本文關(guān)鍵詞：Caveolin-1影響多種激動(dòng)劑誘發(fā)肺動(dòng)脈收縮的機(jī)制及在肺高壓發(fā)病中的意義

  更多相關(guān)文章： 肺高壓 慢性低氧 野百合堿 胞膜窖 窖蛋白-1 鈣池操縱性鈣內(nèi)流 甲基β環(huán)糊精

【摘要】：肺高壓(pulmonary hypertension,PH)發(fā)病過程中的病理變化多由肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary aterial smooth muscle,PASMCs)中Ca2+穩(wěn)態(tài)失衡所致。胞膜窖(Caveolae)廣泛分布在心血管系統(tǒng)中,含多種與細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度調(diào)節(jié)有關(guān)的蛋白質(zhì),其中,Cav-1(Caveolin-1)是其標(biāo)志性蛋白。研究表明,在多種細(xì)胞膜Caveolae區(qū)域,Cav-1能夠影響非選擇性陽(yáng)離子通道開放。本研究通過野百合堿(Monocrotaline,MCT)腹腔注射和慢性低氧(Chronic Hypoxia,CH)持續(xù)誘導(dǎo)構(gòu)建PH大鼠模型,比較Cav-1蛋白或m RNA表達(dá)變化,利用甲基β環(huán)糊精(Methyl-β-cyclodextrin,MβCD)破壞肺動(dòng)脈(PAs)Caveolae,Cav-1特異性增強(qiáng)肽和抑制肽(caveolin-1 scaffolding domain,CSD)處理正常PASMCs,分別從器官功能水平、細(xì)胞水平及m RNA和蛋白質(zhì)水平,探討Cav-1在PH發(fā)病中的作用及機(jī)制,為PH發(fā)病機(jī)制的研究,及其治療的突破尋找更多的實(shí)驗(yàn)依據(jù)支持。目的:觀察Caveolae和Cav-1在MCT和CH所致PH大鼠中的作用及機(jī)制,為PH發(fā)病機(jī)制的研究及靶向治療提供理論依據(jù)。方法:SD大鼠分別采用MCT一次性腹腔注射(50 mg/kg)和CH兩種方式誘導(dǎo)PH的發(fā)生,采用:①血流動(dòng)力學(xué)和透射電鏡檢測(cè)方法,測(cè)定大鼠右心室收縮壓(right ventricular systolic pressure,RVSP)、右心室重量指數(shù)(right ventricular mass index,RVMI)和PASMCs上Caveolae數(shù)量的變化;②RT-PCR和Western blot檢測(cè)方法,測(cè)定大鼠PAs標(biāo)本Cav-1蛋白或m RNA表達(dá)水平;③血管環(huán)張力檢測(cè)方法,測(cè)定MβCD通過破壞Caveolae,對(duì)KCl、內(nèi)皮素-1(endothelin-1,ET-1),及環(huán)匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)誘導(dǎo)大鼠PAs收縮效應(yīng)的影響;④Fluo-3熒光檢測(cè)[Ca2+]i方法,測(cè)定CSD增強(qiáng)肽和抑制肽對(duì)CPA誘導(dǎo)的正常大鼠PASMCs內(nèi)[Ca2+]i升高的影響。結(jié)果:與正常組相比,①PH模型大鼠的RVSP及對(duì)應(yīng)的RVMI均顯著增高,肺小動(dòng)脈管壁平滑肌肌層明顯增厚,管腔狹窄,提示模型制備成功,同時(shí)兩種PH模型大鼠PASMCs上Caveolae的數(shù)量也明顯增多;②PH模型大鼠PAs標(biāo)本Cav-1的蛋白和m RNA表達(dá)水平均明顯增高,提示PH模型大鼠PAs的Cav-1表達(dá)上調(diào);③MβCD通過耗竭PASMCs膜膽固醇(cholesterol,Chol)破壞Caveolae的完整性,對(duì)KCl誘導(dǎo)的大鼠PAs收縮效應(yīng)無影響,提示電壓依賴性Ca2+通道(voltage-dependent calcium channel,VDCC)與Caveolae及Cav-1關(guān)系并不密切;④MβCD破壞Caveolae的完整性,抑制ET-1誘導(dǎo)的PAs收縮效應(yīng),并且PH大鼠的ET-1收縮PAs效應(yīng)顯著增高,MβCD對(duì)ET-1收縮PAs效應(yīng)的抑制作用也顯著增大,提示非電壓依賴性Ca2+通道與Caveolae及Cav-1關(guān)系密切,以及PH大鼠PAs的高ET-1反應(yīng)性;⑤MβCD預(yù)處理,顯著抑制CPA誘導(dǎo)的PAs收縮效應(yīng),PH大鼠的CPA收縮PAs效應(yīng)顯著增高,MβCD對(duì)CPA收縮PAs效應(yīng)的抑制作用也顯著增大,提示鈣池操縱性Ca2+通道(store-operated calcium channel,SOCC)與Caveolae及Cav-1關(guān)系密切,以及PH大鼠PAs鈣池操縱性鈣內(nèi)流(sotre-operated calcium entry,SOCE)功能增強(qiáng);⑥正常大鼠,外源性Chol能夠逆轉(zhuǎn)MβCD對(duì)ET-1和CPA收縮PAs效應(yīng)的抑制作用,證實(shí)了MβCD通過耗竭Chol破壞Caveolae的完整性;⑦Cav-1特異性增強(qiáng)肽(或抑制肽)處理正常大鼠PASMCs,CPA誘導(dǎo)的[Ca2+]i升高幅度顯著增高(或降低),從細(xì)胞水平證實(shí)大鼠PASMCs中SOCE功能與Cav-1狀態(tài)密切相關(guān)。結(jié)論:PH模型大鼠PASMCs中,Caveolae數(shù)量及Cav-1蛋白或m RNA表達(dá)水平均明顯增高,Caveolae完整性與非電壓依賴性Ca2+通道功能密切相關(guān),Cav-1參與細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的調(diào)節(jié),表明在PH發(fā)病過程中Caveolae及Cav-1可能發(fā)揮了重要作用。因此,PH發(fā)病過程中適度調(diào)整PAs上Cav-1的表達(dá)有利于維持[Ca2+]i的動(dòng)態(tài)平衡,有效緩解PAs壓力的持續(xù)升高,延緩PH的發(fā)生發(fā)展。本研究為PH發(fā)病機(jī)制的研究及防治提供了新的科研思路。?
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R544.1

