發(fā)布時間：2017-11-12 00:25

  本文關(guān)鍵詞：Caveolin-1影響多種激動劑誘發(fā)肺動脈收縮的機制及在肺高壓發(fā)病中的意義

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【摘要】：肺高壓(pulmonary hypertension,PH)發(fā)病過程中的病理變化多由肺動脈平滑肌細胞(pulmonary aterial smooth muscle,PASMCs)中Ca2+穩(wěn)態(tài)失衡所致。胞膜窖(Caveolae)廣泛分布在心血管系統(tǒng)中,含多種與細胞內(nèi)Ca2+濃度調(diào)節(jié)有關(guān)的蛋白質(zhì),其中,Cav-1(Caveolin-1)是其標志性蛋白。研究表明,在多種細胞膜Caveolae區(qū)域,Cav-1能夠影響非選擇性陽離子通道開放。本研究通過野百合堿(Monocrotaline,MCT)腹腔注射和慢性低氧(Chronic Hypoxia,CH)持續(xù)誘導構(gòu)建PH大鼠模型,比較Cav-1蛋白或m RNA表達變化,利用甲基β環(huán)糊精(Methyl-β-cyclodextrin,MβCD)破壞肺動脈(PAs)Caveolae,Cav-1特異性增強肽和抑制肽(caveolin-1 scaffolding domain,CSD)處理正常PASMCs,分別從器官功能水平、細胞水平及m RNA和蛋白質(zhì)水平,探討Cav-1在PH發(fā)病中的作用及機制,為PH發(fā)病機制的研究,及其治療的突破尋找更多的實驗依據(jù)支持。目的:觀察Caveolae和Cav-1在MCT和CH所致PH大鼠中的作用及機制,為PH發(fā)病機制的研究及靶向治療提供理論依據(jù)。方法:SD大鼠分別采用MCT一次性腹腔注射(50 mg/kg)和CH兩種方式誘導PH的發(fā)生,采用:①血流動力學和透射電鏡檢測方法,測定大鼠右心室收縮壓(right ventricular systolic pressure,RVSP)、右心室重量指數(shù)(right ventricular mass index,RVMI)和PASMCs上Caveolae數(shù)量的變化;②RT-PCR和Western blot檢測方法,測定大鼠PAs標本Cav-1蛋白或m RNA表達水平;③血管環(huán)張力檢測方法,測定MβCD通過破壞Caveolae,對KCl、內(nèi)皮素-1(endothelin-1,ET-1),及環(huán)匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)誘導大鼠PAs收縮效應(yīng)的影響;④Fluo-3熒光檢測[Ca2+]i方法,測定CSD增強肽和抑制肽對CPA誘導的正常大鼠PASMCs內(nèi)[Ca2+]i升高的影響。結(jié)果:與正常組相比,①PH模型大鼠的RVSP及對應(yīng)的RVMI均顯著增高,肺小動脈管壁平滑肌肌層明顯增厚,管腔狹窄,提示模型制備成功,同時兩種PH模型大鼠PASMCs上Caveolae的數(shù)量也明顯增多;②PH模型大鼠PAs標本Cav-1的蛋白和m RNA表達水平均明顯增高,提示PH模型大鼠PAs的Cav-1表達上調(diào);③MβCD通過耗竭PASMCs膜膽固醇(cholesterol,Chol)破壞Caveolae的完整性,對KCl誘導的大鼠PAs收縮效應(yīng)無影響,提示電壓依賴性Ca2+通道(voltage-dependent calcium channel,VDCC)與Caveolae及Cav-1關(guān)系并不密切;④MβCD破壞Caveolae的完整性,抑制ET-1誘導的PAs收縮效應(yīng),并且PH大鼠的ET-1收縮PAs效應(yīng)顯著增高,MβCD對ET-1收縮PAs效應(yīng)的抑制作用也顯著增大,提示非電壓依賴性Ca2+通道與Caveolae及Cav-1關(guān)系密切,以及PH大鼠PAs的高ET-1反應(yīng)性;⑤MβCD預處理,顯著抑制CPA誘導的PAs收縮效應(yīng),PH大鼠的CPA收縮PAs效應(yīng)顯著增高,MβCD對CPA收縮PAs效應(yīng)的抑制作用也顯著增大,提示鈣池操縱性Ca2+通道(store-operated calcium channel,SOCC)與Caveolae及Cav-1關(guān)系密切,以及PH大鼠PAs鈣池操縱性鈣內(nèi)流(sotre-operated calcium entry,SOCE)功能增強;⑥正常大鼠,外源性Chol能夠逆轉(zhuǎn)MβCD對ET-1和CPA收縮PAs效應(yīng)的抑制作用,證實了MβCD通過耗竭Chol破壞Caveolae的完整性;⑦Cav-1特異性增強肽(或抑制肽)處理正常大鼠PASMCs,CPA誘導的[Ca2+]i升高幅度顯著增高(或降低),從細胞水平證實大鼠PASMCs中SOCE功能與Cav-1狀態(tài)密切相關(guān)。結(jié)論:PH模型大鼠PASMCs中,Caveolae數(shù)量及Cav-1蛋白或m RNA表達水平均明顯增高,Caveolae完整性與非電壓依賴性Ca2+通道功能密切相關(guān),Cav-1參與細胞內(nèi)Ca2+濃度的調(diào)節(jié),表明在PH發(fā)病過程中Caveolae及Cav-1可能發(fā)揮了重要作用。因此,PH發(fā)病過程中適度調(diào)整PAs上Cav-1的表達有利于維持[Ca2+]i的動態(tài)平衡,有效緩解PAs壓力的持續(xù)升高,延緩PH的發(fā)生發(fā)展。本研究為PH發(fā)病機制的研究及防治提供了新的科研思路。?
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R544.1

