本文關(guān)鍵詞：OCT4和bFGF對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移的作用及其分子機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 細(xì)胞增殖 遷移 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 OCT4 堿性成纖維細(xì)胞生長因子

【摘要】：目的本論文研究OCT4、b FGF對HUVECs增殖、遷移的作用及其相關(guān)分子機(jī)制,為闡明調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移的分子機(jī)制提供依據(jù),為地砷病血管損傷的修復(fù)提供新思路。方法分別添加DOX誘導(dǎo)細(xì)胞OCT4高表達(dá)(Tet-on調(diào)控的OCT4慢病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)導(dǎo)HUVECs,經(jīng)DOX誘導(dǎo))、添加b FGF進(jìn)行培養(yǎng)。通過CCK8法檢測細(xì)胞增殖、劃痕實(shí)驗(yàn)法檢測細(xì)胞遷移、基因芯片分析法在全基因組范圍內(nèi)篩選不同方式誘導(dǎo)的差異基因,然后對增殖、遷移相關(guān)基因進(jìn)行功能分類分析,通過實(shí)時定量PCR進(jìn)一步檢測分析。結(jié)果1.添加DOX培養(yǎng)的HUVECs組,活細(xì)胞數(shù)明顯高于未添加DOX培養(yǎng)組;細(xì)胞損傷修復(fù)的相對遷移距離二者沒有顯著差別。2.在添加b FGF培養(yǎng)的HUVECs組中活細(xì)胞數(shù)與未添加b FGF培養(yǎng)組沒有顯著的差別;細(xì)胞損傷修復(fù)的相對遷移距離明顯高于未添加b FGF培養(yǎng)組。3.基因芯片分析各組差異表達(dá)基因,根據(jù)基因的生物過程分類,在OCT4作用后的HUVECs差異表達(dá)基因中篩選出與增殖相關(guān)的323個差異表達(dá)基因,其中上調(diào)的有172個,下調(diào)的有151個。4.基因芯片分析各組差異表達(dá)基因,根據(jù)基因的生物過程分類,在b FGF作用后HUVECs差異表達(dá)基因中篩選出與遷移相關(guān)的36個差異表達(dá)基因,其中上調(diào)的有19個,下調(diào)的有17個。5.RT-QPCR結(jié)果驗(yàn)證,HUVECs中OCT4過表達(dá)之后,EGR1、JUN、和WISP1表達(dá)水平相對提高。6.RT-QPCR結(jié)果驗(yàn)證,b FGF培養(yǎng)的HUVECs中,MMP1、MMP3、KRT13表達(dá)水平相對提高,CHD22表達(dá)水平相對降低。結(jié)論1.OCT4促進(jìn)HUVECs的增殖,但不改變HUVECs的遷移能力。2.b FGF增加HUVECs的遷移能力,但不改變HUVECs的增殖能力。3.OCT4可能通過調(diào)節(jié)EGR1和WISP1、JUN表達(dá)從而參與促進(jìn)HUVECs增殖。4.b FGF可能通過調(diào)節(jié)MMP1、MMP3和CDH22、KRT13表達(dá)從而參與促進(jìn)HUVECs遷移。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞增殖 遷移 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 OCT4 堿性成纖維細(xì)胞生長因子
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R54
【目錄】：

