本文關(guān)鍵詞：乙�；富騢MOF與HBV復(fù)制相關(guān)性的研究

  更多相關(guān)文章： 乙肝病毒復(fù)制 乙�；� 慢病毒載體 hMOF

【摘要】：目的:HBV的復(fù)制與宿主細胞內(nèi)表觀遺傳學(xué)因子的相關(guān)性成為新進關(guān)注的熱點。本課題探討乙�；富騢 MOF與慢性乙型肝炎病毒感染后HBV復(fù)制的相關(guān)性。方法:1.構(gòu)建乙�；富騢 MOF慢病毒RNAi文庫,選擇8對可以保證干擾效率的sh RNA序列,構(gòu)建慢病毒載體;2.sh RNA慢病毒感染Hep G2.2.15細胞,感染后72 h后,q PCR檢測HBV pg RNA,確保干擾效率;3.沉默h MOF 72 h及96 h后,ELISA檢測細胞上清分泌的HBs Ag與HBe Ag含量,q PCR檢測HBV-DNA的含量;4.免疫組化方法分別檢測HBe Ag陽性與HBe Ag陰性慢性乙型病毒性肝炎患者肝組織中h MOF的蛋白水平表達,q PCR方法檢測h MOF m RNA水平,分析其與患者血清HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA的相關(guān)性。結(jié)果:1.成功構(gòu)建了8個h MOF基因的慢病毒載體;2.沉默h MOF基因后,HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA的表達水平顯著下調(diào);3.HBe Ag陽性慢性乙型病毒性肝炎患者肝組織中h MOF的蛋白及m RNA表達水平明顯高于正常對照組(P0.001、P=0.004),且h MOF的蛋白水平與HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA均成正相關(guān)(r2=0.3275、P0.001,r2=0.22、P=0.0051,r2=0.4195、P0.001);HBe Ag陰性慢性乙型病毒性肝炎患者肝組織中h MOF的蛋白表達水平明顯高于正常對照組(P=0.0083),且h MOF的蛋白水平與HBV-DNA成正相關(guān)(r2=0.1896、P=0.0377)。結(jié)論:沉默h MOF基因后,Hep G2.2.15細胞分泌的HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA表達顯著下調(diào);慢性乙型病毒性肝炎患者肝組織中h MOF的蛋白表達水平與HBV-DNA成正相關(guān);HBe Ag陽性患者肝組織中h MOF的m RNA及蛋白表達水平與HBs Ag、HBe Ag成正相關(guān),提示h MOF可能在HBV復(fù)制的過程中發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：乙肝病毒復(fù)制 乙�；� 慢病毒載體 hMOF
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R512.62
【目錄】：

• 摘要5-7
• abstract7-10
• 英文縮寫10-11
• 緒論11-18
• 第一部分 乙酰化酶基因hMOF RNA干擾文庫的構(gòu)建及其對Hep G2.2.15 細胞感染影響的研究18-40
• 前言18-19
• 材料與方法19-27
• 結(jié)果27-37
• 討論37-40
• 第二部分 乙�；富騢MOF與HBV復(fù)制相關(guān)性的研究40-75
• 前言40-41
• 材料與方法41-56
• 結(jié)果56-73
• 討論73-75
• 結(jié)論75-76
• 參考文獻76-82
• 致謝82-84
• 攻讀學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果84

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本文編號：869571