本文關(guān)鍵詞：Wnt通路抑制劑Wnt-C59對病理性心肌肥大治療作用的研究　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： Wnt信號通路 Wnt-C59 病理性心肌肥大 治療作用

【摘要】：研究背景:心血管疾病嚴(yán)重威脅著當(dāng)今中國人民健康,隨著人們生活質(zhì)量的提高,其患病率也呈快速上升趨勢。病理性心肌肥大是多種心血管疾病的重要病理基礎(chǔ),負(fù)荷增加、炎癥刺激、激素異常分泌等外界因素均可導(dǎo)致心肌病理性肥大。如高血壓使心臟的后負(fù)荷增加可導(dǎo)致心肌肥大。病變早期心臟代償性向心肥大,心肌收縮力增強(qiáng),使心輸出量維持到正常水平。若病理刺激長期存在,心肌肥大持續(xù)加重將導(dǎo)致心臟失代償,出現(xiàn)離心性肥大,心肌細(xì)胞凋亡數(shù)目增加且逐漸被成纖維細(xì)胞取代,心室壁由厚變薄,心肌收縮力下降,最后可導(dǎo)致嚴(yán)重的心律失常和心力衰竭。抑制心肌肥大進(jìn)程可有效的改善心功能,提高心血管病患者的生活質(zhì)量。目前的研究認(rèn)為,致病理性心肌肥大的主要機(jī)制有交感神經(jīng)系統(tǒng)亢進(jìn)、RAAS系統(tǒng)的激活等。針對這些機(jī)制臨床上使用的藥物主要有:β-受體阻滯劑(β-blocker)、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)以及血管緊張素受體阻滯劑(ARB)。盡管這些藥物對心肌肥大有一定的治療效果,但其作用效果有限,尚不能完全阻斷病理性心肌肥大的發(fā)展,能否逆轉(zhuǎn)心肌肥大也存在爭議,故新型抗心肌肥大藥物亟需開發(fā)和應(yīng)用。近年來,大量研究表明Wnt通路的激活參與了病理性心肌肥大的發(fā)生,阻斷Wnt通路有可能成為治療病理性心肌肥大的新靶點(diǎn)。但目前尚未報道有Wnt通路的阻滯劑被用于治療心肌肥大的研究。Wnt通路有經(jīng)典通路和非經(jīng)典通路之分,兩條通路均參與了病理性心肌肥大的進(jìn)程。經(jīng)典通路主要通過其下游的β-catenin入核來誘導(dǎo)肥大基因的表達(dá),而非經(jīng)典通路主要通過其下游的信號分子NFAT入核來誘導(dǎo)肥大基因的表達(dá)。常用的Wnt通路抑制劑(sFRPs、DDKs)通常只阻斷單一經(jīng)典通路,由于經(jīng)典和非經(jīng)典Wnt通路在心肌肥大發(fā)生過程中均被激活,我們假設(shè)非選擇性地抑制這兩條信號通路將達(dá)到更佳的抗心肌肥大作用。Wnt-C59可以選擇性抑制MBOAT家族的Porcupine酶,從而減弱其介導(dǎo)的Wnt蛋白棕櫚�；饔�,從而抑制哺乳動物所有Wnt蛋白的激活,所以其具備同時阻斷經(jīng)典和非經(jīng)典Wnt通路的作用。在抑制腫瘤增殖的實(shí)驗(yàn)中,Wnt-C59已經(jīng)發(fā)揮了顯著的治療作用。本研究從細(xì)胞和動物實(shí)驗(yàn)兩個層面研究Wnt-C59對病理性心肌肥大的治療作用,并通過對經(jīng)典和非經(jīng)典Wnt通路中多個信號分子的檢測來驗(yàn)證Wnt-C59的阻斷效果,進(jìn)而為Wnt-C59的臨床應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。研究方法:1.a.給予C57/BL6J小鼠實(shí)施主動脈縮窄術(shù)(TAC)誘導(dǎo)其病理性心肌肥大,使用Wnt-C59進(jìn)行干預(yù)后觀察心肌組織蓬亂蛋白(DVL-1)的mRNA表達(dá)量、小鼠體重、心功能、心臟質(zhì)量指數(shù)(心臟質(zhì)量/體重)、心肌細(xì)胞橫截面積以及心肌細(xì)胞凋亡等指標(biāo)。b.給予大鼠乳鼠心肌細(xì)胞(NRVM)血管緊張素II(Ang-II)刺激誘導(dǎo)細(xì)胞水平的病理性心肌肥大,使用Wnt-C59干預(yù)后觀察心肌細(xì)胞DVL-1的mRNA表達(dá)量、心肌細(xì)胞表面積。2.在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,用免疫熒光染色觀察β-catenin入核,用Q-PCR檢測Wnt信號通路與心肌肥大相關(guān)的靶基因C-myc和Cyclin-D1的表達(dá)量。3.在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中用免疫熒光染色觀察轉(zhuǎn)錄因子NFAT入核,用Q-PCR檢測心肌肥大關(guān)聯(lián)基因ANF、α-actin、β-MHC的表達(dá)量。研究結(jié)果:1.Wnt-C59明顯減輕由TAC誘導(dǎo)的小鼠心肌肥大,明顯減輕Ang-II誘導(dǎo)的NRVM肥大。2.Wnt-C59對TAC誘導(dǎo)的心功能降低、心肌細(xì)胞凋亡增加等有顯著的拮抗作用。3.外界的致肥大刺激可通過Wnt-β-catenin經(jīng)典通路以及Wnt/Ca2+非經(jīng)典通路的激活使心肌細(xì)胞發(fā)生肥大;Wnt-C59干預(yù)可阻斷兩條通路中關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子β-catenin以及NFAT的入核,從而發(fā)揮抑制病理性心肌肥大的作用。結(jié)論:Wnt-C59通過抑制經(jīng)典和非經(jīng)典Wnt信號通路,阻斷心肌細(xì)胞內(nèi)β-catenin和NFAT的入核,下調(diào)C-myc、Cylin-D1、ANF、α-actin、β-MHC等肥大關(guān)聯(lián)基因的表達(dá),繼而發(fā)揮抑制病理性心肌肥大的作用。
[Abstract]:Background: cardiovascular disease is a serious threat to people's health China today, with improved quality of life, its prevalence rate has also increased rapidly. Pathological cardiac hypertrophy is an important pathological basis of cardiovascular diseases, the increase of load, inflammation, abnormal hormone secretion and other external factors can lead to cardiac hypertrophy such as hypertension. The cardiac afterload increase can lead to myocardial hypertrophy. Early compensatory hypertrophy of heart disease heart, enhance myocardial contractility, cardiac output to maintain the normal level. If the pathological stimuli exist for a long time, the heart muscle hypertrophy will lead to aggravate cardiac decompensation, appear eccentric hypertrophy, myocardial cell apoptosis and increase the number of being gradually become fiber cells replaced by thinner ventricular wall, decreased myocardial contractility, finally can lead to severe arrhythmia and heart failure. Inhibition of cardiomyocyte hypertrophy process may have Improve heart function effectively, improve the quality of life of patients with cardiovascular disease. The present study suggests that the main mechanism of cardiac hypertrophy induced by sympathetic nervous system hyperfunction, activation of the RAAS system. The drug for clinical use of these mechanisms are: beta blockers (beta -blocker), angiotensin converting enzyme (ACEI) inhibitors and angiotensin receptor blockers (ARB). Although these