本文關鍵詞：5-HT系統(tǒng)調控大鼠膽汁淤積誘導的抗傷害性及瘙癢機制的研究

  更多相關文章： 膽汁淤積 瘙癢 痛閾 5-羥色胺

【摘要】：目的:我們首先建立BDL大鼠模型,并確定模型的穩(wěn)定性,探究膽汁淤積大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)和皮膚中5-HT含量的變化以及膽汁淤積性大鼠外周神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中5-HT各受體亞型的表達變化;在BDL大鼠模型中,采用藥理學和行為學等方法激活或阻斷5-HT各受體亞型,來探究內(nèi)源性5-HT系統(tǒng)調控膽汁淤積大鼠瘙癢反應及痛閾升高的分子機制。方法:將SD大鼠隨機分為兩組,一組進行膽管結扎(BDL組),另一組僅做相應手術處理,不做膽管結扎(SHAM組),每組5-9只。應用行為學,肝切片HE染色以及ALT試劑盒檢測等技術,確定造模成功,應用高效液相色譜法(HPLC)檢測大鼠外周神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織中的5-HT含量變化,同時應用免疫熒光化學法觀察5-HT在脊髓組織中的表達變化。在造模成功之后,在固定的時間點,對大鼠采用甩尾實驗、測量機械痛、熱痛等的方法研究BDL之后大鼠的痛閾變化。并于術后固定時間點,對兩組大鼠采用面頰部或頸背部注射5-HT(200μg/只),通過行為學技術確定SHAM組與BDL組對5-HT誘發(fā)的瘙癢反應隨著造模后時間的延伸,瘙癢程度的變化。再通過藥理學等方法逐一激活或阻斷5-HT各受體亞型并觀察瘙癢和痛閾的變化,以及通過熒光定量Q-PCR分析確定外周及中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的5-HT各受體亞型的表達變化,來探究5-HT系統(tǒng)調控膽汁淤積大鼠瘙癢反應及痛閾升高的分子機制。結果:(1)在膽管結扎后四周內(nèi)BDL大鼠并未出現(xiàn)明顯的自發(fā)瘙癢反應,但BDL大鼠的痛閾以及5-HT所誘發(fā)的瘙癢反應比對照組顯著增加。(2)免疫熒光結果顯示,膽汁淤積大鼠脊髓中5-HT含量顯著升高;HPLC結果顯示BDL大鼠的皮膚和脊髓中5-HT的含量較對照組顯著升高,而血液中的5-HT含量卻顯著降低。(3)熒光定量PCR分析發(fā)現(xiàn),BDL組,在外周神經(jīng)系統(tǒng),包括背根神經(jīng)節(jié)(DRG)和三叉神經(jīng)節(jié)(TG),不同5-HT受體亞型發(fā)生顯著上調,包括5-HT1B、5-HT1D、5-HT1F、5-HT2A、5-HT2B、5-HT3A、5-HT5、5-HT6和5-HT7。與之形成鮮明對比的是,在中樞神經(jīng)系統(tǒng),包括脊髓和腦干,不同5-HT受體亞型則發(fā)生顯著下調,包括5-HT1A、5-HT1F、5-HT2B、5-HT2C、和5-HT3A等。(4)采用藥理學等方法激活或阻斷5-HT各受體亞型,來探究內(nèi)源性5-HT系統(tǒng)調控膽汁淤積大鼠瘙癢反應及痛閾升高的分子機制,發(fā)現(xiàn)皮內(nèi)注射5-HT2受體激動劑(a-methyl-5-HT)和5-HT7受體激動劑(LP44)在SHAM組和BDL組均可誘發(fā)瘙癢,而5-HT3A受體激動劑(2-Methyl-5-hydroxytryptamine)僅能在BDL組誘發(fā)瘙癢反應。相一致的是,腹腔注射5-HT2拮抗劑(Ketanserin)均能抑制對照組和BDL組的瘙癢反應,而腹腔注射5-HT3A拮抗劑(Ondansetron和Azasetron)僅能抑制BDL組的瘙癢反應。在脊髓水平,鞘內(nèi)注射5-HT受體激動劑,包括5-HT1A(DPAT),5-HT2(a-methyl-5-HT),5-HT3A(2-Methyl-5-hydroxytryptamine)和5-HT7(LP44)能抑制對照組和BDL組大鼠瘙癢行為。鞘內(nèi)注射5-HT1A受體拮抗劑(WAY-100635)增加對照組的瘙癢而抑制BDL組大鼠的瘙癢,而5-HT7受體拮抗劑(SB269970)能抑制對照組和BDL組大鼠瘙癢行為。另外,鞘內(nèi)注射5-HT受體激動劑,包括5-HT1A(DPAT),5-HT2(a-methyl-5-HT),和5-HT3A(2-Methyl-5-hydroxytryptamine),以及系統(tǒng)注射5-HT2受體拮抗劑(Ketanserin)和5-HT3A受體拮抗劑(Ondansetron和Azasetron)能抑制BDL誘發(fā)的痛閾升高。而鞘內(nèi)注射5-HT1A受體激動劑(DPAT)能降低,5-HT1A拮抗劑(WAY-100635)能升高SHAM組大鼠的痛閾。結論:(1)在膽汁淤積大鼠中存在癢覺敏化和痛閾升高的現(xiàn)象;(2)在膽汁淤積大鼠中,皮膚和脊髓組織中5-HT的含量升高;(3)膽汁淤積誘發(fā)背根神經(jīng)節(jié)和三叉神經(jīng)節(jié)不同5-HT受體亞型的表達顯著上調,而在脊髓和腦干,則導致不同5-HT受體亞型的表達顯著下調;(4)與引起瘙癢有關的5-HT受體主要是:5-HT2和5-HT7及5-HT3A受體,在外周激活這三個受體可以誘發(fā)瘙癢,而在中樞激活則會抑制瘙癢行為;(5)脊髓5-HT1A、5-HT2,5-HT3A,參與調控膽汁淤積誘導的痛閾升高,但是5-HT7的作用并不明顯。
【關鍵詞】：膽汁淤積 瘙癢 痛閾 5-羥色胺
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R575
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-15
• 參考文獻13-15
• 材料與方法15-26
• 結果26-41
• 討論41-45
• 參考文獻45-48
• 總結48-51
• 綜述51-65
• 參考文獻58-65
• 攻讀碩士研究生學位期間的科研及成果65-66
• 縮略詞表66-67
• 致謝67-70

