本文關(guān)鍵詞：年齡因素與大鼠急性酒精性肝損傷的相關(guān)性及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性酒精性肝損傷保護(hù)作用的初步研究

  更多相關(guān)文章： 急性酒精性肝病 年齡相關(guān) BMSC 肝功能 炎癥因子 凋亡

【摘要】：背景及目的:過(guò)量飲酒可引起多器官損傷,其中以肝臟損傷最為顯著。酒精性肝病(alcohol liver disease,ALD)是導(dǎo)致終末期肝病的主要原因之一。酒精性肝病日益成為全球肝病致死的第一大原因。隨著酒精消費(fèi)向低齡化高齡化的發(fā)展,給各年齡階段的群體帶來(lái)深遠(yuǎn)的影響。由于不同年齡階段肝臟功能的差異,我們假設(shè)不同年齡階段酒精所引起的肝損傷的程度也應(yīng)該有所差異,并設(shè)計(jì)不同年齡階段大鼠的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn),來(lái)研究年齡因素與酒精性肝損傷的相關(guān)性。隨著對(duì)自身干細(xì)胞的研究,我們擬通過(guò)靜脈注射自身骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,初步研究干細(xì)胞對(duì)酒精性肝損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制。本研究探討以下問(wèn)題:(1)年齡因素與急性酒精性肝損傷和肝細(xì)胞凋亡的相關(guān)性;(2)初步探討B(tài)MSC對(duì)酒精性肝損傷的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。方法:1.月齡為1、6、18月的SD大鼠每組各15只,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組(n=10)和對(duì)照組(n=5),實(shí)驗(yàn)組每只大鼠以15g/kg 40%乙醇一次性灌胃,對(duì)照組以等比例生理鹽水一次性灌胃。灌胃48 h后取大鼠血液和肝臟組織分別行肝功能和ELISA檢測(cè)肝臟炎癥因子表達(dá)及TUNEL檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡情況。并進(jìn)一步研究酒精刺激后肝細(xì)胞中Bcl-2、Bax、Caspase3等在凋亡通路中的表達(dá)情況,研究年齡因素與急性酒精性肝損傷和肝細(xì)胞凋亡的相關(guān)性及可能機(jī)制。2.取200-220g的雄性SD大鼠90只,隨機(jī)分成空白組、對(duì)照組、BMSC治療組(n=30)。其中對(duì)照組和BMSC治療組每只大鼠以15 g/kg 40%乙醇一次性灌胃,灌胃12小時(shí)后,BMSC治療組從大鼠尾靜脈注入1ml含有5×10~6BMSC細(xì)胞量的生理鹽水,對(duì)照組從大鼠尾靜脈注入1ml生理鹽水。在鼠尾靜脈注射1天、3天、7天后分別取大鼠的血液和肝臟組織行肝功能、肝臟炎癥因子及細(xì)胞凋亡情況的研究。分別從大鼠大體情況,存活率,肝功能,炎癥因子及肝細(xì)胞凋亡角度觀察BMSC對(duì)大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用并初步探討可能機(jī)制。結(jié)果:1.對(duì)照組及不同年齡組間肝功能、炎癥指標(biāo)無(wú)顯著差異(P0.05),1月齡組和6月齡組的肝細(xì)胞凋亡率無(wú)明顯差異,18月齡組顯著高于其他兩組(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組內(nèi)不同年齡組的肝功能、炎癥因子表達(dá)和肝細(xì)胞凋亡率均顯著高于對(duì)照組(P0.05)。且不同年齡組間存在差異:實(shí)驗(yàn)組6月齡組的炎癥因子表達(dá)顯著高于其他各組(P0.05)。而實(shí)驗(yàn)組內(nèi)1月齡組的大鼠細(xì)胞凋亡率最高,6月齡組次之,18月齡組最低,各組間差異顯著(P0.05)。進(jìn)一步研究顯示Bcl-2、Bax、Caspase3在不同年齡實(shí)驗(yàn)組中表達(dá)不同,其中Bax、Caspase3的表達(dá)1月齡組最高,6月齡次之,18月齡組最低,各組間差異顯著(P0.05),而B(niǎo)cl-2的表達(dá)則趨勢(shì)相反,且各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.對(duì)照組、BMSC治療組與空白組相比,大鼠活動(dòng)度降低,存活率降低,而肝功能指標(biāo)、炎癥因子及細(xì)胞凋亡率均有顯著的增高(P0.05)。BMSC治療組與對(duì)照組相比,存活率顯著增高(P0.05),在BMSC治療后的第1天及第3天時(shí)血液肝功能指標(biāo)、炎癥因子及細(xì)胞凋亡情況均顯著好轉(zhuǎn)(P0.05)。第7天時(shí)各組肝功能、炎癥因子及細(xì)胞凋亡較第1天和第3天均有所好轉(zhuǎn)。結(jié)論:1.生理狀態(tài)下,肝功能、炎癥因子與年齡因素?zé)o顯著相關(guān)性,肝細(xì)胞凋亡率在老年時(shí)有所增加。急性過(guò)量飲酒可引起肝臟損傷和凋亡,且損傷程度、凋亡率與年齡呈一定相關(guān)性:以40%乙醇15g/kg劑量一次性灌胃,48小時(shí)后,6月齡組大鼠肝臟損傷最重,而1月齡組肝細(xì)胞凋亡率最高。表明一次性過(guò)量飲酒可引起肝臟損傷和肝細(xì)胞凋亡,其程度因鼠齡差異而表現(xiàn)不同。這可能與不同年齡大鼠在酒精刺激下肝臟炎癥細(xì)胞的激活量及肝細(xì)胞凋亡通路的激活不同有關(guān)。2.酒精性肝病可引起大鼠肝功能、炎癥因子及細(xì)胞凋亡的顯著增加;大鼠的肝臟具有很強(qiáng)的自我修復(fù)能力,酒精性肝損傷1周后,各組肝功能及炎癥因子等各項(xiàng)指標(biāo)均有所恢復(fù)。而靜脈注射BMSC可以提高酒精性肝損害的早期存活率,并從降低肝組織炎癥反應(yīng)及細(xì)胞凋亡方面起到對(duì)肝臟損傷的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：急性酒精性肝病 年齡相關(guān) BMSC 肝功能 炎癥因子 凋亡
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R575
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 縮略詞表10-11
• 前言11-18
• 參考文獻(xiàn)15-18
• 第一部分 年齡因素與大鼠急性酒精性肝損傷相關(guān)性的研究18-34
• 一、材料和方法19-23
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-28
• 三、討論28-30
• 四、小結(jié)30-31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 第二部分 大鼠BMSC細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定34-44
• 一、材料和方法34-37
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-40
• 三、討論40-41
• 四、小結(jié)41-42
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 第三部分 BMSC對(duì)大鼠急性酒精性肝損傷保護(hù)作用的初步研究44-60
• 一、材料和方法44-48
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果48-55
• 三、討論55-57
• 四、小結(jié)57-58
• 參考文獻(xiàn)58-60
• 全文總結(jié)60-61
• 綜述 酒精性肝病與炎癥因子61-73
• 參考文獻(xiàn)67-73
• 碩士在讀期間發(fā)表論文和參加科研工作情況73-74
• 致謝74