drugs have a certain therapeutic effect on myocardial hypertrophy, but the effect is limited, is still not completely blocked the development of cardiac hypertrophy, can reverse cardiac hypertrophy is also controversial, so the development and application of new anti drug to myocardial hypertrophy. In recent years here, a large number of studies show that the activation of Wnt pathway involved in pathological cardiac hypertrophy, blocking Wnt pathway may become a new target for treatment of pathological cardiac hypertrophy. But has not yet been reported with Wnt Channel blockers are used to study the.Wnt pathway for the treatment of cardiac hypertrophy is the classical pathway and non classical pathway points, two pathways are involved in the pathological process of cardiac hypertrophy. The classical pathway mainly through the expression of its downstream beta -catenin into the nucleus to induce hypertrophy gene expression, rather than by the classical pathway through the signal molecule downstream of NFAT into the nucleus to induce hypertrophy gene. Wnt pathway inhibitors commonly used (sFRPs, DDKs) usually only block a single classical pathway, the classical and non classical Wnt pathways were activated in the process of myocardial hypertrophy, we assume that non selective inhibition of this pathway will reach two anti hypertrophic effect of.Wnt-C59 better can selectively inhibit Porcupine enzyme of the MBOAT family, which weakens the Wnt protein palmitoylation effect mediated, thereby inhibiting activation of Wnt protein in all mammals, so the At the same time by blocking the classical and non classical Wnt signaling pathway. In the inhibition of tumor proliferation experiment, Wnt-C59 has played a significant therapeutic effect. The study from two aspects of Wnt-C59 cell and animal experiments on cardiac hypertrophy therapeutic effect, and through the detection of multiple signal molecules of classical and non classical pathway Wnt the verification of Wnt-C59 blocking effect, which lay a theoretical foundation for the clinical application of Wnt-C59. Methods: 1.a. C57/BL6J mice aorta constriction (TAC) and its pathological myocardial hypertrophy induced by Wnt-C59, in use after the intervention of disheveled protein (DVL-1) expression in myocardial tissue of mRNA mice, weight, heart the function, the heart mass index (heart weight / body weight), cardiomyocyte cross-sectional area and myocardial cell apoptosis index.B. treated neonatal rat cardiomyocytes (NRVM) angiotensin (Ang-II) stimulation Zhang Su II The level of induction of cell pathological myocardial hypertrophy, the expression of Wnt-C59 after myocardial cells were observed by DVL-1 mRNA, the cell surface area of.2. in the cell experiments, using immunofluorescence staining to observe the beta -catenin into the nucleus, with the expression of.3. Q-PCR detected Wnt signal pathway associated with cardiac hypertrophy and Cyclin-D1 target gene C-myc with immune in the experiment of fluorescence in cells was observed in the nuclear transcription factor NFAT, Q-PCR was used to detect myocardial hypertrophy associated gene ANF, -actin alpha, -MHC beta expression. Results: 1.Wnt-C59 significantly reduced TAC induced myocardial hypertrophy in mice, significantly reduced NRVM.2.Wnt-C59 and decreased Ang-II induced hypertrophy of heart function induced by TAC and myocardial cell apoptosis the increase has significant antagonistic effects of.3. induced by external stimulation can hypertrophy through Wnt- pathway and activation of Wnt/Ca2+ beta -catenin classic non classical pathway of myocardial cell hypertrophy; Wnt-C59 intervention can block the key transcription factor -catenin beta two pathways and NFAT into the nucleus, inhibit cardiac hypertrophy. Conclusion: Wnt-C59 can inhibit the classical and non classical Wnt signaling pathway, blocking beta -catenin and NFAT in myocardial cells into the nucleus, under Cylin-D1, ANF, C-myc, alpha -actin the expression of -MHC, beta hypertrophy associated genes, and then inhibit the cardiac hypertrophy.

