本文關(guān)鍵詞：尼古丁在腹主動(dòng)脈瘤形成中的作用及分子機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 主動(dòng)脈瘤 尼古丁 基質(zhì)金屬蛋白酶 血管平滑肌細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 趨化因子

【摘要】：背景:吸煙是主動(dòng)脈瘤形成和進(jìn)展的重要危險(xiǎn)因素,尼古丁是香煙的主要組成成分。在我們前期研究成果中,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分,尼古丁聯(lián)合血管緊張素II誘導(dǎo)了10-12個(gè)月齡的雄性C57BL/6J小鼠主動(dòng)脈瘤的形成,并檢測(cè)到主動(dòng)脈瘤組織中p-JNK、CD68+、MMP-2和MMP-9高表達(dá);體外實(shí)驗(yàn)部分,尼古丁誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞(RAW264.7)在m RNA水平VCAM-1、MMP-2和MMP-9呈劑量依賴性表達(dá),并可能通過JNK信號(hào)通路發(fā)揮調(diào)控作用。目的:在前期研究成果基礎(chǔ)上,為了進(jìn)一步研究尼古丁對(duì)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)和活性的影響及機(jī)制;以及尼古丁對(duì)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞趨化因子表達(dá)的調(diào)控作用,對(duì)巨噬細(xì)胞趨化性的影響,再結(jié)合趨化因子在動(dòng)脈瘤組織中的定位表達(dá),從而闡明尼古丁誘導(dǎo)主動(dòng)脈瘤發(fā)生及早期進(jìn)展的可能分子機(jī)制。方法:第一部分,不同濃度尼古丁(0,0.5,5,50,500ng/ml)處理小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(MOVAS)和巨噬細(xì)胞(RAW 264.7),觀察對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表達(dá)和活性的影響;JNK抑制劑(SP600125)和α7-n ACh Rs受體激動(dòng)劑(PNU-282987)處理兩種細(xì)胞,觀察對(duì)尼古丁誘導(dǎo)的MMP-2和MMP-9表達(dá)和蛋白活性的影響。第二部分,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分,免疫組化染色法測(cè)定主動(dòng)脈瘤組織中趨化因子MCP-1和RANTES的表達(dá)和定位;細(xì)胞實(shí)驗(yàn)部分,尼古丁處理小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,real time PCR法和ELISA法檢測(cè)MCP-1和RANTES表達(dá)的影響,進(jìn)一步transwell法觀察尼古丁通過對(duì)MOVAS細(xì)胞的調(diào)控對(duì)巨噬細(xì)胞趨化活性的影響;JNK抑制劑SP600125和α7-n ACh Rs受體激動(dòng)劑PNU-282987處理MOVAS細(xì)胞,real time PCR法和ELISA法檢測(cè)MCP-1和RANTES表達(dá)的影響,transwell法觀察尼古丁通過介導(dǎo)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞趨化活性的影響。結(jié)果:在主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,尼古丁以濃度依賴性方式誘導(dǎo)MMP-2和MMP-9的表達(dá)和活性,以及趨化因子MCP-1和RANTES的表達(dá),0.5ng/ml和5ng/ml時(shí)明顯增強(qiáng),500ng/ml時(shí)明顯抑制。而SP600125和PNU282987明顯抑制或消除了0.5ng/ml尼古丁產(chǎn)生的上述作用。尼古丁誘導(dǎo)的腹主動(dòng)脈瘤組織中MCP-1和RANTES顯著高表達(dá)于中膜和外膜,尼古丁可以通過介導(dǎo)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞MCP-1和RANTES的表達(dá)調(diào)控巨噬細(xì)胞的趨化活性,JNK抑制劑可以抑制經(jīng)尼古丁誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞趨化活性。結(jié)論:尼古丁以濃度依賴性方式誘導(dǎo)MMP-2和MMP-9的表達(dá)和活性,JNK信號(hào)軸參與調(diào)控尼古丁誘導(dǎo)的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞MMP-2和MMP-9的表達(dá)和活性。尼古丁可以通過介導(dǎo)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞趨化因子MCP-1和RANTES的表達(dá),調(diào)控巨噬細(xì)胞的趨化活性,促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生或進(jìn)展,可能在主動(dòng)脈形成過程發(fā)揮重要的始動(dòng)作用。
【關(guān)鍵詞】：主動(dòng)脈瘤 尼古丁 基質(zhì)金屬蛋白酶 血管平滑肌細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 趨化因子
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R543.16
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 符號(hào)和單位說明11-13
• 緒論13-21
• 第一部分 尼古丁對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞中MMP-2、MMP-9 的調(diào)控作用及分子機(jī)制21-38
• 1. 材料與方法23-31
• 1.1. 試劑與儀器23-25
• 1.2. 細(xì)胞培養(yǎng)25-26
• 1.3. Western blot分析26-28
• 1.4. 明膠酶譜（zymography）28-31
• 1.5. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析31
• 2. 結(jié)果31-35
• 2.1. 尼古丁呈劑量依賴性誘導(dǎo)小鼠血管平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞MMP-2、MMP-9 蛋白表達(dá)和活性31-33
• 2.2 尼古丁經(jīng)JNK信號(hào)通路調(diào)控MOVAS細(xì)胞和RAW264.7 細(xì)胞MMP-2 和MMP-9蛋白的表達(dá)和活性33-35
• 3. 討論35-37
• 4. 結(jié)論37-38
• 第二部分 尼古丁誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞趨化活性的在主動(dòng)脈瘤形成中的作用及機(jī)制研究38-59
• 1. 材料和方法39-51
• 1.1. 試劑和儀器39-42
• 1.2. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)42-43
• 1.3. 細(xì)胞培養(yǎng)43
• 1.4. 組織學(xué)分析43-45
• 1.5. RNA抽提和實(shí)時(shí)定量PCR45-49
• 1.6. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-linked immunosorbent assay , ELISA）49-50
• 1.7. Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)50-51
• 1.8. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析51
• 2. 結(jié)果51-55
• 2.1. 尼古丁誘導(dǎo)的主動(dòng)脈瘤組織中MCP-1、RANTES高表達(dá)51-52
• 2.2. 尼古丁對(duì)小鼠血管平滑肌細(xì)胞MCP-1 和RANTES表達(dá)的調(diào)節(jié)呈劑量依賴性52-53
• 2.3. 尼古丁經(jīng)JNK信號(hào)通路調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞MCP-1 和RANES的表達(dá)53-54
• 2.4. 尼古丁介導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞經(jīng)JNK通路調(diào)控巨噬細(xì)胞趨化活性54-55
• 3. 討論55-58
• 4. 結(jié)論58-59
• 全文總結(jié)59-61
• 1. 尼古丁呈劑量依賴性誘導(dǎo)小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞MMP-2 和MMP-9蛋白表達(dá)和活性59
• 2. JNK信號(hào)軸調(diào)控尼古丁誘導(dǎo)的小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞MMP-2 和MMP-9 的蛋白表達(dá)和活性59
• 3. MCP-1 和RANTES參與主動(dòng)脈瘤形成59-60
• 4. 尼古丁以濃度依賴性誘導(dǎo)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞MCP-1 和RANTES表達(dá)，同時(shí)調(diào)控巨噬細(xì)胞趨化活性60
• 5. JNK信號(hào)通路參與尼古丁誘導(dǎo)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞MCP-1 和RANTES表達(dá)，同時(shí)調(diào)控巨噬細(xì)胞趨化活性60-61
• 參考文獻(xiàn)61-66
• 綜述 Micro RNA 在腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生中的可能調(diào)控機(jī)制66-73
• 參考文獻(xiàn)70-73
• 致謝73-74
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文和科研成果目錄74-75
• 附：畢業(yè)答辯會(huì)現(xiàn)場(chǎng)照片75

