本文關鍵詞：OCT4和bFGF對人臍靜脈內皮細胞增殖、遷移的作用及其分子機制研究

  更多相關文章： 細胞增殖 遷移 人臍靜脈內皮細胞 OCT4 堿性成纖維細胞生長因子

【摘要】：目的本論文研究OCT4、b FGF對HUVECs增殖、遷移的作用及其相關分子機制,為闡明調控血管內皮細胞增殖、遷移的分子機制提供依據(jù),為地砷病血管損傷的修復提供新思路。方法分別添加DOX誘導細胞OCT4高表達(Tet-on調控的OCT4慢病毒表達載體轉導HUVECs,經DOX誘導)、添加b FGF進行培養(yǎng)。通過CCK8法檢測細胞增殖、劃痕實驗法檢測細胞遷移、基因芯片分析法在全基因組范圍內篩選不同方式誘導的差異基因,然后對增殖、遷移相關基因進行功能分類分析,通過實時定量PCR進一步檢測分析。結果1.添加DOX培養(yǎng)的HUVECs組,活細胞數(shù)明顯高于未添加DOX培養(yǎng)組;細胞損傷修復的相對遷移距離二者沒有顯著差別。2.在添加b FGF培養(yǎng)的HUVECs組中活細胞數(shù)與未添加b FGF培養(yǎng)組沒有顯著的差別;細胞損傷修復的相對遷移距離明顯高于未添加b FGF培養(yǎng)組。3.基因芯片分析各組差異表達基因,根據(jù)基因的生物過程分類,在OCT4作用后的HUVECs差異表達基因中篩選出與增殖相關的323個差異表達基因,其中上調的有172個,下調的有151個。4.基因芯片分析各組差異表達基因,根據(jù)基因的生物過程分類,在b FGF作用后HUVECs差異表達基因中篩選出與遷移相關的36個差異表達基因,其中上調的有19個,下調的有17個。5.RT-QPCR結果驗證,HUVECs中OCT4過表達之后,EGR1、JUN、和WISP1表達水平相對提高。6.RT-QPCR結果驗證,b FGF培養(yǎng)的HUVECs中,MMP1、MMP3、KRT13表達水平相對提高,CHD22表達水平相對降低。結論1.OCT4促進HUVECs的增殖,但不改變HUVECs的遷移能力。2.b FGF增加HUVECs的遷移能力,但不改變HUVECs的增殖能力。3.OCT4可能通過調節(jié)EGR1和WISP1、JUN表達從而參與促進HUVECs增殖。4.b FGF可能通過調節(jié)MMP1、MMP3和CDH22、KRT13表達從而參與促進HUVECs遷移。
【關鍵詞】：細胞增殖 遷移 人臍靜脈內皮細胞 OCT4 堿性成纖維細胞生長因子
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R54
【目錄】：

• 前言4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 英文縮略詞表10-13
• 第1章 緒論13-20
• 1.1 地砷病與血管損傷13-14
• 1.2 血管內皮細胞和新血管的形成14-15
• 1.3 內皮祖細胞EPC特性與生物學功能15-16
• 1.4 轉錄因子OCT416-17
• 1.5 堿性成纖維生長因子bFGF17-18
• 1.6 Tet-on系統(tǒng)18-20
• 第2章 材料與方法20-29
• 2.1 材料20-22
• 2.1.1 主要儀器和設備20-21
• 2.1.2 主要試劑21
• 2.1.3 主要試劑的配制21-22
• 2.2 研究方法22-29
• 2.2.1 細胞培養(yǎng)22-23
• 2.2.2 CCK8法檢測細胞增殖23-24
• 2.2.3 劃痕法檢測細胞遷移24
• 2.2.4 RNA提取以及實時定量PCR分析24-27
• 2.2.5 基因芯片分析27-28
• 2.2.6 統(tǒng)計學分析28-29
• 第3章 研究結果29-45
• 3.1 DOX誘導OCT4表達29-30
• 3.2 OCT4對HUVECS增殖和遷移能力的作用30-33
• 3.2.1 OCT4 對 HUVECs 增殖能力的作用30-31
• 3.2.2 OCT4對HUVECs遷移能力的作用31-33
• 3.3 bFGF對HUVECS增殖和遷移能力的作用33-35
• 3.3.1 bFGF對HUVECs增殖能力的作用33
• 3.3.2 bFGF促進HUVECs遷移能力33-35
• 3.4 基因芯片檢測HUVECS不同方式處理后的差異表達基因35-42
• 3.4.1 OCT4改變HUVECs表達譜35-39
• 3.4.2 bFGF改變HUVECs表達譜39-42
• 3.5 RT-QPCR檢測增殖和遷移相關基因的差異表達42-45
• 3.5.1 RT-QPCR檢測OCT4促HUVECs增殖相關基因的差異表達42-43
• 3.5.2 RT-QPCR檢測bFGF促HUVECs遷移相關基因的差異表達43-45
• 第4章 討論45-49
• 4.1 序言45
• 4.2 OCT4調節(jié)HUVECS的增殖和遷移能力45-47
• 4.3 bFGF調節(jié)HUVECS的增殖和遷移能力47-49
• 第5章 結論49-50
• 參考文獻50-57
• 作者在學期間取得的科研成果57-58
• 致謝58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡文龍;吳平平;殷嫦嫦;施劍明;殷明;;LIF和bFGF對臍帶間充質干細胞體外自我維持和更新的影響[J];中國實驗血液學雜志;2016年01期

2 周建良;鄒明暉;陳義初;周誠;史嘉瑋;董念國;;人臍帶血內皮祖細胞與血管內皮生長因子和堿性成纖維細胞生長因子共培養(yǎng)及其增殖和遷移能力[J];中國組織工程研究與臨床康復;2011年06期

3 王桂霞;劉義;;血管內皮細胞損傷機制及其藥物保護的研究進展[J];遼寧醫(yī)學院學報;2008年05期

4 孫貴范;;飲水型砷中毒發(fā)病機制研究進展[J];醫(yī)學研究雜志;2007年08期

5 Chin-Hsiao Tseng;Choon-Khim Chong;Ching-Ping Tseng;Jose A.Centeno;王勝;;臺灣烏腳病:它與飲用水中無機砷接觸的關系[J];AMBIO-人類環(huán)境雜志;2007年01期

6 譚震,宮蘋,趙青;堿性成纖維細胞生長因子對成骨細胞和牙周膜成纖維細胞遷移、增殖的影響[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2005年03期

7 梁光波,張國平,金惠銘,錢睿哲;粘著斑激酶在bFGF引起細胞遷移中的動態(tài)變化及意義[J];生理學報;2004年04期

8 金銀龍,梁超軻,何公理,曹靜祥,馬鳳,王漢章,應波,吉榮娣,中國地方性砷中毒分布調查協(xié)作組;中國地方性砷中毒分布調查(總報告)[J];衛(wèi)生研究;2003年06期

9 羅鵬,張愛華,洪峰,楊光紅,李光武,譚其菊;燃煤污染型砷中毒患者體內氧化與抗氧化系統(tǒng)損傷的觀察[J];中國地方病學雜志;2000年01期

10 郝陽,侯培森;我國當前地方性砷中毒防治概況[J];中國地方病防治雜志;1994年03期

，

本文編號：1067368