【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R54

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 常蕓,林福美,呂丹云;運(yùn)動性與病理性心肌肥大[J];中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志;1989年01期

2 丁小凌,李云霞;心肌肥大的發(fā)生機(jī)理[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1990年05期

3 丁小凌,李云霞;心肌肥大的逆轉(zhuǎn)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1990年05期

4 李維根，高云秋，張繼峰，唐朝樞，唐軼，，崔志澄;血管緊張素Ⅱ在運(yùn)動性心肌肥大中的作用[J];中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志;1994年03期

5 武旭東;心肌肥大肽研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);1996年04期

6 羅惠蘭,何作云,馮兵;人心肌肥大時堿性成纖維細(xì)胞生長因子的表達(dá)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2000年07期

7 速曉華;堿性成纖維細(xì)胞生長因子與心肌肥大關(guān)系研究進(jìn)展[J];西南國防醫(yī)藥;2000年06期

8 常連慶;醛固酮誘導(dǎo)心肌肥大的機(jī)[J];高血壓雜志;2003年05期

9 姜志勝;心肌肥大過程中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[J];中國動脈硬化雜志;2005年02期

10 孫銀平,王省,白樺,邢東琦,吳立玲;心肌肥大的機(jī)制:絲裂素活化蛋白激酶抑制劑對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞血小板衍生生長因子受體表達(dá)的影響(英文)[J];中國臨床康復(fù);2005年07期

相關(guān)會議論文 前10條

1 劉瑜;李靜;唐向東;;鹽誘導(dǎo)激酶-1在心肌肥大與胚胎樣表型逆轉(zhuǎn)中的優(yōu)勢作用[A];中國藥理學(xué)會第十次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2009年

