本文關(guān)鍵詞：白介素-37對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1活化的人肝星狀細(xì)胞的影響

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【摘要】：目的:1.利用重組人白細(xì)胞介素-37(interleukin-37,IL-37)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)同時(shí)干預(yù)人LX2-肝星狀細(xì)胞(LX2-hepatic stellate cell,LX2-HSC),觀察重組人IL-37對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)活化的人LX2-HSC的增殖及凋亡的影響,并觀察其對(duì)人LX2-HSC表達(dá)的I型膠原蛋白(collagen I,Col-I)、III型膠原蛋白(collagen III,Col-III)的影響。2.初步探討重組人IL-37抗肝纖維化的作用及機(jī)制。方法:1.細(xì)胞培養(yǎng):以RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)人LX2-HSC。2.實(shí)驗(yàn)分組:(1)空白對(duì)照組(A組):只含有RPMI-1640培養(yǎng)基;(2)實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(B組):含TGF-β1 5ng/ml,不含重組人IL-37;(3)實(shí)驗(yàn)組(C組):含TGF-β1 5ng/ml、重組人IL-37 100ng/ml;(4)實(shí)驗(yàn)組(D組):含TGF-β1 5ng/ml、重組人IL-37 200ng/ml;(5)實(shí)驗(yàn)組(E組):含TGF-β1 5ng/ml、重組人IL-37 400ng/ml。3.檢測(cè)人LX2-HSC的細(xì)胞吸光度并計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率,檢測(cè)細(xì)胞凋亡率及Col-I、Col-III的表達(dá):在各組不同濃度重組人IL-37作用下的人LX2-HSC分別培養(yǎng)12h、24h、48h后,用MTT法檢測(cè)人LX2-HSC的增殖情況,測(cè)量各組細(xì)胞吸光度,并通過細(xì)胞吸光度計(jì)算各組細(xì)胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率;相同方法培養(yǎng)人LX2-HSC,收集藥物處理后的細(xì)胞上清液,用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(elisa法)檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞上清液中col-i及col-iii的濃度。4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:兩個(gè)隨機(jī)獨(dú)立樣本均數(shù)比較用t檢驗(yàn);多個(gè)樣本均數(shù)比較用單因素方差分析;多個(gè)樣本均數(shù)之間的兩兩比較用lsd法;結(jié)果均以p0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。采用spss17.0的統(tǒng)計(jì)軟件分析所有數(shù)據(jù)。結(jié)果:1.對(duì)人lx2-hsc的增殖抑制作用:在重組人il-37與tgf-β1共培養(yǎng)12h、24h、48h后,各時(shí)間點(diǎn)a組與b組細(xì)胞吸光度比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),且b組細(xì)胞吸光度高于a組;b組、c組、d組、e組細(xì)胞吸光度及增殖抑制率比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),且隨著重組人il-37濃度增加,各組細(xì)胞吸光度降低,細(xì)胞增殖抑制率增加;12h和24h時(shí)c組與d組、e組的細(xì)胞吸光度及細(xì)胞增殖抑制率比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),d組與e組的細(xì)胞吸光度及細(xì)胞增殖抑制率比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);而48h時(shí)c組、d組、e組的細(xì)胞吸光度及細(xì)胞增殖抑制率比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。相同藥物濃度組各時(shí)間點(diǎn)的比較,結(jié)果顯示各藥物濃度組在各時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞吸光度及細(xì)胞增殖抑制率比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),且隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),各組細(xì)胞吸光度降低、細(xì)胞增殖抑制率增加。2.對(duì)人lx2-hsc凋亡率的影響:各時(shí)間點(diǎn)a組與b組細(xì)胞凋亡率比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),且b組細(xì)胞凋亡率低于a組;b組、c組、d組、e組的細(xì)胞凋亡率比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),且隨著重組人il-37濃度增加,各組細(xì)胞凋亡率增高;12h和24h時(shí)c組與d組、e組的細(xì)胞凋亡率比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),d組與e組的細(xì)胞凋亡率比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);而48h時(shí)C組、D組、E組的細(xì)胞凋亡率比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。相同藥物濃度組各時(shí)間點(diǎn)的比較,結(jié)果顯示各藥物濃度組在各時(shí)間點(diǎn)之間的細(xì)胞凋亡率的比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),各組細(xì)胞凋亡率也增加。3.對(duì)人LX2-HSC表達(dá)Col-I、Col-III的影響:各時(shí)間點(diǎn)A組與B組的Col-I及Col-III濃度比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且B組的濃度高于A組;B組、C組、D組、E組的Col-I及Col-III濃度比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且隨著重組人IL-37濃度增加,各組細(xì)胞表達(dá)Col-I、Col-III的濃度減少,但重組人IL-37干預(yù)的C組、D組、E組表達(dá)的Col-I、Col-III的濃度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。各藥物濃度組各時(shí)間點(diǎn)之間的比較結(jié)果顯示均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),即本實(shí)驗(yàn)所設(shè)置的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)人LX2-HSC所表達(dá)的Col-I、Col-III的濃度還未呈現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:1.5ng/ml TGF-β1可促進(jìn)人LX2-HSC增殖、促進(jìn)人LX2-HSC表達(dá)Col-I和Col-III。2.重組人IL-37可抑制TGF-β1活化的人LX2-HSC的增殖。3.重組人IL-37可促進(jìn)TGF-β1活化的人LX2-HSC凋亡。4.重組人IL-37可抑制TGF-β1活化的人LX2-HSC表達(dá)Col-I、Col-III。總之本實(shí)驗(yàn)研究表明重組人IL-37可能通過抑制活化的人LX2-HSC增殖、促進(jìn)其凋亡及抑制其表達(dá)Col-I、Col-III而發(fā)揮抗肝纖維化作用。
【關(guān)鍵詞】：重組人白細(xì)胞介素-37 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1 肝星狀細(xì)胞 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R575.2
【目錄】：

• 中文摘要3-6
• 英文摘要6-10
• 前言10-14
• 材料與方法14-25
• 結(jié)果25-39
• 討論39-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 英漢縮略詞對(duì)照表51-52
• 致謝52-54
• IL-37抗肝纖維化作用研究進(jìn)展（綜述）54-63
• 參考文獻(xiàn)60-63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 Ashley M Lakner;Cathy C Moore;Alyssa A Gulledge;Laura W Schrum;;Daily genetic profiling indicates JAK/STAT signaling promotes early hepatic stellate cell transdifferentiation[J];World Journal of Gastroenterology;2010年40期

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本文編號(hào)：937265