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2 張強(qiáng);炎性腹主動(dòng)脈瘤的診斷及外科治療[J];中國(guó)實(shí)用外科雜志;2002年03期

3 田成武,朱華文,曲明,姜田軍,張衛(wèi)國(guó),杜英東;腹主動(dòng)脈瘤13例臨床分析[J];臨床軍醫(yī)雜志;2002年01期

4 田成武,朱華文,曲明,姜田軍,張衛(wèi)國(guó),杜英東;腹主動(dòng)脈瘤破裂大出血救治成功1例[J];實(shí)用醫(yī)藥雜志;2002年10期

5 肖康雅;巨大腹主動(dòng)脈瘤破裂1例[J];中華超聲影像學(xué)雜志;2002年08期

6 潘要干;腹主動(dòng)脈瘤腔內(nèi)修補(bǔ)后的監(jiān)控[J];中國(guó)介入心臟病學(xué)雜志;2002年01期

7 連福珍;腹主動(dòng)脈瘤10例診治體會(huì)[J];廣東醫(yī)學(xué);2003年02期

8 劉威,張克政;腹主動(dòng)脈瘤的診斷與外科治療[J];實(shí)用診斷與治療雜志;2003年05期

9 楊培紅,白峰;腹主動(dòng)脈瘤破裂1例[J];罕少疾病雜志;2003年06期

10 徐斌,周穎奇,何天霖,梅舉,許華,錢寶華,曹貴松,景在平;多學(xué)科聯(lián)合治療破裂性腹主動(dòng)脈瘤[J];中華急診醫(yī)學(xué)雜志;2003年08期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 潘松齡;;腹主動(dòng)脈瘤若干問題探討[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)周圍血管疾病專業(yè)委員會(huì)第一次學(xué)術(shù)年會(huì)暨省級(jí)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2005年

