本文關(guān)鍵詞：血漿miRNA-4787-5P和miRNA-4306對急性主動脈夾層的診斷價值

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【摘要】：研究背景及目的急性主動脈夾層(Acute Aortic Dissection,AAD)是一種死亡率很高的危重心血管急癥。流行病學(xué)調(diào)查顯示,AAD的發(fā)病率大約為每年60人/10萬人,且發(fā)病率正在逐年上升。主動脈夾層急性期內(nèi)主動脈破裂的風(fēng)險極高,40%的患者立即死亡,此后每小時有1%的患者死亡。目前,隨著多重螺旋計算機(jī)斷層掃描(Computed Tomography,CT)、經(jīng)胸及經(jīng)食管超聲心動圖、MRA(magnetic resonance angiography)等的應(yīng)用,雖然可以明確的診斷主動脈夾層,但這些檢查均不能在床邊進(jìn)行且需要等待和操作過程,部分主動脈夾層患者甚至在明確診斷前已經(jīng)死亡。由于累及血管節(jié)段的不同,臨床表現(xiàn)多變且不典型,病因也較復(fù)雜,臨床上較容易漏診及誤診。影像學(xué)檢查如主動脈全程CTA是診斷AD的重要手段,主動脈造影是診斷主動脈夾層的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但價格昂貴,操作復(fù)雜,在基層醫(yī)院或急診環(huán)境下有時難以及時完成,不利于臨床的早期診斷。因此臨床上迫切需要一種早期篩查且檢測方法簡單易行的指標(biāo)。微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一類長約18-25個核苷酸的非編碼小RNA的總稱,被認(rèn)為是基因表達(dá)負(fù)調(diào)控的重要機(jī)制之一。近年來,mi RNA被發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定存在于血漿/清中,被稱為循環(huán)mi RNA。多項研究表明,mi RNA廣泛參與心血管系統(tǒng)的功能調(diào)控,與很多心臟疾病相關(guān),其相關(guān)循環(huán)mi RNA也在這些心血管疾病中檢測出,并有可能作為診斷心血管疾病的潛在生物標(biāo)記物。已有一些研究探討了AAD患者主動脈組織及血漿標(biāo)本和正常對照組中mi RNA表達(dá)譜的差異,也有研究通過動物模型來研究AAD動脈組織中mi RNA表達(dá)譜的差異。但國內(nèi)外大部分關(guān)于mi RNAs在AAD中的研究都是基于主動脈夾層發(fā)病機(jī)制的探索。本研究的目的是探索mi RNA是否可以作為急性主動脈夾層臨床早期診斷的生物標(biāo)志物。研究方法本實驗分為兩組:急性主動脈夾層患者組(AD組)和正常志愿者對照組(C組)。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)并簽訂患者知情同意書,分別收集2015年1月~2015年12月入住鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院并確診為急性主動脈夾層的各型患者和年齡性別配比相同的正常志愿者(對照組)的外周血漿,并詳細(xì)記錄入組者的一般情況和基本資料。先從中分別選取3例急性主動脈夾層患者術(shù)前外周血漿和3例正常志愿者外周血漿樣本,提取分離總RNA并質(zhì)檢;采用Agilengt mi RNA芯片進(jìn)行mi RNA表達(dá)譜分析,初步篩選出在主動脈夾層患者和正常人血漿中差異表達(dá)的mi RNA分子,并選出2個表達(dá)差異顯著的mi RNAs,進(jìn)行熒光定量RT-PCR(Fluorescence quantitative Reverse Transcription-polymerase Chain Reacto,q RT-PCR)大樣本驗證,最后應(yīng)用受試者工作曲線(receiver operating characteristic,ROC)計算曲線下面積(area under the receiver operating characteristic curve,AUC)等來分析篩選得到的mi RNA對AAD早期診斷的敏感性及特異性。結(jié)果采用Agilent Human mi RNA array篩選出兩個表達(dá)差異顯著的has-mi RNA-4787-5P和has-mi RNA-4306。然后通過q RT-PCR大樣本定量驗證,結(jié)果顯示:急性主動脈夾層患者血漿中的has-mi RNA-4787-5P的相對表達(dá)量明顯高于正常對照組(0.799±0.888 VS 0.134±0.112,P=0.0000.010.05),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,且與基因芯片檢測結(jié)果一致;而has-mi RNA-4306在急性主動脈夾層患者血漿中的相對表達(dá)量比正常對照組血漿中高(0.019±0.049 VS0.006±0.009,P=0.0540.05),但差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義,與基因芯片檢測結(jié)果不一致。ROC曲線分析顯示has-mi RNA-4787-5P對AAD的檢測敏感度為77%,特異度為87%,曲線下面積AUC為0.883(95%CI,0.823-0.944),P=0.0000.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。has-mi RNA-4306對AAD的檢測敏感度為66%,特異度為53%,AUC為0.561(95%CI,0.456-0.667),P=0.2600.05,沒有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論1.has-mi RNA-4787-5P有可能成為急性主動脈夾層早期診斷的潛在生物標(biāo)志物。2.has-mi RNA-4306是否能作為急性主動脈夾層早期診斷的潛在生物標(biāo)志物還有待進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R543.1

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