支架,藥物洗脫支架,內皮祖細胞(EPCs)捕獲支架,可降解金屬支架和時序性功能支架在內的多種支架并存的時代。EPCs作為一種多能干細胞,能夠定向分化成為內皮細胞,對于血管支架植入后損傷血管內皮細胞層的修復重建具有重要作用。構建EPCs捕獲支架是目前心血管疾病治療的一個研究熱點。但是由于血液中EPCs數(shù)量較少和捕獲特異性不強等原因,導致支架表面EPCs的數(shù)量不足從而限制了內皮化的進程。本論文用磁性納米粒子特異性捕獲血液中的EPCs,并且引入鐵支架作為磁響應源,共同作用提高納米粒子表面捕獲率。首先采用共價接枝將CD34抗體修飾到雙羧基PEG修飾的四氧化三鐵磁性納米粒子上,構建能夠特異性識別EPCs的功能型磁性納米粒子。通過紅外檢測、水合粒徑分析、透射電鏡等方法對修飾前后磁性納米粒子的理化性質進行檢測,通過將其與EPCs共混培養(yǎng)評價細胞活性,以及通過溶血率和部分凝血酶時間等血液學評價血液相容性。實驗結果表明CD34抗體成功修飾到磁性納米粒子表面,修飾后的納米粒子在一定的濃度范圍內能夠促進細胞增殖,并且一定程度上延長血液的凝血時間。其次評價CD34抗體修飾后的磁性納米粒子與EPCs短時間的識別效果及在外加磁場的作用下其對EPCs的捕獲效果,結果表明Fe_3O_4-PEG@CD34納米粒子短時間對EPCs具有較好的識別結合作用,并且能在外加磁場作用下初步實現(xiàn)在動態(tài)環(huán)境下對EPCs的捕獲。最后開展了在外加磁場作用下該功能化納米粒子在體內捕獲EPCs并將其定向歸巢到鐵支架表面的情況。結果表明Fe_3O_4-PEG@CD34納米粒子能夠特異性識別捕獲血液中的CD34陽性細胞,并且能在外加磁場的作用下將其迅速歸巢到鐵支架表面,這為后期實現(xiàn)支架表面快速內皮化提供了可能。
[Abstract]:In the course of interventional treatment of cardiovascular stents, it is possible to cause restenosis and late thrombosis in the stent, affecting the safety and long-term efficacy of the treatment. Researchers have used a variety of modified techniques to improve the biocompatibility and blood compatibility of vascular stents, which have undergone many changes, including bare metal stents, drug-eluting stents, and endothelial progenitor cells (EPCs) capture stents. As a kind of pluripotent stem cells, EPCs can be differentiated into endothelial cells as a kind of pluripotent stem cells. It plays an important role in the repair and reconstruction of vascular endothelial cell layer after vascular stent implantation. The construction of EPCs capture stent is a research hotspot in the treatment of cardiovascular disease at present. However, because of the low number and capture of EPCs in blood, it is a hot topic in the treatment of cardiovascular disease. Lack of specificity and other reasons, The lack of EPCs on the surface of the scaffold limits the process of endothelialization. In this paper, the magnetic nanoparticles were used to specifically capture the EPCs in the blood, and the iron scaffold was introduced as the magnetic response source. The covalent grafting of CD34 antibody onto the ferromagnetic nanoparticles modified by dicarboxylic PEG was used to improve the surface trapping efficiency of nanoparticles. The functional magnetic nanoparticles which can specifically recognize EPCs were constructed. The physical and chemical properties of magnetic nanoparticles before and after modification were detected by infrared detection, hydration particle size analysis and transmission electron microscopy. The cell activity was evaluated by mixing it with EPCs, and the blood compatibility was evaluated by hemolysis rate and partial thrombin time. The results showed that CD34 antibody was successfully modified to the surface of magnetic nanoparticles. The modified nanoparticles can promote cell proliferation in a certain concentration range. To some extent, the coagulation time of blood was prolonged. Secondly, the recognition effect of magnetic nanoparticles modified with CD34 antibody and EPCs for a short time and the capture effect of EPCs under the action of external magnetic field were evaluated. The results show that Fe_3O_4-PEG@CD34 nanoparticles have good recognition and binding to EPCs in short time. Finally, the functionalized nanoparticles can capture EPCs in vivo and homing it to the surface of the iron scaffold under the action of external magnetic field. The results showed that Fe_3O_4-PEG@CD34 nanoparticles could specifically identify CD34 positive cells in the captured blood. And it can quickly homing to the surface of iron scaffold under the action of external magnetic field, which makes it possible to realize the rapid endothelialization of the surface of the scaffold in the later stage.
【學位授予單位】：西南交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R54;R318.08

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