本文關(guān)鍵詞：糞便新喋呤及鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)對(duì)炎癥性腸病活動(dòng)度的判斷價(jià)值

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【摘要】：研究背景炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)是一種病因和發(fā)病機(jī)制至今尚未完全清楚的腸道慢性非特異性的炎癥性疾病,主要包括克羅恩病(Crohn's disease,CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)。IBD患者的主要臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)生的腹痛、腹瀉和黏液膿血便,病情嚴(yán)重者可出現(xiàn)消化道出血、穿孔、梗阻、營(yíng)養(yǎng)不良、癌變及各種腸內(nèi)腸外并發(fā)癥。IBD是歐美國(guó)家消化系統(tǒng)疾病中較為常見(jiàn)的一種疾病,但近年來(lái)我國(guó)IBD的發(fā)病率和患病率也呈明顯上升趨勢(shì),IBD也已然成為我國(guó)消化系統(tǒng)疾病的常見(jiàn)疾病。我國(guó)IBD發(fā)病年齡段以青年期為主,多數(shù)研究認(rèn)為IBD是一種終身的腸道炎癥性疾病,其臨床特點(diǎn)是疾病不斷處于緩解期與活動(dòng)期的反復(fù)交替狀態(tài),嚴(yán)重影響患者的身心健康和生活質(zhì)量。IBD患者的治療目標(biāo)是達(dá)到腸道黏膜愈合,目前臨床上評(píng)價(jià)IBD患者腸道黏膜愈合的金標(biāo)準(zhǔn)是內(nèi)鏡檢查及組織病理學(xué)檢查。然而內(nèi)鏡檢查是一種侵入性的、耗時(shí)的、需要進(jìn)行腸道準(zhǔn)備且可能存在一定潛在風(fēng)險(xiǎn)的檢查方法,有時(shí)難以為患者所接受,臨床實(shí)踐過(guò)程中難以通過(guò)反復(fù)的內(nèi)鏡檢查來(lái)對(duì)IBD患者進(jìn)行日常隨訪,也無(wú)法頻繁地使用內(nèi)鏡檢查來(lái)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)IBD患者的疾病活動(dòng)狀態(tài)。因此,臨床上一個(gè)或多個(gè)簡(jiǎn)便的、可靠的、快速的、侵入性的生物標(biāo)志物用來(lái)替代內(nèi)鏡檢查及組織病理學(xué)檢查用于評(píng)價(jià)IBD患者腸道黏膜疾病活動(dòng)狀態(tài),將更容易被患者接受,從而提高患者診療隨訪的依從性,這將十分有助于臨床醫(yī)生實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)掌握IBD患者的疾病活動(dòng)狀態(tài),從而及時(shí)優(yōu)化治療方案,盡早達(dá)到腸道黏膜愈合的治療目標(biāo),最終使患者獲益。目前臨床上常用于評(píng)價(jià)IBD患者疾病活動(dòng)狀態(tài)的臨床疾病活動(dòng)指數(shù)或評(píng)分,如克羅恩病疾病活動(dòng)指數(shù)(Crohn's Disease Activity Index,CDAI)和潰瘍性結(jié)腸炎的Mayo評(píng)分等,雖然這些臨床指數(shù)簡(jiǎn)便、易行,廣泛地被患者所接受,但是這些臨床指數(shù)往往具有主觀依賴性,且很大程度上要依賴于患者表述的癥狀和醫(yī)生的主觀判斷,因此相對(duì)缺乏客觀性,有時(shí)難以真實(shí)反映IBD患者疾病活動(dòng)狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)一些生物標(biāo)志物與IBD疾病活動(dòng)性評(píng)分具有較好的相關(guān)性,可用于判斷IBD患者疾病狀態(tài)。IBD患者臨床實(shí)踐中常用的血液生物標(biāo)志物,如血清C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP),是臨床上評(píng)價(jià)IBD患者臨床疾病活動(dòng)狀態(tài)時(shí)最常使用的一種血液生物標(biāo)志物,以往研究發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了血清CRP與IBD患者臨床或內(nèi)鏡疾病活動(dòng)性評(píng)分具有一定的相關(guān)性,臨床實(shí)踐中可以通過(guò)檢測(cè)IBD患者的血清CRP水平來(lái)動(dòng)態(tài)評(píng)價(jià)其疾病活動(dòng)狀態(tài),以便醫(yī)生動(dòng)態(tài)掌握患者的疾病狀態(tài)。然而有部分研究發(fā)現(xiàn)血清CRP用于評(píng)價(jià)IBD患者疾病活動(dòng)性時(shí),其敏感性相對(duì)較低,特別是用于評(píng)價(jià)UC患者疾病活動(dòng)性時(shí),其敏感性更低,一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),在處于活動(dòng)期的UC患者中,至少有50%的患者的血清CRP水平未見(jiàn)明顯異常。此外,血清CRP缺乏腸道特異性,在其他一些如感染性疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及免疫系統(tǒng)疾病等患者的外周血中也會(huì)出現(xiàn)明顯升高,從而限制了其在IBD患者臨床中的應(yīng)用價(jià)值。