本文關(guān)鍵詞：三度房室傳導阻滯與鈉通道SCN5A基因相關(guān)的分子遺傳學機制研究

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【摘要】：研究背景:房室傳導阻滯(atrioventricular block,AVB)是指心臟電激動傳導過程中,發(fā)生在心房和心室之間傳導系統(tǒng)不應期延長,導致傳導異常的一組心律失常疾病。III度AVB又稱完全性AVB(complete atrioventricular block),是AVB中最嚴重的一型,指心房激動無法通過房室結(jié)下傳,引起完全的房室活動分離。隨著分子遺傳學和分子生物學研究的深入,AVB的病因與基因變異的關(guān)系受到廣泛關(guān)注和重視。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)一系列與AVB相關(guān)的基因,包括SCN5A基因,連接蛋白類,瞬時受體電位通道,轉(zhuǎn)錄因子(TBX5、NKX2.5)等。SCN5A基因編碼心臟鈉離子通道的α亞基(Nav1.5),參與心肌細胞動作電位的產(chǎn)生和傳導。近期研究表明無論是孤立性AVB還是合并結(jié)構(gòu)型心臟病的AVB均與SCN5A相關(guān)。目的:探討國人三度房室傳導阻滯患者與心臟鈉離子通道編碼基因SCN5A基因的相關(guān)性。方法:收集我院III度房室傳導阻滯患者臨床資料,并抽取外周血提取全基因組DNA。使用DNA直接測序法篩查SCN5A基因的外顯子及外顯子和內(nèi)含子的交界區(qū)。如發(fā)現(xiàn)基因變異,通過對200位同種族的健康人群相對照,以鑒別基因變異類型。使用定點突變法對SCN5A質(zhì)粒進行定點誘導突變,構(gòu)建SCN5A-A1428S、SCN5A-S593G突變質(zhì)粒,并通過DNA測序法驗證突變成功后轉(zhuǎn)染至人胚腎HEK293細胞。應用全細胞膜片鉗技術(shù)檢測野生型及突變型HEK293細胞的鈉電流相關(guān)參數(shù)進行分析,探討基因型及臨床表型的關(guān)系。結(jié)果:本研究共納入35例房室傳導阻滯患者,對上述患者進行SCN5A基因篩查,并與200例正常人群進行對照分析比較,在2位合并高血壓病的III度AVB患者中分別發(fā)現(xiàn)2個SCN5A基因錯義突變(A1428S、S593G),即SCN5A基因第4476位堿基由G變?yōu)門(c.4476GT),從而導致SCN5A基因第1428位氨基酸由丙氨酸變?yōu)榻z氨酸,第1971位堿基由A變?yōu)镚(c.1971AG),從而導致SCN5A基因第593位氨基酸由絲氨酸變?yōu)楦拾彼�。并發(fā)現(xiàn)1個同義變異I1603I(c.5003CT)。在其他患者中發(fā)現(xiàn)五個SCN5A基因多態(tài)性:A29A,H558R,H585H,R1193Q,D1818D。膜片鉗結(jié)果提示突變型(A1428S,S593G)鈉通道均表現(xiàn)為離子通道功能缺失。其中A1428S突變型可顯著減少INa,峰值電流約減少了60%,且到達峰電流的電壓明顯右移,穩(wěn)態(tài)激活曲線(SSA)較野生型(WT)明顯向右偏移(激活延遲),穩(wěn)態(tài)失活曲線(SSI)無明顯變化。S593G突變型可使INa峰值電流約減少了30%,到達峰電流的電壓無明顯變化,穩(wěn)態(tài)激活曲線(SSA)較WT明顯向右偏移(激活延遲),穩(wěn)態(tài)失活(SSI)曲線無明顯變化。結(jié)論:1、SCN5A是國人合并高血壓病的III度房室傳導阻滯的致病基因。2、發(fā)現(xiàn)基因突變A1428S,S593G和I1603I,其中S593G,I1603I為首次報道。3、A1428S、S593G突變體均表現(xiàn)為功能缺失型突變,導致鈉電流減少,激活速度減慢。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R541.7

【參考文獻】

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1 胡金柱;短QT綜合征的分子遺傳及細胞電生理機制研究[D];南昌大學;2012年

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本文編號：1143330