本文關(guān)鍵詞：急性胰腺炎腸道菌群的變化以及其與炎癥的關(guān)系

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【摘要】：背景:急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是消化系統(tǒng)的常見疾病,臨床上,輕癥急性胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)患者不伴有器官衰竭和并發(fā)癥,病情程度輕,病死率極低,而重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者病程早期易出現(xiàn)器官功能障礙,病死率可達36-50%,若后期出現(xiàn)繼發(fā)感染,則病死率更高。近年來,越來越多的證據(jù)表明,腸道菌群在AP病情進展中發(fā)揮著重要的作用,腸道微生態(tài)的平衡可以通過調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)和代謝途徑,并形成腸粘膜生物屏障,從而減少細菌過度增殖及腸源性感染的發(fā)生。目的:通過收集AP患者血清、糞便,測定血液中炎癥因子、腸粘膜屏障功能相關(guān)指標(biāo),并對腸道菌群進行16S rDNA測序分析,明確AP患者腸道菌群的變化,評價腸道菌群的變化在AP患者病情進展中的作用。研究方法:自2015年7月至2015年12月納入符合入組標(biāo)準的AP患者,收集所有患者入院后的血液,采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA)測定血液中的炎癥相關(guān)指標(biāo):腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白細胞介素-18(interleuki n-18,IL-18),以及腸粘膜屏障功能相關(guān)指標(biāo):二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)。收集患者糞便,提取DNA,選定16S rDNA V4區(qū)段進行聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction,PCR)擴增,結(jié)合Illumina Miseq高通量測序平臺測序鑒定腸道菌群組成,表達峰度,最后收集患者臨床資料,進行統(tǒng)計學(xué)分析:1、將AP分為MAP,中度重癥AP(moderately severe acute pancreatitis,MSAP),SAP三組,比較三組之間基本情況、相關(guān)指標(biāo)、腸道菌群的差異;2、根據(jù)是否出現(xiàn)感染性并發(fā)癥將MSAP、SAP患者分為感染與非感染組,比較兩組之間基本情況、相關(guān)指標(biāo)、腸道菌群的差異;3、將腸道菌群與相關(guān)指標(biāo)進行斯皮爾曼(spearman)相關(guān)因素分析,了解腸道菌群與病情、炎癥反應(yīng)、腸粘膜屏障功能的關(guān)系。結(jié)果:1.共納入ap患者116例,其中男性、女性各58例,map41例,msap52例,sap23例,年齡51.6±14.6歲,平均起病天數(shù)2.8±1.7天,血液及糞便收集時間為起病4.6±2天。2.map、msap、sap三組間炎癥相關(guān)指標(biāo)比較:c-反應(yīng)蛋白(c-reactiveprotein,crp)水平:msap、sap組高于map組(p0.05);il-1β、tnf-α水平:sap組高于msap、map組(p0.05),msap組高于map組(p0.05);降鈣素原(procalcitonin,pct)、dao水平:sap組高于msap、map組(p0.05);il-18水平:sap組高于map組(p0.05)。3.map、msap、sap三組間腸道菌群主要結(jié)果差異:(1)116個樣品共產(chǎn)生847個操作分類單元(operationaltaxonomicunit,otu),三組之間腸道菌群物種多樣性無明顯差異(p0.05)。(2)門水平:放線菌門數(shù)量,sap組較map組減少(p0.05)。(3)綱水平:β-變形菌綱數(shù)量,msap組較map組增加(p0.05)。(4)目水平:伯克氏菌目數(shù)量,msap組較map組增加(p0.05);雙歧桿菌目數(shù)量,sap組較map組減少(p0.05)。(5)科水平:雙歧桿菌科、乳桿菌科數(shù)量,sap組較map組減少(p0.05)。(6)屬水平:有益菌雙歧桿菌數(shù)量,sap組較map、msap組減少(p0.05);乳酸桿菌數(shù)量,sap組較map組減少(p0.05);faecalibacterium、butyricicoccus屬數(shù)量,msap組較map、sap組增多(p0.05)。(7)種水平:有益菌普拉梭菌、butyricicoccuspullicaecorum菌數(shù)量,msap組較map、sap組增多(p0.05);羅伊氏乳酸桿菌,sap、msap組較map組減少(p0.05)。4.感染組與非感染組比較:(1)感染組入院24h急性生理與慢性健康(acutephysiologyandchronichealthevaluation-ii,apache-ii)評分、48hapache-ii評分、住院天數(shù)、icu住院天數(shù)、dao水平均高于非感染組(p0.05)。(2)感染組有益菌丁酸梭菌、butyricicoccuspullicaecorum菌數(shù)量較非感染組明顯減少(p0.001)。5.腸道菌群與相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)分析:條件致病菌糞球菌屬(r=0.351)與il-1β水平呈正相關(guān);腸球菌屬(r=0.208)、變形桿菌屬(r=0.300)、假單胞菌屬(r=0.307)與TNF-a水平呈正相關(guān);葡萄球菌屬(r=0.236)與IL-18水平呈正相關(guān)。結(jié)論:1、病程早期,MAP、MSAP、SAP三組之間腸道菌群的物種多樣性雖無明顯差異,但SAP組、MSAP組與MAP組相比,條件致病菌增多,有益菌數(shù)量減少,提示早期腸道菌群失調(diào)可能在AP的病情進展中起了一定的作用;2、條件致病菌的增多和有益菌的減少可能參與了AP的炎癥反應(yīng),促使MAP、MSAP向SAP轉(zhuǎn)化,并使其易于發(fā)生感染性并發(fā)癥。
【關(guān)鍵詞】：急性胰腺炎 腸道菌群 16S rDNA 炎癥因子
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R576
【目錄】：

• 摘要3-6
• ABSTRACT6-11
• 中英文縮略詞對照表11-12
• 第1章 引言12-13
• 第2章 對象和方法13-18
• 2.1 研究對象13-14
• 2.1.1 入選標(biāo)準13
• 2.1.2 排除標(biāo)準13-14
• 2.1.3 樣本量計算14
• 2.2 實驗方法14-17
• 2.2.1 主要試劑盒14
• 2.2.2 血液標(biāo)本的處理及保存14-15
• 2.2.3 糞便標(biāo)本的處理及保存15-16
• 2.2.4 16SrDNA測序16-17
• 2.3 統(tǒng)計學(xué)分析17-18
• 第3章 結(jié)果18-38
• 3.1 一般資料18-19
• 3.2 炎癥及腸粘膜功能相關(guān)指標(biāo)19
• 3.3 16SrDNA測序結(jié)果19-33
• 3.3.1 OTU聚類及豐度分析19-24
• 3.3.2 多樣性分析24-25
• 3.3.3 物種注釋分析25-33
• 3.4 感染組與非感染組的比較33-36
• 3.4.1 患者一般情況33-34
• 3.4.2 感染組與非感染組組間菌群差異分析34-36
• 3.5 腸道菌群與相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)分析36-38
• 第4章 討論38-41
• 第5章 結(jié)論41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻43-45
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果45-46
• 綜述46-51
• 參考文獻50-51

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：822233