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1 劉進軍;劉麗;蔡海東;;肺血流灌注顯像在肺高壓診斷中的價值[J];臨床肺科雜志;2012年04期

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3 吳學仁;郊碩曾;;肺高壓病人的麻醉處理[J];國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊;1989年06期

4 李筠,周愛卿;先天性心臟病肺高壓肺血管功能與結(jié)構(gòu)的改變[J];中國當代兒科雜志;2001年03期

5 杜勛鐸,鄧淑珍,劉琮;先心病并重度肺高壓測定肺嵌壓的臨床意義(附37例報告)[J];武漢醫(yī)學雜志;1994年01期

6 楊文東，都興瑯，張廣福，張向華，姜貫華，王振祥，，李凡東，梁家立，黃建華;室缺并重度肺高壓術(shù)后早期并發(fā)癥的發(fā)生原因及處理的探討[J];河南醫(yī)藥信息;1995年04期

7 楊振文;;肺高壓患者的日常生活調(diào)養(yǎng)[J];開卷有益(求醫(yī)問藥);2011年11期

8 CQS;遺傳性出血性毛細管擴張癥病人肺高壓的臨床和分子遺傳學特征[J];中華醫(yī)學信息導報;2001年19期

9 解衛(wèi)平;王輝;;炎癥與肺高壓[J];現(xiàn)代實用醫(yī)學;2014年01期

10 盧冰冰;;肺高壓診治進展及其處理對策[J];中國民康醫(yī)學;2006年21期

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1 張玉萍;張莉;馬春梅;;頸靜脈多普勒超聲檢查預測肺高壓的價值[A];第二十六屆航天醫(yī)學年會暨第九屆航天護理年會論文匯編[C];2010年

2 穆云萍;焦海霞;王瑞幸;林默君;;胞膜窖在不同激動劑誘發(fā)肺高壓大鼠肺動脈收縮的作用[A];中國生理學會第十屆全國青年生理學工作者學術(shù)會議論文摘要[C];2013年

3 高杰;陳艷麗;劉琳琳;;嬰幼兒室間隔缺損合并肺高壓的術(shù)后護理[A];2013年河南省重癥醫(yī)學科護理管理新理念及新業(yè)務(wù)、新技術(shù)研討班論文集[C];2013年

4 孫凌;張智偉;;肺高壓中的研究進展:骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體2(BMPR2)突變的作用[A];中華醫(yī)學會第十七次全國兒科學術(shù)大會論文匯編（下冊）[C];2012年

5 何建國;;ACCF/AHA 2009肺高壓專家共識解讀[A];中華醫(yī)學會第十一次全國心血管病學術(shù)會議專題報告匯編[C];2009年

6 唐華平;韓偉;王琛;曹繼蘭;;過氧化物酶體增殖物γ在COPD肺高壓大鼠的血管重塑中的作用[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

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1 本報記者　閆良生;肺高壓——先天性心臟病人應(yīng)警惕[N];河南日報;2006年

2 麥國榮;一氧化氮與新藥開發(fā)[N];中國醫(yī)藥報;2002年

3 記者 胥金章 楊雷;仁者心術(shù)[N];新華每日電訊;2014年

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本文編號：1173559