本文關鍵詞：大鼠動脈粥樣硬化斑塊內CD105的表達及瑞舒伐他汀干預后對斑塊穩(wěn)定性的影響

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【摘要】：目的:本研究采用SD(Sprague dawley)雄性大鼠建立動脈硬化樣模型,并予瑞舒伐他藥物干預治療,通過HE染色、免疫組化的蛋白定量、熒光定量PCR-m RNA檢測等方法,觀察動脈粥樣硬化斑塊內CD105表達變化,初步研究CD105對動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的作用,并探討瑞舒伐他汀干預后對斑塊穩(wěn)定性的影響。方法:1.建立動物模型:選擇36只周齡為5-7周,體重為180±20mg的健康清潔級的SD雄性大鼠,普通飼料適應性喂養(yǎng)7天后,將大鼠采用隨機抽簽法分為兩組,分別為:對照組(N=12)和實驗組(N=24),實驗組予肌注維生素D3+尼古丁灌胃基礎上予高脂飲食,第4周后實驗組隨機抽簽法分為模型組和藥物干預組。2.藥物干預組是使用瑞舒伐他汀鈣片灌胃給藥,每只大鼠按5mg/kg劑量計算,稀釋于1ml生理鹽水灌胃,每天一次,對照組與模型組同時予同等劑量的生理鹽水灌胃。3.第8周末處死所有實驗的大鼠,取出大鼠的胸主動脈血管作HE染色,光鏡下觀察大鼠胸主動脈血管病理形態(tài)學特點。應用CD105抗體對實驗動物血管進行免疫組織化學染色,以明確斑塊局部CD105蛋白表達情況,應用熒光定量PCR檢測動脈粥樣硬化斑塊內CD105-m RNA表達水平。結果:1.SD大鼠總體生長健康良好,所有36只大鼠全部完成實驗。所得36只大鼠數據參與分析,對照組12只,模型組12只,藥物干預組12只。2.病理形態(tài)觀察取大鼠胸主動脈作HE染色的結果顯示:大鼠的胸主動脈管壁在對照組表現為管壁各層結構正常,內膜光滑,內皮細胞排列整齊并完整,內彈力層清晰完整,中膜可見平滑肌細胞排列整齊、形態(tài)規(guī)則及彈力纖維正常,無明顯的斑塊形成;模型組大鼠胸主動脈內膜可見明顯增厚,內膜下可見大量的平滑肌細胞增生,脂質斑塊彌漫,可見大量的泡沫細胞聚集,并可見典型的不穩(wěn)定斑塊,主要表現為薄纖維帽,較大脂質核心,大量炎癥細胞浸潤。藥物干預組大鼠胸主動脈可見典型的穩(wěn)定斑塊。斑塊表現為較厚的纖維帽,纖維帽完整,脂質核心較小,脂質核心內可見少量的平滑肌細胞、炎性細胞浸潤。3.免疫組織化學蛋白定量的結果免疫組織化學檢測結果顯示,CD105在大鼠胸主動脈均可見有表達,在模型組斑塊內可見CD105高表達,而藥物干預組斑塊內CD105表達量較模型組減弱,在對照組大鼠胸主動脈可見CD105散在表達,表達量較少。本研究最后對結果進行了定量分析,我們觀察到了模型組CD105表達與對照組比較有顯著差異性(P0.05),模型組CD105與藥物干預組比較有顯著差異性(P0.05),藥物干預組與對照組比較有顯著的差異性(P0.05)。4.熒光定量PCR結果CD105-m RNA在各組均檢測到有表達,各組CD105-m RNA表達均有顯著差異的差異性(P0.05),表現為對照組胸主動脈局部CD105-m RNA表達量最低,模型組CD105-m RNA表達量最高,藥物干預組CD105-m RNA表達含量介于對照組與模型組之間。結論:1.動脈不穩(wěn)定斑塊局部CD105的表達水平明顯增高。2.瑞舒伐他汀能夠明顯的抑制斑塊局部CD105的表達,從而發(fā)揮穩(wěn)定斑塊作用。
【關鍵詞】：動脈粥樣硬化 CD105 瑞舒伐他汀
【學位授予單位】：湖南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R543.5
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一章 引言11-15
• 第二章 材料和方法15-22
• 2.1 實驗動物15
• 2.2 實驗主要藥品和試劑15-16
• 2.3 主要實驗儀器16
• 2.4 實驗分組及動物模型制備16-17
• 2.5 給藥方法17
• 2.6 標本留取和組織制片17
• 2.7 HE染色17-18
• 2.8 免疫組織化學染色18-19
• 2.9 圖像處理及組織病理學的測量19
• 2.10熒光定量PCR檢測CD105-mRNA的表達19-21
• 2.10.1 總RNA的提取19-20
• 2.10.2 RNA純度鑒定20
• 2.10.3 RNA完整性鑒定20-21
• 2.10.4 CD105引物設計與合成21
• 2.11統(tǒng)計分析21-22
• 第三章 結果22-27
• 3.1 一般情況22
• 3.2 肉眼大體觀察22
• 3.3 HE染色結果22
• 3.4 免疫組織化學結果22-23
• 3.5 熒光定量PCR CD105-m RNA表達結果23-27
• 3.5.1 循環(huán)參數的確定23-24
• 3.5.2 目的基因CD105和內參基因的標準曲線及擴增曲線24
• 3.5.3 熒光定量PCR的檢測步驟及結果24-25
• 3.5.4 計算公式及結果分析25-27
• 附圖27-29
• 第四章 討論29-35
• 結論35-36
• 參考文獻36-41
• 綜述41-56
• 參考文獻49-56
• 英文縮寫詞表56-57
• 在讀期間發(fā)表的主要學術論文及參與課題57-58
• 致謝58

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