研究證實(shí)IBD患者處于疾病活動(dòng)期時(shí),其腸道黏膜及黏膜下層存在大量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),特別是中性粒細(xì)胞大量滲出至腸腔黏膜,而糞便在途徑腸道黏膜過(guò)程中可以攜帶一些來(lái)源于這些炎性細(xì)胞且能反映疾病活動(dòng)狀態(tài)的生物分子,故與血液生物標(biāo)志物相比,糞便生物標(biāo)志物能夠更加準(zhǔn)確和相對(duì)特異地評(píng)價(jià)IBD患者的腸道疾病活動(dòng)狀態(tài)。鈣衛(wèi)蛋白(calprotectin)是一種分子量為36kD,與鈣和鋅結(jié)合的具有多功能的復(fù)合蛋白。鈣衛(wèi)蛋白是一種與鈣結(jié)合的蛋白質(zhì)異三聚體,主要由兩條分子量為14kD的重鏈和一條分子量為8kD的輕鏈以共價(jià)鍵形式連接而成,且每條鏈可結(jié)合兩個(gè)Ca2+,此結(jié)構(gòu)特征使其具有耐水解性和耐熱性。鈣衛(wèi)蛋白主要來(lái)源于中性粒細(xì)胞,中性粒細(xì)胞胞質(zhì)蛋白的60%,它占細(xì)胞總蛋白的5%。研究發(fā)現(xiàn)鈣衛(wèi)蛋白可以在血液、尿液、腦脊液、關(guān)節(jié)腔液、糞便及結(jié)腸黏膜組織中被檢測(cè)出,在腸道炎癥性疾病中,鈣衛(wèi)蛋白在糞便中含量最高,是血漿中含量的6倍,且不存在男女性別差異。鈣衛(wèi)蛋白具有抗微生物活性和抗蛋白酶水解特性等,使得糞便鈣衛(wèi)蛋白在常溫下能夠穩(wěn)定保存長(zhǎng)達(dá)1周。Rugiveit等研究發(fā)現(xiàn)在IBD患者的結(jié)腸病變部位的黏膜層和黏膜下層存在大量的中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn),且要明顯高于非炎癥部位的結(jié)腸黏膜。在其他一些感染性和炎癥性疾病中,鈣衛(wèi)蛋白能夠特異性地在炎癥細(xì)胞,如中性粒細(xì)胞和單核-巨噬細(xì)胞等中表達(dá),因此可以通過(guò)測(cè)定血液、糞便及特定組織中鈣衛(wèi)蛋白的含量來(lái)判斷炎癥的存在,并且可以在一定程度上反映炎癥的嚴(yán)重程度。有多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了糞便鈣衛(wèi)蛋白(fecal calprotectin,FCP)能夠較真實(shí)地反映腸道黏膜的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)情況,且FCP與IBD患者臨床疾病活動(dòng)指數(shù)及內(nèi)鏡下疾病嚴(yán)重程度評(píng)分等均具有較好的相關(guān)性,且這種相關(guān)性要優(yōu)于血清CRP和其他血液學(xué)標(biāo)志物。臨床上FCP可以通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)的方法進(jìn)行快速定量的檢測(cè),目前已廣泛應(yīng)用于IBD的日常管理中。新喋呤(neopterin,NP)是人體體液中最重要的一種喋啶類物質(zhì),是體內(nèi)三磷酸烏苷代謝、四氫生物喋呤生物合成過(guò)程中的一種中間代謝產(chǎn)物,主要存在于人體的血液、尿液等體液中。NP是主要由激活的吞噬細(xì)胞產(chǎn)生和釋放的一種低分子嘧啶化合物,主要由活化的T淋巴細(xì)胞分泌的干擾素-γ(Interferon-γ, IFN-γ)刺激單核-巨噬細(xì)胞而產(chǎn)生。多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)并證實(shí)體液中的NP水平升高是反映機(jī)體細(xì)胞免疫異常激活的一個(gè)早期敏感指標(biāo)。研究發(fā)現(xiàn)血液、尿液等體液中的新喋呤在一些免疫系統(tǒng)疾病中會(huì)明顯升高,如移植物抗宿主病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、膿毒敗血癥等疾病。國(guó)外有研究發(fā)現(xiàn)血液和尿液中新喋呤濃度在IBD患者中也會(huì)明顯升高,且活動(dòng)期IBD患者血液和尿液中的新喋呤濃度要顯著高于緩解期IBD患者和健康人群,研究還發(fā)現(xiàn)血液和尿液中的新喋呤濃度與IBD患者臨床疾病活動(dòng)性評(píng)分具有較好相關(guān)性,可以作為評(píng)價(jià)IBD患者臨床疾病活動(dòng)性的一個(gè)生物標(biāo)志物。近年來(lái),國(guó)外有少數(shù)研究也報(bào)道糞便新喋呤(fecal neopterin,FNP)在預(yù)測(cè)IBD患者疾病活動(dòng)性中的價(jià)值,研究發(fā)現(xiàn)FNP也是評(píng)價(jià)IBD臨床疾病活動(dòng)狀態(tài)的一種非侵入性、可靠的生物標(biāo)志物,且FNP在預(yù)測(cè)IBD患者腸道黏膜炎癥活動(dòng)中價(jià)值與FCP相當(dāng),可以較準(zhǔn)確地反映IBD患者的疾病活動(dòng)狀態(tài)。然而關(guān)于FNP在IBD患者中的相關(guān)臨床研究,目前仍然較少,而國(guó)內(nèi)則尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。研究目的探討糞便新喋呤及鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)對(duì)炎癥性腸病臨床疾病活動(dòng)度的判斷價(jià)值,并與常用于評(píng)價(jià)IBD臨床疾病活動(dòng)度的炎癥指標(biāo)血清CRP比較。研究方法共納入2014年5月～2015年2月于南京軍區(qū)南京總醫(yī)院消化內(nèi)科住院并行結(jié)腸鏡檢查的IBD患者151例(UC 67例、CD 84例),其中納入標(biāo)準(zhǔn)為：①經(jīng)臨床表現(xiàn)、內(nèi)鏡和組織病理學(xué)檢查、影像學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查等確診的IBD患者；②性別和年齡相仿的健康體檢人群為對(duì)照組。