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳同度,張昌穎;素食大鼠的貧血現(xiàn)象[J];營養(yǎng)學報;1957年04期

2 陳偉強;趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實驗動物科學;1992年04期

3 肖柳英,林培英,馮昭明,張丹;不同周齡的SD大鼠生理、生化及體重的正常值測定[J];中藥新藥與臨床藥理;1996年03期

4 李淑云;簡易大鼠灌胃器的制作[J];錦州醫(yī)學院學報;2001年04期

5 楊明智,陳積圣;一種大鼠抓取與固定的新工具介紹[J];上海實驗動物科學;2001年03期

6 戴英,陸群;復方H_(505)對Wistar大鼠外周血的血液流變學指標的影響[J];中國血液流變學雜志;2001年01期

7 韋應波,孫喜慶,曹新生,姚永杰,馮岱雅,楊長斌;+Gz暴露時間對大鼠記憶功能和行為的影響[J];航天醫(yī)學與醫(yī)學工程;2003年01期

8 呂學軍,郭俊生,李敏,周利梅,張永娟;暈船大鼠體內(nèi)鐵含量的變化[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2003年04期

9 湯仁仙,王迎偉,王慧,周峰;201A中藥合劑對大鼠抗腎小球基底膜腎炎病變的影響[J];徐州醫(yī)學院學報;2003年06期

10 孫同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陳偉;介紹一種簡易的大鼠保定方法[J];上海實驗動物科學;2004年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 尹音;孫振宇;胡敏;李冬霞;;持續(xù)性高正加速度對大鼠顳頜關節(jié)損傷的作用[A];第八屆全國顳下頜關節(jié)病學及（牙合）學大會論文匯編[C];2011年

2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文編號：777386