熱休克蛋白B1抑制HBV復(fù)制的研究
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【摘要】:目的探討熱休克蛋白B1(heat shock protein B1,HSPB1)對(duì)乙型肝炎病毒(HBV)復(fù)制的影響。方法采用Western blot檢測(cè)正常肝細(xì)胞系(Hep RG)和HBV穩(wěn)定復(fù)制細(xì)胞系(Hep AD38和Hep G2.2.15)中HSPB1的蛋白水平。在HBV穩(wěn)定復(fù)制細(xì)胞系(Hep AD38和Hep G2.2.15)中轉(zhuǎn)染p CMV6-HSPB1質(zhì)粒及對(duì)照質(zhì)粒,采用Western blot驗(yàn)證HSPB1過表達(dá)水平,實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Southern blot檢測(cè)HSPB1過表達(dá)對(duì)HBV復(fù)制中間體表達(dá)的影響;q RT-PCR檢測(cè)HSPB1過表達(dá)對(duì)HBV3.5 kb m RNA表達(dá)的影響;ELISA檢測(cè)HSPB1過表達(dá)對(duì)HBV s抗原(HBs Ag)和e抗原(HBe Ag)分泌的影響。在肝癌細(xì)胞系Huh-7中共轉(zhuǎn)染p CH9/3091和p CMV6-HSPB1質(zhì)粒,采用Western blot驗(yàn)證HSPB1過表達(dá)水平,實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Southern blot檢測(cè)HSPB1過表達(dá)對(duì)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的HBV復(fù)制中間體表達(dá)的影響。結(jié)果 HSBP1在Hep AD38和Hep G2.2.15中的表達(dá)明顯低于Hep RG。HSPB1在Hep AD38和Hep G2.2.15細(xì)胞中成功過表達(dá),在過表達(dá)HSPB1的Hep AD38和Hep G2.2.15細(xì)胞中HBV復(fù)制中間體水平以及3.5 kb m RNA水平均降低,細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBs Ag和HBe Ag的分泌水平也降低。HSPB1在轉(zhuǎn)染p CH9/3091的Huh-7細(xì)胞中成功過表達(dá),HSPB1過表達(dá)抑制了瞬時(shí)表達(dá)的HBV的復(fù)制水平。結(jié)論 HSPB1可以抑制HBV復(fù)制。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 乙型肝炎病毒 熱休克蛋白B 病毒復(fù)制
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81472271)~~
【分類號(hào)】:R512.62
【正文快照】: 3091-transfected Huh-7 cells,which inhibited the replication of HBV.Conclusion HSPB1 can inhibit HBVreplication.乙型肝炎病毒(HBV)是最常見的肝炎病毒,其所引起的乙型肝炎呈世界性分布,據(jù)估計(jì)全世界有3.5億人為慢性HBV感染者[1],每年約有100萬人死于因HBV感染所導(dǎo)致
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,本文編號(hào):595206
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