本文關(guān)鍵詞：miR-21調(diào)控內(nèi)皮祖細(xì)胞衰老等生物學(xué)功能的研究

  更多相關(guān)文章： miR-21 內(nèi)皮祖細(xì)胞 衰老 增殖 Hmga2

【摘要】：目的:探討mi R-21在大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞衰老過程中的生物學(xué)作用;探討mi R-21是否通過調(diào)控靶基因Hmga2而實(shí)現(xiàn)其在EPCs中生物學(xué)作用。方法:1.密度梯度離心法獲取SD大鼠骨髓來源的單核細(xì)胞(BMMNCs),借助差速貼壁法和EPCs專用培養(yǎng)基定向誘導(dǎo)培養(yǎng)EPCs并培養(yǎng)14~28天,光學(xué)顯微鏡下觀察EPCs的細(xì)胞形態(tài)變化,CCK-8法分析EPCs的增殖情況、繪制生長(zhǎng)曲線,應(yīng)用流式細(xì)胞儀、乙酰低密度脂蛋白、與荊豆凝集素吞噬實(shí)驗(yàn)鑒定細(xì)胞表型,用Matrigel成管試驗(yàn)檢測(cè)成血管能力;2.mi R-21的模擬物和抑制物轉(zhuǎn)染P10代EPCs,檢測(cè)mi R-21對(duì)EPCs增殖情況、運(yùn)動(dòng)遷移能力、成血管能力的影響,用細(xì)胞衰老β半乳糖苷酶染色檢測(cè)mi R-21對(duì)EPCs衰老的影響;3.探查mi R-21的可能靶基因Hmga2,PCR技術(shù)檢測(cè)m RNA的表達(dá);Western Blot檢測(cè)靶蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:1.密度梯度離心法獲得SD大鼠MNCs經(jīng)體外培養(yǎng)后,表達(dá)相應(yīng)的內(nèi)皮細(xì)胞特異抗原,包括CD133、CD34以及VEGFR-2,能夠吞噬Dil-ac LDL與UEA-1結(jié)合,具有增殖和成血管能力,細(xì)胞純度較高;2.使用mi R-21模擬物和抑制物轉(zhuǎn)染EPCs48小時(shí)后,證實(shí)mi R-21的抑制物能夠促進(jìn)EPCs的增殖能力(p0.05)、遷移能力增強(qiáng)(p0.05)、成血管能力(p0.05),細(xì)胞衰老β半乳糖苷酶染色證實(shí)mi R-21的抑制物能夠降低EPCs衰老進(jìn)程;3.mi R-21表達(dá)上調(diào)后EPCs中Hmga2蛋白合成減少(p0.05)。結(jié)論:mi R-21表達(dá)下調(diào)能夠抑制EPCs的衰老,并促進(jìn)EPCs的增殖、遷移、成血管能力,Hmga2可能是mi R-21的靶基因。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R543.6

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李曉強(qiáng),段鵬飛,孟慶友,聶中林,余朝文,周為民,錢愛民,朱禮瑋;亞急性、慢性下肢深靜脈血栓43例的治療[J];中華普通外科雜志;2004年12期

，

本文編號(hào)：1150570