本文關(guān)鍵詞：PTEN在心肌缺血預適應和后適應中的調(diào)控作用

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【摘要】：背景和目的第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源的基因(PTEN)是人體新發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因,它與細胞的生長、分化、凋亡、信號傳遞等密切相關(guān)。以往對PTEN的研究大多側(cè)重于腫瘤方面,近些年來有研究發(fā)現(xiàn)PTEN/Akt信號通路在心肌重構(gòu)、心肌肥厚、心肌缺血再灌注損傷等方面亦發(fā)揮著重要的作用,有研究發(fā)現(xiàn)應用特異性藥物抑制PTEN的活性可以縮小心肌梗死后的梗死面積,改善心功能。心肌缺血預適應和缺血后適應可以降低心肌缺血再灌注損傷,縮小心肌梗死面積,但其機制尚未完全闡明。心肌缺血預適應和后適應對心臟的保護作用是否與PTEN/Akt信號通路的調(diào)控有關(guān),目前尚缺乏研究。本實驗通過構(gòu)建心肌缺血再灌注、缺血預適應及缺血后適應動物模型,觀察PTEN及其下游信號分子的改變,研究PTEN/Akt信號通路在心肌缺血再灌注損傷中的作用,探索PTEN/Akt信號通路在缺血預適應和后適應中的心臟保護機制。方法選取體重在280-320g的雄性SD大鼠60只隨機分成4組,每組15只：①假手術(shù)組(Sham組)：左冠狀動脈前降支只穿線不結(jié)扎；②缺血再灌注組(IR組)：結(jié)扎左冠狀動脈前降支30min,再灌注180min；③缺血預適應組(IPre組)：結(jié)扎左冠狀動脈前降支5 min、灌注5 min,反復3次后,結(jié)扎30min再灌注180min；④缺血后適應組(IPost組)：結(jié)扎左冠狀動脈前降支30min后,灌注30s、結(jié)扎30s,反復3次,再灌注180min。全程記錄心電圖的變化。每組隨機選取6只,在造模結(jié)束時做Evans Blue、TTC染色,用于測量心肌缺血及梗死面積。其余9只于造模前后抽取靜脈血并于實驗結(jié)束后留取缺血心肌組織,用酶標法檢測血清肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)的活性,用HE染色法觀察心肌形態(tài)學變化,用Western blot法及免疫組織化學染色法檢測缺血心肌組織PTEN、p-Akt的蛋白表達水平,用實時熒光PCR法檢測PTEN mRNA的表達水平。最后利用SPSS軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結(jié)果1.心電圖變化：結(jié)扎左冠狀動脈前降支血管后,心電圖可見ST段向上抬高,再灌注后ST段逐漸回落。2.心肌缺血及梗死面積測定：Sham組無明顯心肌缺血及梗死,其余三組心肌缺血面積相似(P0.05)；IR組梗死面積最大,IPre組和IPost組的梗死面積較IR組明顯縮小(P0.05),但IPre組和IPost組無明顯差異。3.血清CK、LDH活性：缺血前四組水平相似,心肌缺血再灌注后IR組、IPre組及IPost組CK、LDH含量明顯較Sham組升高；但與IR組比較,IPre組及IPost組的升高量較少(P0.05),且IPre組及IPost組無差異。4.缺血心肌PTEN、p-Akt蛋白表達水平：Western blot法及免疫組化法檢測結(jié)果相似。與IR組比較,IPre組及IPost組的PTEN表達量降低,p-Akt的表達水平升高(P0.05)。免疫組化法發(fā)現(xiàn)PTEN、p-Akt主要定位在胞漿,部分胞核有著色。5. PTEN mRNA的表達水平：IPre組和IPost組的PTEN mRNA表達弱于IR組(P0.05)。結(jié)論PTEN/Akt信號通路在心肌缺血再灌注損傷中發(fā)揮著重要作用；心肌缺血預適應和缺血后適應通過調(diào)節(jié)PTEN/Akt信號通路的表達在缺血再灌注損傷中發(fā)揮保護心肌的作用。
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 唐瑩;劉金東;;PI3K-Akt信號通路與心肌保護[J];醫(yī)學綜述;2009年10期

3 陳偉偉;高潤霖;劉力生;朱曼璐;王文;王擁軍;吳兆蘇;胡盛壽;;中國心血管病報告2013概要[J];中國循環(huán)雜志;2014年07期

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本文編號：1190988