發(fā)布時間：2017-08-01 14:15

  本文關(guān)鍵詞：AHR對腸上皮源IL-7的調(diào)節(jié)在炎性腸病炎癥緩解中的作用及機制研究

  更多相關(guān)文章： 芳香烴受體 白介7 Ficz 炎性腸病 腸道免疫

【摘要】：背景與目的炎性腸病(Inflammatory bowel disease,IBD)的主要癥狀表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作很難治愈的腹瀉、腹痛、粘液血便。炎性腸病曾被認為是發(fā)達國家專屬的常見疾病,但是隨著中國經(jīng)濟文化水平的穩(wěn)步增長,國內(nèi)炎性腸病的病例數(shù)日益增多,已經(jīng)成為國內(nèi)消化系統(tǒng)常見的疾病。病理上IBD表現(xiàn)為整個腸道免疫系統(tǒng)的失調(diào)并伴隨著慢性頑固但是無菌性的炎癥,但是它的精確發(fā)病機制還不清楚。為了更好的研究IBD,目前已經(jīng)建立了很多動物腸炎模型。其中葡聚糖硫酸鈉(Dextran sulfate sodium,DSS)誘導(dǎo)的腸炎模型是近二十年來最常用的模型,因為它容易構(gòu)建并且和炎性腸病有很相似的臨床表現(xiàn)。異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothio cyanate,Ficz)是芳香烴受體(Aryl hydrocarbon receptor,AHR)的一種配體。AHR作為螺旋-環(huán)-螺旋家族中新發(fā)現(xiàn)的一個亞家族成員,是一種依賴于配體激活的轉(zhuǎn)錄因子,以配體以來的方式進入細胞核,與AHR核轉(zhuǎn)位子形成異源二聚體,特異性結(jié)合于AHR反應(yīng)原件,誘導(dǎo)包括外源性代謝酶在內(nèi)的一系列下游目的基因的表達。越來越多的研究表明AHR可以抑制腸道炎癥。此外,很多研究也表明AHR在維持腸上皮間淋巴細胞(Intra epithelial lymphocyte,IEL)生存中起著關(guān)鍵作用。腸上皮源性白介素7(Interleukin-7,IL-7)在T細胞和B細胞發(fā)育中起著重要作用。在IL-7敲除的小鼠中胸腺細胞和骨髓B細胞數(shù)量明顯減少。最近,研究發(fā)現(xiàn)腸上皮來源的IL-7激活了腸道免疫系統(tǒng)從而導(dǎo)致腸道的慢性炎癥。先前的研究也發(fā)現(xiàn)腸源性IL-7在IEL表型變化中起著重要作用。IEL是調(diào)節(jié)腸道免疫的主要元件之一,它維持腸粘膜屏障的穩(wěn)定性,引發(fā)由于感染的早期炎癥,并且可以調(diào)節(jié)免疫細胞的激活。大多數(shù)IEL都處于部分激活的狀態(tài),激活的IEL可以很快的反應(yīng)各種刺激,所以IEL必須精密的控制才能不會引發(fā)不需要的免疫反應(yīng)。AHR可以抑制腸道炎癥而IL-7可以引發(fā)慢性腸炎,并且它們都對腸道免疫的關(guān)鍵元件iel有重要影響。我們研究ahr被它的配體ficz激動后對腸源性il-7表達的影響,對iel表型的影響以及帶來的腸道炎癥變化。方法1、建立小鼠dss腸炎模型,取腸道標本,免疫熒光,western,rt-pcr檢測ahr,il-7的表達水平變化;流式細胞技術(shù)檢測結(jié)腸iel表型變化。2、利用結(jié)腸lovo細胞用免疫熒光,western,rt-pcr檢測ficz處理后的ahr,il-7表達變化;用rna干擾技術(shù)干擾ahr,同樣方法檢測ficz處理后ahr,il-7的表達變化。3、用ahr激動劑ficz處理小鼠dss腸炎模型,取腸道標本,免疫熒光,western,rt-pcr檢測ahr,il-7的表達水平變化;流式細胞技術(shù)檢測結(jié)腸iel表型變化;用結(jié)腸長度,結(jié)腸he染色,小鼠體重變化,常見炎癥因子檢測小鼠腸道炎癥。主要結(jié)果1.與對照組相比,dss處理組ahr表達明顯下調(diào),而il-7表達明顯上調(diào)。在免疫熒光試驗中,經(jīng)過腹腔注射ficz(1μg/只)5天的處理,小鼠dss誘導(dǎo)的腸炎模型表達更少的ahr但是更多的il-7。western,rt-pcr呈現(xiàn)出同樣的結(jié)果。2.用ficz(0.1μg/ml)處理正常的lovo細胞24h,與對照組相比ficz組表達更多的ahr更少的il-7。但是irna干擾ahr后同樣ficz處理并不能下調(diào)il-7。3.對照組小鼠體重一直在增長,但dss處理組從3~4天開始體重就開始下降,ficz+dss處理組體重同樣在3~4天開始下降,但是下降速率比dss處理組慢很多。對照組,dss組,dss+ficz組相應(yīng)的平均結(jié)腸長度是8cm,5cm,6cm。結(jié)腸he染色結(jié)果顯示,dss組結(jié)腸損傷嚴重,ficz+dss組結(jié)腸損傷程度次之,對照組結(jié)腸無損傷。4.與對照組相比,dss組小鼠結(jié)腸檢測出更多的cd8αβ+iel,cd8+和cd4+iel亞群但是ficz+dss組小鼠結(jié)腸cd8αβ+iel,cd8+和cd4+iel亞群數(shù)量并不多。與對照組相比dss組小鼠結(jié)腸tcrγδ+iel亞群數(shù)量明顯減少,但是ficz+dss組小鼠結(jié)腸tcrγδ+iel亞群數(shù)量明顯增多。5.與對照組相比,dss組cd4和cd8活化程度明顯升高,但是ficz+dss組cd4和cd8活化程度與對照組類似。結(jié)論1.ahr可以下調(diào)腸炎模型和lovo細胞il-7表達水平。2.ahr被ficz激動后可以減輕腸炎模型的炎癥。3.ahr被ficz激動后比較大程度上改變了腸炎模型的iel表型并且減少了腸炎模型IEL CD4,CD8的活化數(shù)量。5.AHR及其激動劑Ficz在腸炎治療中有可能是有益的。
【關(guān)鍵詞】：芳香烴受體 白介7 Ficz 炎性腸病 腸道免疫
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R574
【目錄】：

