本文關(guān)鍵詞：MDS患者外周血單個(gè)核細(xì)胞端粒異常及相關(guān)機(jī)制研究

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【摘要】：目的:通過檢測(cè)MDS患者外周血單個(gè)核細(xì)胞及T細(xì)胞中hTERT選擇性剪接變異體的表達(dá)并分析其與端粒酶活性,端粒長(zhǎng)度及hTERT表達(dá)的相關(guān)性,闡明MDS患者端粒異常的相關(guān)分子機(jī)制。方法:收集30例健康供者外周血與30例MDS患者外周血,通過密度梯度離心方法分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞,Ficoll法聯(lián)合Human T cell enrichment cocktail分離外周血T細(xì)胞,Real-time PCR方法檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞及T細(xì)胞的端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)選擇性剪接變異體的表達(dá)。Real-time PCR方法測(cè)量外周血單個(gè)核細(xì)胞及T細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度及hTERT的表達(dá)。端粒酶重復(fù)序列擴(kuò)增法(TRAP)-Elisa檢測(cè)MDS患者及健康供者外周血單個(gè)核細(xì)胞及T細(xì)胞端粒酶活性。用Spearman相關(guān)分析方法分析MDS患者及健康對(duì)照者外周血單個(gè)核細(xì)胞及T細(xì)胞hTERT選擇性剪接變異體與端粒酶活性,端粒長(zhǎng)度及hTERT表達(dá)之間的相關(guān)性。結(jié)果:檢測(cè)結(jié)果顯示MDS患者外周血單個(gè)核細(xì)胞hTERT選擇性剪接變異體α+β+及變異體α+β-的表達(dá)較健康對(duì)照者升高(n=30,p=0.016;n=30,p=0.002)。與健康對(duì)照者相比,MDS患者外周血單個(gè)核細(xì)胞端粒長(zhǎng)度明顯縮短(n=30,p=0.002);端粒酶活性及hTERT表達(dá)升高(n=30,p=0.022;n=30,p=0.007)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示,MDS患者外周血單個(gè)核細(xì)胞端粒酶活性只與hTERT表達(dá)量相關(guān);MDS患者外周血單個(gè)核細(xì)胞hTERT選擇性剪接變異體、hTERT表達(dá)、端粒長(zhǎng)度、端粒酶活性與患者臨床病歷資料無明顯相關(guān)性。MDS患者外周血T細(xì)胞hTERT選擇性剪接變異體表達(dá)較健康對(duì)照者升高,其中變異體α+β-的表達(dá)較對(duì)照者升高(n=20,p0.001),變異體α+β+的表達(dá)也較對(duì)照者升高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=20,p=0.09)。MDS患者外周血T細(xì)胞端粒酶活性及hTERT表達(dá)較健康對(duì)照者升高(n=20,p=0.002;n=20,p=0.001),端粒長(zhǎng)度較正常對(duì)照組縮短(n=20,p0.001)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示,MDS患者外周血T細(xì)胞端粒酶活性只與hTERT表達(dá)量相關(guān);與hTERT選擇性剪接變異體表達(dá)及端粒長(zhǎng)度無相關(guān)性。結(jié)論:MDS外周血單個(gè)核細(xì)胞及T細(xì)胞端粒長(zhǎng)度較健康對(duì)照者縮短,端粒酶活性及hTERT表達(dá)升高;MDS外周血單個(gè)核細(xì)胞及T細(xì)胞hTERT選擇性剪接變異體的表達(dá)水平與端粒酶活性及hTERT表達(dá)無相關(guān)性,其端粒酶活性與hTERT的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R551.3

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本文編號(hào)：1284889