排除標(biāo)準(zhǔn)：①無(wú)法行全結(jié)腸鏡檢查者；②近1月內(nèi)有服用非甾體類抗炎藥和他汀類藥物者；③近1月內(nèi)患有急性感染性胃腸炎病史者或患有上消化道糜爛/潰瘍病史者；④合并其他免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病者,如結(jié)核、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植物抗宿主病等；⑤尿失禁者；⑥孕婦。所有納入研究者均簽署知情同意書。IBD患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照我國(guó)IBD專家2012年廣州制定的《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)》。CD患者的臨床類型按照蒙特利爾分型,疾病活動(dòng)度評(píng)價(jià)則采用Best CDAI(其中CDAI150分為緩解期,CDAI≥150分為活動(dòng)期,150～220分為輕度活動(dòng)期,221～450分為中度活動(dòng)期,450分為重度活動(dòng)期)；UC患者的病變范圍采用蒙特利爾分類法,疾病活動(dòng)性評(píng)價(jià)則采用改良的Mayo評(píng)分(其中評(píng)分≤2分且無(wú)單個(gè)評(píng)分項(xiàng)1分為臨床緩解期,3～5分為輕度活動(dòng)期,6～10分為中度活動(dòng)期,11～12分為重度活動(dòng)期)。同時(shí)納入了50例結(jié)腸鏡檢查正常的健康體檢者作為對(duì)照組,且于檢查前1天提供2g以上的新鮮糞便標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。所有IBD患者在進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查前1天提供2g以上新鮮糞便標(biāo)本及空腹采取2mL新鮮血液。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)IBD患者及健康對(duì)照組人群的FNP和FCP濃度,同時(shí)檢測(cè)IBD患者的血清CRP濃度。比較各標(biāo)志物在IBD患者與健康對(duì)照組之間有無(wú)差異,各標(biāo)志物在IBD患者各組間有無(wú)差異,各標(biāo)志物與IBD患者臨床疾病活動(dòng)性評(píng)分的相關(guān)性,并繪制各標(biāo)志物診斷IBD臨床疾病活動(dòng)性的操作者受試曲線(receiver operating characteristic curve,ROC),確定曲線下面積(area under curve, AUC)、最佳臨界值、敏感性及特異性等。所有資料均使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料如果滿足正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn)則采用單因素方差分析,并用x±s表示,否則采用非參數(shù)Mann-Whitney U檢驗(yàn)。相關(guān)性分析使用Spearman相關(guān)分析方法。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果IBD患者的FNP、FCP及血清CRP水平均明顯高于健康對(duì)照組人群(P0.05),且處于疾病活動(dòng)期的IBD患者的FNP和FCP水平均顯著高于處于緩解期的IBD患者(P0.001)。在CD患者中,FNP濃度與CD患者臨床疾病活動(dòng)指數(shù)CDAI的相關(guān)系數(shù)為0.55(P0.001),FCP濃度與CD患者臨床疾病活動(dòng)指數(shù)CDAI的相關(guān)系數(shù)為0.59(P0.001)。在UC患者中,FNP濃度與UC患者改良的Mayo評(píng)分的相關(guān)系數(shù)為0.74(P0.001),FCP濃度與UC患者改良的Mayo評(píng)分的相關(guān)系數(shù)分別為0.77(P0.001)。血清CRP水平與CD患者臨床疾病活動(dòng)性評(píng)分的相關(guān)系數(shù)為0.49(P0.001),與UC患者的臨床疾病活動(dòng)性評(píng)分的相關(guān)系數(shù)為0.60(P0.001),且均分別低于FNP及FCP與IBD疾病活動(dòng)性評(píng)分的相關(guān)性。FNP及FCP診斷CD患者的臨床疾病活動(dòng)性的曲線下面積(AUC)分別為0.75和0.80(P0.001),診斷UC患者的臨床疾病活動(dòng)性的曲線下面積分別為0.85和0.90(P0.001),血清CRP診斷CD患者和UC患者的臨床疾病活動(dòng)性的AUC分別為0.65和0.74(P0.001),且均分別低于FNP和FCP。聯(lián)合FNP與FCP時(shí),診斷UC患者臨床疾病活動(dòng)性的曲線下面積為0.92(P0.001),診斷CD患者臨床疾病活動(dòng)性的曲線下面積為0.85(P0.001)。結(jié)論FNP是判斷IBD患者臨床疾病活動(dòng)度一種新的、可靠的、非侵入性的生物標(biāo)志物,其在評(píng)價(jià)IBD患者臨床疾病狀態(tài)中的價(jià)值與FCP相當(dāng),臨床上可以通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)FNP和FCP水平來(lái)綜合評(píng)估IBD患者的臨床疾病活動(dòng)狀態(tài)。
【關(guān)鍵詞】：糞便新喋呤 糞便鈣衛(wèi)蛋白 炎癥性腸病 疾病活動(dòng)度 判斷價(jià)值
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R574.62
【目錄】：