2 王程;李麗;張智國;凡棟;吳立玲;;脂聯(lián)素抑制心肌肥大時核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活化[A];第六屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會論文摘要集[C];2007年

3 陳杰;王蓓;;阻塞性睡眠呼吸暫停與心肌肥大[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

4 白寶寶;孫智慧;陶謙民;;轉(zhuǎn)錄因子在心肌肥大中的調(diào)控作用[A];2009年浙江省心電生理與起搏學(xué)術(shù)年會增刊[C];2009年

5 許閩廣;高凌峰;吉麗敏;董戰(zhàn)玲;符史干;;容量超負(fù)荷對大鼠心肌肥大和血壓的影響[A];中南地區(qū)第六屆生理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2004年

6 周小波;何作云;黃嵐;馮兵;;急性壓力超負(fù)荷致心肌肥大過程中心肌內(nèi)分泌因子活化及相互作用[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2004年

7 周小波;何作云;黃嵐;馮兵;;急性壓力超負(fù)荷致心肌肥大過程中心肌內(nèi)分泌因子[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第十次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2008年

8 衛(wèi)法泉;;泵衰與相關(guān)基質(zhì)研究進(jìn)展[A];2005年浙江省麻醉學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

9 朱肖星;徐云霞;景建;李華;陳定章;邢蓉;蘇麗萍;啜玉彩;馬曉濤;王文清;徐琳;;吡格列酮抑制成纖維細(xì)胞培養(yǎng)液引起心肌肥大的影響及機(jī)制[A];全國第十二屆心臟學(xué)會第十五屆心功能學(xué)會和《心臟雜志》編委會聯(lián)合學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

10 代治國;蔣學(xué)俊;王騰;王晶;;新生大鼠心肌Ito下降與心肌肥大的相關(guān)性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2004年

相關(guān)重要報紙文章 前4條

1 葛秋芳;增加蛋白質(zhì)REST含量可控制心肌肥大[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2007年

2 ;中藥復(fù)方能逆轉(zhuǎn)腹主動脈縮窄大鼠心肌肥大[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

3 孫劍;愛心護(hù)心七注意[N];衛(wèi)生與生活報;2005年

4 唐邊河;愛心護(hù)心有7條[N];北京科技報;2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 張懿瑋;病理性心肌肥大向心衰轉(zhuǎn)變的相關(guān)分子機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2012年

2 秦瑾;FRNK對體內(nèi)外心肌肥大的抑制作用[D];華中科技大學(xué);2006年

3 李躍華;TLRs介導(dǎo)的NF-κB信號通路在心肌肥大發(fā)生發(fā)展中作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2004年

4 蔡翔宇;STIM1分子生化特性研究及其生理功能探索[D];南開大學(xué);2013年

5 楊濤;L-精氨酸—一氧化氮途徑對病理性心肌肥大形成的抑制作用及相關(guān)機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

6 蘇菲菲;Kv4.3通道蛋白在壓力負(fù)荷心肌肥大中的表達(dá)變化及辛伐他汀的干預(yù)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

7 王絢卉;IPQDS對實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的影響及腺病毒介導(dǎo)的AM基因?qū)Υ笫笮募》蚀蟮念A(yù)防作用[D];吉林大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 蔣嘉輝;Wnt通路抑制劑Wnt-C59對病理性心肌肥大治療作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 常連慶;鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶依賴的心肌肥大的誘導(dǎo)機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2004年

3 徐慧;有氧運(yùn)動對心肌肥大過程中心肌細(xì)胞增殖的促進(jìn)及調(diào)控機(jī)制研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2014年

4 李巍;鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在介導(dǎo)尾加壓素Ⅱ致心肌肥大中的作用及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

5 代治國;新生大鼠心肌短暫外向鉀電流下降與心肌肥大的相關(guān)性研究[D];武漢大學(xué);2004年

6 黃金賢;AMPK/PPARα/SCAD信號途徑對心肌肥大的調(diào)控研究[D];廣東藥學(xué)院;2014年

7 劉薇;RNA結(jié)合蛋白QKI在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 萬帝;ARC在高血壓致心肌肥大過程中的作用及其調(diào)控機(jī)制[D];河北聯(lián)合大學(xué);2011年

9 孟帥;PKC/MAPK信號在運(yùn)動性心肌肥大中的作用研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2013年

10 段雅倩;miR-150在高糖致心肌肥大中的作用及機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

本文編號：1430415