• 前言4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 英文縮略詞表10-13
• 第1章 緒論13-20
• 1.1 地砷病與血管損傷13-14
• 1.2 血管內(nèi)皮細(xì)胞和新血管的形成14-15
• 1.3 內(nèi)皮祖細(xì)胞EPC特性與生物學(xué)功能15-16
• 1.4 轉(zhuǎn)錄因子OCT416-17
• 1.5 堿性成纖維生長因子bFGF17-18
• 1.6 Tet-on系統(tǒng)18-20
• 第2章 材料與方法20-29
• 2.1 材料20-22
• 2.1.1 主要儀器和設(shè)備20-21
• 2.1.2 主要試劑21
• 2.1.3 主要試劑的配制21-22
• 2.2 研究方法22-29
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)22-23
• 2.2.2 CCK8法檢測細(xì)胞增殖23-24
• 2.2.3 劃痕法檢測細(xì)胞遷移24
• 2.2.4 RNA提取以及實(shí)時定量PCR分析24-27
• 2.2.5 基因芯片分析27-28
• 2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28-29
• 第3章 研究結(jié)果29-45
• 3.1 DOX誘導(dǎo)OCT4表達(dá)29-30
• 3.2 OCT4對HUVECS增殖和遷移能力的作用30-33
• 3.2.1 OCT4 對 HUVECs 增殖能力的作用30-31
• 3.2.2 OCT4對HUVECs遷移能力的作用31-33
• 3.3 bFGF對HUVECS增殖和遷移能力的作用33-35
• 3.3.1 bFGF對HUVECs增殖能力的作用33
• 3.3.2 bFGF促進(jìn)HUVECs遷移能力33-35
• 3.4 基因芯片檢測HUVECS不同方式處理后的差異表達(dá)基因35-42
• 3.4.1 OCT4改變HUVECs表達(dá)譜35-39
• 3.4.2 bFGF改變HUVECs表達(dá)譜39-42
• 3.5 RT-QPCR檢測增殖和遷移相關(guān)基因的差異表達(dá)42-45
• 3.5.1 RT-QPCR檢測OCT4促HUVECs增殖相關(guān)基因的差異表達(dá)42-43
• 3.5.2 RT-QPCR檢測bFGF促HUVECs遷移相關(guān)基因的差異表達(dá)43-45
• 第4章 討論45-49
• 4.1 序言45
• 4.2 OCT4調(diào)節(jié)HUVECS的增殖和遷移能力45-47
• 4.3 bFGF調(diào)節(jié)HUVECS的增殖和遷移能力47-49
• 第5章 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-57
• 作者在學(xué)期間取得的科研成果57-58
• 致謝58

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡文龍;吳平平;殷嫦嫦;施劍明;殷明;;LIF和bFGF對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外自我維持和更新的影響[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2016年01期

2 周建良;鄒明暉;陳義初;周誠;史嘉瑋;董念國;;人臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子和堿性成纖維細(xì)胞生長因子共培養(yǎng)及其增殖和遷移能力[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年06期

3 王桂霞;劉義;;血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷機(jī)制及其藥物保護(hù)的研究進(jìn)展[J];遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年05期

4 孫貴范;;飲水型砷中毒發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2007年08期

5 Chin-Hsiao Tseng;Choon-Khim Chong;Ching-Ping Tseng;Jose A.Centeno;王勝;;臺灣烏腳病:它與飲用水中無機(jī)砷接觸的關(guān)系[J];AMBIO-人類環(huán)境雜志;2007年01期

6 譚震,宮蘋,趙青;堿性成纖維細(xì)胞生長因子對成骨細(xì)胞和牙周膜成纖維細(xì)胞遷移、增殖的影響[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2005年03期

7 梁光波,張國平,金惠銘,錢睿哲;粘著斑激酶在bFGF引起細(xì)胞遷移中的動態(tài)變化及意義[J];生理學(xué)報(bào);2004年04期

8 金銀龍,梁超軻,何公理,曹靜祥,馬鳳,王漢章,應(yīng)波,吉榮娣,中國地方性砷中毒分布調(diào)查協(xié)作組;中國地方性砷中毒分布調(diào)查(總報(bào)告)[J];衛(wèi)生研究;2003年06期

9 羅鵬,張愛華,洪峰,楊光紅,李光武,譚其菊;燃煤污染型砷中毒患者體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)損傷的觀察[J];中國地方病學(xué)雜志;2000年01期

10 郝陽,侯培森;我國當(dāng)前地方性砷中毒防治概況[J];中國地方病防治雜志;1994年03期

，

本文編號：1067368