本文關(guān)鍵詞：小鼠酒精性心肌病相關(guān)microRNA表達(dá)譜分析

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【摘要】：酒精性心肌病是由于長(zhǎng)期過(guò)量飲酒所導(dǎo)致的慢性心功能障礙,并逐步發(fā)展為擴(kuò)張型心肌病,目前發(fā)病率逐年增長(zhǎng),社會(huì)危害嚴(yán)重,而人們對(duì)參與酒精性心肌病發(fā)展的microRNA的作用機(jī)制和方式等還不清楚。因此,在本研究中,我們將通過(guò)基因芯片分析1microRNA在正常和酒精性心肌中的表達(dá)譜變化,結(jié)合生物信息學(xué)預(yù)測(cè),尋找和明確microRNA參與酒精性心肌病變的線(xiàn)索；利用microRNA分子生物學(xué)研究方法,初確認(rèn)microRNA對(duì)小鼠心肌的調(diào)控作用,為闡明microRNA在心臟發(fā)育、心肌肥厚、心律失常、心肌纖維化及心肌細(xì)胞凋亡和心力衰竭等心臟生理和病理生理過(guò)程中的功能作用提供新的理論依據(jù),為將來(lái)心血管疾病防治提供新的思路和治療策略。 研究目的 (1)通過(guò)飼喂酒精的方法建立小鼠酒精性心肌病模型； (2)利用microRNA芯片篩選小鼠酒精性心肌病病變相關(guān)microRNA,以期發(fā)現(xiàn)酒精性心肌病心肌病變的分子基礎(chǔ)； (3)應(yīng)用Real-Time PCR技術(shù)對(duì)差異表達(dá)的microRNA進(jìn)行分子生物學(xué)驗(yàn)證； 研究方法 50只雄性昆明種小鼠,重量15-20g,隨機(jī)分為對(duì)照組(n=20)和酒精性心肌病實(shí)驗(yàn)組(n=30)。所有動(dòng)物由昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。實(shí)驗(yàn)組小鼠經(jīng)每日飲用4%乙醇12周制作酒精性心肌病模型,對(duì)照組則每日飲用等量生理鹽水。通過(guò)上述方法建立小鼠酒精性心肌病模型,模型成功建立后取出小鼠心臟,做病理切片并送病檢,HE染色后光學(xué)顯微鏡觀察心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；在第12周確認(rèn)模型建立成功后取小鼠心臟組織,用Trizol法提取心肌組織總RNA,采用基因芯片技術(shù)檢測(cè)1miRNA的表達(dá),利用GenePix Pro6.0軟件分析、并挑選差異表達(dá)的miRNA,然后應(yīng)用miRNA熒光定量PCR試劑盒證實(shí)該種特異性表達(dá)的1miRNA確實(shí)在酒精性心肌病心肌組織中有差異性表達(dá)變化,并且對(duì)該差異性表達(dá)的1niRNA進(jìn)行相對(duì)定量分析。 研究結(jié)果 (1)與對(duì)照組相比,解剖發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組小鼠左心室、室間隔增厚顯著,實(shí)驗(yàn)組心臟未見(jiàn)明顯大于正常組。病理結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞增大、部分心肌細(xì)胞水腫并且細(xì)胞排列不整齊： (2) miRNA芯片結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),mmu-miR-X1, mmu-miR-X2, mmu-miR-X3在酒精性心肌病的實(shí)驗(yàn)組表達(dá)量明顯高于對(duì)照組,實(shí)時(shí)熒光定量PCR也證實(shí)mmu-miR-X1, mmu-miR-X2, mmu-miR-X3等在酒精性心肌病的實(shí)驗(yàn)組表達(dá)量明顯高于對(duì)照組,與芯片結(jié)果一致；而芯片結(jié)果與實(shí)時(shí)熒光定量PCR都顯示mmu-miR-X5, mmu-miR-X6, mmu-miR-X7, mmu-miR-X8, mmu-miR-X9, mmu-miR-X10, mmu-miR-X11, mmu-miR-X12在實(shí)驗(yàn)組心肌表達(dá)下降。 結(jié)論 (1)酒精性心肌病小鼠心肌組織與正常的心肌組織相比,miRNA存在差異性表達(dá)； (2)小鼠酒精性心肌病心肌組織病變相關(guān)miRNA有mmu-miR-X1, mmu-miR-X2, mmu-miR-X3, mmu-miR-X5, mmu-miR-X6, mmu-miR-X7, mmu-miR-X8, mmu-miR-X9, mmu-miR-X10, mmu-miR-X11, mmu-miR-X12。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R542.2

【共引文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 于宏穎;2型糖尿病大鼠心肌缺血后適應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2009年

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5 李夢(mèng)姣;藍(lán)萼甲素對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制[D];蘇州大學(xué);2013年

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7 李盛楠;左卡尼汀注射液對(duì)擴(kuò)張型心肌病的輔助治療作用及體內(nèi)卡尼汀群的代謝研究[D];青島大學(xué);2013年

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10 沈啟明;心復(fù)力顆粒對(duì)阿霉素致心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞凋亡及PPAR-α與內(nèi)皮素-1的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

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本文編號(hào)：1192342