Apelin-13促進臍帶華通膠間充質(zhì)干細胞分化成血管網(wǎng)
本文關(guān)鍵詞: 間充質(zhì)干細胞 apelin- 血管生成 三維培養(yǎng) 臍帶 出處:《天津醫(yī)藥》2015年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探索apelin-13對干細胞定向血管網(wǎng)分化的調(diào)控作用。方法采用組織塊貼壁法從人臍帶華通膠組織中分離間充質(zhì)干細胞,流式細胞儀檢測其免疫表型。取第3代人華通膠間充質(zhì)干細胞,分別接種于4個培養(yǎng)瓶中,記為A1、A2、A3、A4組,用誘導(dǎo)液誘導(dǎo)7 d,每天向4組中分別加入濃度0、1×10-6、10×10-6、100×10-6mol/L的apelin-13 20μL,倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)及生長情況,并對其進行血管性血友病因子(v WF)抗體免疫熒光染色及CD31流式細胞學(xué)鑒定。使用水凝膠的三維培養(yǎng)基對誘導(dǎo)后的內(nèi)皮細胞進行培養(yǎng),并按照原A1、A2、A3、A4組的順序重新依次編號為S1、S2、S3、S4組。每天分別向S1、S2、S3、S4組中加入濃度0、1×10-6、10×10-6、100×10-6mol/L的apelin-13 20μL。7 d后倒置顯微鏡下觀察細胞的形態(tài)、生長情況及在三維培養(yǎng)基中形成血管樣結(jié)構(gòu)情況。結(jié)果人華通膠間充質(zhì)干細胞可以誘導(dǎo)分化為v WF免疫熒光染色陽性的內(nèi)皮樣細胞。隨著apelin-13蛋白濃度的增加,CD31陽性表達率也隨之升高。顯微鏡下觀察到內(nèi)皮樣細胞在水凝膠的三維培養(yǎng)基中能夠形成血管樣結(jié)構(gòu)。結(jié)論證實apelin-13參與并調(diào)控人臍帶華通膠間充質(zhì)干細胞分化形成血管網(wǎng)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of apelin-13 on the differentiation of stem cell directed vascular network. Methods Mesenchymal stem cells were isolated from human umbilical cord Huatong glue tissue by tissue mass adherence method. Flow cytometry was used to detect its immunophenotype. Mesenchymal stem cells (MSCs) of the third generation of human Huatong gum were inoculated in 4 culture flasks and recorded as A1A2A2A3A4 group. After induction with the inducer for 7 days, apelin-13 20 渭 L of 10 脳 10 -6 mol / L 10 脳 10 -6 渭 L apelin-13 was added to the 4 groups each day. The morphology and growth of the cells were observed under inverted microscope. The vascular Willebrand factor v WF antibody was detected by immunofluorescence staining and CD31 flow cytology. The induced endothelial cells were cultured in hydrogel culture medium. In the same order, the former A1A1A2OA3A4 group was renumbered as S1OS2S2OS3OS4 group. The morphology of the cells was observed under inverted microscope after 20 渭 7d after adding 10 脳 10-6U 10 脳 10-6U 10 脳 10-6mol / L apelin-13 20 渭 7d to the S1OS2S2OS3 S4 group, respectively, in the order of the original A1A1A2A2A3A4 group, and the order of the former A1A1A2A2A3A4 group was as follows. Results the mesenchymal stem cells of human Huatong gum could be induced to differentiate into vWF-positive endothelial cells. With the increase of apelin-13 protein concentration, CD31 was positive. It was observed under microscope that endothelioid cells could form vascular-like structure in hydrogel culture medium. Conclusion it is confirmed that apelin-13 participates in and regulates the differentiation of mesenchymal stem cells from human umbilical cord Huatong gum to form vascular network.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)海軍臨床學(xué)院;海軍總醫(yī)院心臟中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81170094)
【分類號】:R329.2
【參考文獻】
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,本文編號:1522922
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