本文關(guān)鍵詞：大鼠Tmub1基因過(guò)表達(dá)慢病毒載體的構(gòu)建

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【摘要】：目的構(gòu)建Tmub1基因的過(guò)表達(dá)慢病毒載體(LV-Tmub1),為研究Tmub1蛋白在肝細(xì)胞增殖過(guò)程中的作用提供實(shí)驗(yàn)材料。方法化學(xué)合成Tmub1基因序列,用BamHI/AgeI酶切化學(xué)合成含有目的基因的質(zhì)粒及GV287載體,PCR產(chǎn)物連接入線性化表達(dá)的載體。PCR鑒定引物,再對(duì)PCR鑒定陽(yáng)性的克隆進(jìn)行DNA測(cè)序和比對(duì)分析。使用構(gòu)建的LV-Tmnb1,轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,熒光法檢測(cè)構(gòu)建的慢病毒滴度。結(jié)果成功構(gòu)建了LV-Tmub1,并獲得相應(yīng)的病毒,病毒滴度為2×10~8 TU/mL。結(jié)論LV-Tmub1為進(jìn)一步研究Tmub1蛋白在肝細(xì)胞增殖中的作用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所肝膽外科;第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室;
【關(guān)鍵詞】： Tmub 基因 過(guò)表達(dá)慢病毒載體 大鼠
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81270523)
【分類號(hào)】：R575.3
【正文快照】： Tmub1(transmemebrance and ubiquitin-like domain con-taining 1)基因編碼的Tmub1蛋白是一個(gè)含有類似泛素結(jié)構(gòu)域的能夠在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)之間穿梭的蛋白質(zhì)[1-3];在細(xì)胞周期的G0期主要位于肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi),在細(xì)胞增殖后期的G2~S期則幾乎全部穿梭進(jìn)入肝細(xì)胞核內(nèi)。Della等[4]發(fā)

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 羅望;張泓;許淼;顧林;孫倍成;;慢病毒——基因轉(zhuǎn)移的潛在新載體[J];江蘇藥學(xué)與臨床研究;2006年06期

2 張?bào)@宇;李金星;孫永奇;趙虹;楊子超;;大鼠海馬腦區(qū)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子慢病毒注射與表達(dá)的檢測(cè)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年07期

3 任振華;王淑艷;張穎;鄒春林;張愚;;慢病毒載體感染成年食蟹猴骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[J];生物工程學(xué)報(bào);2010年06期

4 張麗梅;馮龍;張艷敏;馬晶;趙國(guó)強(qiáng);安玉會(huì);鮑玉洲;;人表皮生長(zhǎng)因子慢病毒載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年04期

5 鄧昭玲;王彥;杜利清;劉強(qiáng);趙輝;陳乃耀;;SIRT1基因shRNA慢病毒載體構(gòu)建及干擾效應(yīng)檢測(cè)[J];中國(guó)組織工程研究;2012年28期

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本文編號(hào)：730810