本文關(guān)鍵詞：一種新型脂肪變性HepG2細(xì)胞模型及線粒體能量代謝障礙評(píng)價(jià)

  更多相關(guān)文章： HepG細(xì)胞 脂肪變性 活性氧 線粒體膜電位 能量代謝

【摘要】：目的探討建立一種新型的脂肪變性Hep G2細(xì)胞模型的方法,并對(duì)細(xì)胞線粒體能量代謝障礙程度進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法予25%的胎牛血清和0.1%的醫(yī)用脂肪乳DMEM培養(yǎng)基初步誘導(dǎo)12 h后,進(jìn)一步予油酸和棕櫚酸組成的0.1 mmol/L游離脂肪酸(FFA)DMEM培養(yǎng)基再次誘導(dǎo)12 h,建立脂肪變性Hep G2細(xì)胞模型,并以無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基作為對(duì)照比較。誘導(dǎo)成功后,采用油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴沉積狀況,并用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)細(xì)胞上清液丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量和細(xì)胞內(nèi)三酰甘油(TG)含量;采用流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)和線粒體膜電位的變化,采用磷鉬酸比色法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)三磷酸腺苷(ATP)含量,綜合評(píng)測(cè)脂肪變性細(xì)胞線粒體能量代謝障礙的程度。結(jié)果與對(duì)照組比較,模型組細(xì)胞內(nèi)橘紅色脂滴大量形成,且TG和ROS含量明顯增高(P0.01),而線粒體膜電位及細(xì)胞內(nèi)ATP含量顯著降低(P0.01)。結(jié)論采用25%胎牛血清、0.1%中/長(zhǎng)鏈脂肪乳和0.1 mmol/L FFA分階段誘導(dǎo)Hep G2細(xì)胞,可以成功在體外建立脂肪變性細(xì)胞模型,該模型會(huì)引起細(xì)胞線粒體能量代謝紊亂,與非酒精性脂肪性肝病臨床發(fā)病機(jī)制存在相似性。
【作者單位】： 暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院中醫(yī)系;廣東省中醫(yī)院大學(xué)城院區(qū)放療科;暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院中醫(yī)科;
【關(guān)鍵詞】： HepG細(xì)胞 脂肪變性 活性氧 線粒體膜電位 能量代謝
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81302878,81273617) 中國(guó)肝炎防治基金會(huì)天晴肝病研究基金科研課題(編號(hào):CFHPC20132184) 廣東省中醫(yī)藥局建設(shè)中醫(yī)藥強(qiáng)省科研項(xiàng)目(編號(hào):20152112,20151224)
【分類(lèi)號(hào)】：R575.5
【正文快照】： 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一種遺傳-環(huán)境-代謝應(yīng)激相關(guān)性疾病[1],其發(fā)病與胰島素抵抗、線粒體功能障礙、氧化應(yīng)激和肥胖等因素密切相關(guān)[2-3],其中線粒體損傷引起的能量代謝障礙在NAFLD發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用[4]。目前大鼠、小鼠等動(dòng)物模型是研究NAFLD發(fā)病的重要實(shí)驗(yàn)載體,但

【相似文獻(xiàn)】

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