• 縮略語表5-7
• 英文摘要7-11
• 中文摘要11-14
• 第一章 前言14-16
• 第二章 小鼠腸炎模型AHR和IL-7 表達變化探索16-31
• 2.1 材料與方法16-28
• 2.2 結(jié)果28-29
• 2.3 討論29-31
• 第三章 AHR對IL-7 的作用和機制研究31-48
• 3.1 材料與方法31-45
• 3.2 結(jié)果45-47
• 3.3 討論47-48
• 第四章 AHR在減輕小鼠炎癥中的作用48-62
• 4.1 材料與方法48-59
• 4.2 結(jié)果59-61
• 4.3 討論61-62
• 第五章 AHR對小鼠腸炎模型IEL的作用62-71
• 5.1 材料與方法63-66
• 5.2 結(jié)果66-68
• 5.3 討論（總體）68-71
• 全文結(jié)論71-72
• 參考文獻72-75
• 文獻綜述 1 AHR AND IMMNUNITY75-107
• 參考文獻 193-107
• 文獻綜述 2 IL-7 AND IMMNUNITY107-125
• 參考文獻 2116-125
• 博士研究生期間撰寫和發(fā)表的文章125-126
• 致謝126

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;老年人中的炎性腸病[J];河南醫(yī)學(xué)研究;2008年01期

2 魏曉為;李寧;朱維銘;;腫瘤壞死因子受體與炎性腸病發(fā)病機制研究進展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2009年04期

3 歐陽欽;炎性腸病診斷治療的最新進展[J];中國實用內(nèi)科雜志;2000年01期

4 徐昌青;炎性腸病[J];山東醫(yī)藥;2001年14期

5 羅燕軍;于皆平;;炎性腸病活動性的分子標志物[J];世界華人消化雜志;2001年06期

6 朱尤慶,陳志芬;炎性腸病的非手術(shù)治療[J];腹部外科;2002年03期

7 黎介壽;重視炎性腸病的整體治療[J];中華胃腸外科雜志;2005年02期

8 潘獻柱 ,王林;炎性腸病的治療靶標[J];國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊;2005年02期

9 車晉偉;;多酚類物質(zhì)在治療炎性腸病中的作用[J];中國危重病急救醫(yī)學(xué);2006年10期

10 何庚榮;;肢皮炎性腸病1例[J];中國冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

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1 解元元;朱朝敏;劉作義;;兒童炎性腸病性關(guān)節(jié)炎一例報告附文獻復(fù)習(xí)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

2 李魯;;回盲部惡性腫瘤與炎性腸病的X線鑒別診斷[A];2008年浙江省放射學(xué)年會論文匯編[C];2008年

3 羅涵青;呂紅;譚蓓;戴張晗;錢家鳴;;沙利度胺治療頑固性炎性腸病的療效與副作用[A];2012中國消化系疾病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2012年

4 張軍;李林法;楊君;翁婉文;朱陽軍;劉寧虎;;核素功能顯像在活動性炎性腸病診斷中的價值:前瞻性文獻meta分析[A];首屆浙江省青年核醫(yī)學(xué)與分子影像論壇暨浙江省第十三屆核醫(yī)學(xué)與放射醫(yī)學(xué)防護學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 ;治炎性腸病,吃蟲也許能免疫[N];新華每日電訊;2006年

2 記者 龍軍 通訊員 余希;“民間偏方”變成“規(guī)范治療方法”[N];光明日報;2014年

3 記者 何屹;大麻可用于治療炎性腸病[N];科技日報;2005年

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1 紀濤;AHR對腸上皮源IL-7的調(diào)節(jié)在炎性腸病炎癥緩解中的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李霞;Tim-3對炎性腸病的調(diào)節(jié)作用及機制研究[D];河南大學(xué);2009年

2 王滿元;5-氨基水楊酸類抗炎性腸病衍生物的合成研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2002年

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本文編號：604646