• 摘要3-9
• ABSTRACT9-17
• 前言17-24
• 一、研究對(duì)象與實(shí)驗(yàn)材料24-26
• 二、研究方法26-30
• 三、結(jié)果30-38
• 四、討論38-45
• 五、結(jié)論45-46
• 全文總結(jié)46-48
• 參考文獻(xiàn)48-56
• 綜述56-70
• 參考文獻(xiàn)64-70
• 中英文縮略詞表70-72
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文72-73
• 致謝73-74

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6 本版編輯邋夏洪平 首都醫(yī)科大學(xué)附屬友誼醫(yī)院消化內(nèi)科副主任 李鵬;炎癥性腸病的新療法[N];健康報(bào);2008年

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6 王彥君;細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4基因微衛(wèi)星多態(tài)性與炎癥性腸病相關(guān)性研究[D];吉林大學(xué);2008年

7 吳迎;炎癥性腸病腸組織蛋白表達(dá)差異分析[D];武漢大學(xué);2013年

8 羅涵青;應(yīng)激和應(yīng)對(duì)對(duì)炎癥性腸病的影響及其作用機(jī)制的相關(guān)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

9 劉彬果;炎癥性腸病的免疫學(xué)發(fā)病及免疫調(diào)節(jié)劑治療作用機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 沈冰冰;我國(guó)炎癥性腸病遺傳易感性和血清學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王玲;~(68)Ga枸櫞酸的合成及在炎癥性腸病中的初步臨床應(yīng)用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

2 趙廣西;水通道蛋白3和8在消化系統(tǒng)的表達(dá)及其在炎癥性腸病動(dòng)物模型中的改變[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 譚玲嬋;海南炎癥性腸病單中心臨床資料分析[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

4 秦巖;抗腫瘤壞死因子和免疫抑制劑對(duì)中重度難治性炎癥性腸病療效及安全性的meta分析[D];江蘇大學(xué);2016年

5 石巖;MiR-21對(duì)炎癥性腸病Th17細(xì)胞分化及TNF-α分泌的調(diào)節(jié)作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

6 呂慶康;嗎替麥考酚酯在炎癥性腸病中的作用及對(duì)相關(guān)細(xì)胞因子的影響[D];吉林大學(xué);2016年

7 王婷婷;載脂蛋白M在炎癥性腸病中的測(cè)定及意義[D];蘇州大學(xué);2016年

8 唐文靜;IL-35在炎癥性腸病中的表達(dá)及臨床價(jià)值[D];蘇州大學(xué);2016年

9 包文霞;中國(guó)漢族人群PRKCDBP基因多態(tài)性與炎癥性腸病的相關(guān)性研究[D];蘇州大學(xué);2016年

10 謝朝玲;靜脈和口服補(bǔ)鐵治療炎癥性腸病合并缺鐵性貧血療效及安全性的Meta分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

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