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉進(jìn)軍;劉麗;蔡海東;;肺血流灌注顯像在肺高壓診斷中的價(jià)值[J];臨床肺科雜志;2012年04期

2 高元明;劉雙;;肺高壓的診斷和治療策略[J];心肺血管病雜志;2012年06期

3 吳學(xué)仁;郊碩曾;;肺高壓病人的麻醉處理[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);1989年06期

4 李筠,周愛卿;先天性心臟病肺高壓肺血管功能與結(jié)構(gòu)的改變[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2001年03期

5 杜勛鐸,鄧淑珍,劉琮;先心病并重度肺高壓測(cè)定肺嵌壓的臨床意義(附37例報(bào)告)[J];武漢醫(yī)學(xué)雜志;1994年01期

6 楊文東，都興瑯，張廣福，張向華，姜貫華，王振祥，，李凡東，梁家立，黃建華;室缺并重度肺高壓術(shù)后早期并發(fā)癥的發(fā)生原因及處理的探討[J];河南醫(yī)藥信息;1995年04期

7 楊振文;;肺高壓患者的日常生活調(diào)養(yǎng)[J];開卷有益(求醫(yī)問藥);2011年11期

8 CQS;遺傳性出血性毛細(xì)管擴(kuò)張癥病人肺高壓的臨床和分子遺傳學(xué)特征[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);2001年19期

9 解衛(wèi)平;王輝;;炎癥與肺高壓[J];現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué);2014年01期

10 盧冰冰;;肺高壓診治進(jìn)展及其處理對(duì)策[J];中國(guó)民康醫(yī)學(xué);2006年21期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 張玉萍;張莉;馬春梅;;頸靜脈多普勒超聲檢查預(yù)測(cè)肺高壓的價(jià)值[A];第二十六屆航天醫(yī)學(xué)年會(huì)暨第九屆航天護(hù)理年會(huì)論文匯編[C];2010年

2 穆云萍;焦海霞;王瑞幸;林默君;;胞膜窖在不同激動(dòng)劑誘發(fā)肺高壓大鼠肺動(dòng)脈收縮的作用[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第十屆全國(guó)青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2013年

3 高杰;陳艷麗;劉琳琳;;嬰幼兒室間隔缺損合并肺高壓的術(shù)后護(hù)理[A];2013年河南省重癥醫(yī)學(xué)科護(hù)理管理新理念及新業(yè)務(wù)、新技術(shù)研討班論文集[C];2013年

4 孫凌;張智偉;;肺高壓中的研究進(jìn)展:骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體2(BMPR2)突變的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十七次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2012年

5 何建國(guó);;ACCF/AHA 2009肺高壓專家共識(shí)解讀[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議專題報(bào)告匯編[C];2009年

6 唐華平;韓偉;王琛;曹繼蘭;;過氧化物酶體增殖物γ在COPD肺高壓大鼠的血管重塑中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 本報(bào)記者　閆良生;肺高壓——先天性心臟病人應(yīng)警惕[N];河南日?qǐng)?bào);2006年

2 麥國(guó)榮;一氧化氮與新藥開發(fā)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

3 記者 胥金章 楊雷;仁者心術(shù)[N];新華每日電訊;2014年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 曾真;磷酸二酯酶V抑制劑對(duì)肺高壓大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮舒張功能及肺血管重塑作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

2 夏e

本文編號(hào)：1173559