2 秋陽;李治安;孫琳;孟冷;;超聲診斷腹主動(dòng)脈瘤破裂的臨床應(yīng)用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 賴梅芳;范文丹;;彩超對(duì)腹主動(dòng)脈瘤的診斷價(jià)值[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第八屆全國(guó)腹部超聲學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

4 張生奕;;腹主動(dòng)脈瘤破裂1例報(bào)告[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)第十三次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)大會(huì)論文集[C];2010年

5 楊顯紅;;腹主動(dòng)脈瘤病人的健康教育[A];全國(guó)神經(jīng)內(nèi)外科�？谱o(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2004年

6 ;腹主動(dòng)脈瘤的診斷與急救處理[A];第十一次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)成立二十周年慶典論文匯編[C];2006年

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8 馬旭;呂忠;程云霄;;腎下腹主動(dòng)脈瘤外科治療[A];2008年浙江省血管外科年會(huì)論文匯編[C];2008年

9 陳花;;腹主動(dòng)脈瘤的超聲研究進(jìn)展[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)腹部超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

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1 吳美華;對(duì)腹主動(dòng)脈瘤應(yīng)積極進(jìn)行藥物治療[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

2 北京協(xié)和醫(yī)院血管外科中心 劉昌偉邋陳躍鑫;腹主動(dòng)脈瘤 難辨的兇手[N];健康報(bào);2008年

3 程懷孟;直徑小于5厘米腹主動(dòng)脈瘤可保守治療[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2009年

4 記者 朱國(guó)旺;腹主動(dòng)脈瘤一旦發(fā)現(xiàn)應(yīng)立即治療[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

5 程智;兇險(xiǎn)的腹主動(dòng)脈瘤[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2004年

6 本報(bào)記者 張磊;80%腹主動(dòng)脈瘤患者為男性[N];健康報(bào);2013年

7 陳祖亮邋記者 胡德榮;巨大腹主動(dòng)脈瘤破裂患者獲救[N];健康報(bào);2007年

8 上海長(zhǎng)海醫(yī)院血管外科 張雷邋景在平;腹主動(dòng)脈瘤需手術(shù)[N];健康報(bào);2007年

9 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院血管外科主任醫(yī)師 黃新天;人體“定時(shí)炸彈”——腹主動(dòng)脈瘤[N];上�？萍紙�(bào);2008年

10 健康時(shí)報(bào)記者 趙晴晴;血管超聲查腹主動(dòng)脈瘤[N];健康時(shí)報(bào);2010年

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1 左尚維;細(xì)胞外基質(zhì)降解通路相關(guān)基因多態(tài)性和血清MMP-2蛋白水平與腹主動(dòng)脈瘤的關(guān)聯(lián)[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

2 魏戰(zhàn)杰;地高辛拮抗RORγt活性減緩實(shí)驗(yàn)性腹主動(dòng)脈瘤進(jìn)展的研究[D];華中科技大學(xué);2015年

3 劉琮琳;哮喘在人和小鼠腹主動(dòng)脈瘤發(fā)病中的作用及機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2016年

4 聶皓;趨化因子受體CXCR2促進(jìn)腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生的作用機(jī)制研究及血管生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子在腹主動(dòng)脈瘤血漿中的變化[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

5 辛群;超聲技術(shù)在腹主動(dòng)脈瘤瘤壁運(yùn)動(dòng)和組織特性研究中的應(yīng)用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

6 符洋;貝納普利抑制家兔腎下腹主動(dòng)脈瘤形成的研究[D];中南大學(xué);2009年

7 馮翔;細(xì)胞外基質(zhì)代謝在腹主動(dòng)脈瘤發(fā)病中的作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 熊江;壁應(yīng)力分布個(gè)體化預(yù)測(cè)腹主動(dòng)脈瘤破裂的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

9 吳曉飛;雌激素在腹主動(dòng)脈瘤形成中的作用[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

10 陳泉;彩色室壁運(yùn)動(dòng)和背向散射積分技術(shù)在腹主動(dòng)脈瘤破裂風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)中應(yīng)用的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

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1 王建國(guó);影響腹主動(dòng)脈瘤延展及預(yù)后相關(guān)因素的臨床研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2012年

2 吳s，

本文編號(hào)：1058613