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王磊;李宗帥;張海蓉;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在肝硬化治療中的研究進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2015年28期

2 孫慧聰;張國(guó)尊;郭金波;馮燕;鄭力搏;張曉嵐;;臍帶源間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療肝纖維化及肝硬化的相關(guān)機(jī)制[J];中國(guó)組織工程研究;2015年41期

3 馬霖杰;陳剛;胡宗強(qiáng);劉洪;王冬冬;方鶴;金雄;;間充質(zhì)干細(xì)胞治療慢加急性肝衰竭的機(jī)制[J];臨床肝膽病雜志;2015年09期

4 劉瑩;周曉玲;謝勝;陳峭;侯秋科;李澤鵬;李燦;韋金秀;;不同干預(yù)手段骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植方案對(duì)肝硬化大鼠模型的療效觀察[J];遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2015年08期

5 董慶洋;唐麗;;Kupffer細(xì)胞在非酒精性脂肪性肝病中的作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2015年03期

6 任志剛;周琳;王偉林;鄭樹(shù)森;;腸道微生態(tài)紊亂對(duì)肝臟疾病進(jìn)展的促進(jìn)作用[J];中華消化雜志;2015年02期

7 李吉榮;張拉春;高慧英;宋曉榮;吳新柱;;酒精性肝硬化發(fā)病機(jī)制及治療進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2014年35期

8 Luisa Vonghia;Peter Michielsen;Geert Dom;Sven Francque;;Diagnostic challenges in alcohol use disorder and alcoholic liver disease[J];World Journal of Gastroenterology;2014年25期

9 阮清偉;俞卓偉;保志軍;馬永興;;免疫基因多態(tài)性與衰老和增齡相關(guān)疾病關(guān)系[J];遺傳;2013年07期

10 尤楠;劉衛(wèi)輝;竇科峰;;胎肝干細(xì)胞治療終末期肝病的研究進(jìn)展[J];中華消化外科雜志;2012年02期

，

本文編號(hào)：991214