本文關(guān)鍵詞：肝纖維化大鼠血液微環(huán)境對人臍帶MSCs向肝細(xì)胞分化的影響及機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 肝纖維化 人臍帶MSCs 細(xì)胞分化 血清 大鼠

【摘要】：目的探討肝纖維化大鼠血液微環(huán)境對人臍帶MSCs(human umbilical cord MSCs,HUCMSCs)向肝細(xì)胞分化的影響及作用機(jī)制。方法取成年清潔級雄性SD大鼠18只,體質(zhì)量(200±20)g;其中12只采用腹腔注射硫代乙酰胺方法制備肝纖維化模型,組織學(xué)觀察確定模型制備成功后取大鼠全血分離血清;剩余6只正常大鼠同法分離血清。ELISA法檢測血清中EGF、b FGF、肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)、抑瘤素(oncostatin M,OSM)含量。取第3代HUCMSCs分組培養(yǎng)7 d,其中肝纖維化血清組(A組)、正常血清組(B組)分別以含5 m L/L肝纖維化大鼠血清、正常大鼠血清的DMEM/F12培養(yǎng)基(含10%FBS)培養(yǎng);對照組(C組)以DMEM/F12培養(yǎng)基(含10%FBS)培養(yǎng)。培養(yǎng)期間采用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化;7 d后取各組細(xì)胞行免疫熒光檢測肝細(xì)胞表面標(biāo)志物甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、細(xì)胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)表達(dá),Western blot檢測肝細(xì)胞功能蛋白白蛋白(albumin,ALB)、色氨酸2,3-雙加氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase,TPH2)、CYP3A4及MAPK/ERK信號通路蛋白(P-ERK)表達(dá),二乙酰肟法測定細(xì)胞上清液中尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)含量。結(jié)果組織學(xué)觀察示大鼠肝組織符合纖維化改變,模型制備成功。正常大鼠血清中EGF、OSM含量均高于纖維化大鼠,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=14.989,P=0.000;t=37.172,P=0.000);肝纖維化大鼠血清中HGF含量為(1.03±0.12)ng/m L,正常大鼠血清中未檢出;兩種血清中均未檢出b FGF。誘導(dǎo)培養(yǎng)后,倒置顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)均未見明顯變化且組間無明顯差異。培養(yǎng)7 d時,A組細(xì)胞可見AFP、CK18綠色熒光,B、C組染色均為陰性。Western blot檢測示A組細(xì)胞可表達(dá)肝細(xì)胞功能蛋白ALB、TPH2及CYP3A4,B、C組均未見上述蛋白表達(dá)。各組細(xì)胞均可表達(dá)P-ERK,其中A組P-ERK蛋白相對表達(dá)量顯著高于B、C組(P0.05);B、C組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。A組細(xì)胞上清液中BUN含量亦顯著高于B、C組(P0.05),B、C組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論在肝纖維化條件下,大鼠血液中的HGF水平升高、EGF、OSM水平降低,形成的血液微環(huán)境會激活HUCMSCs的MAPK/ERK信號通路,使其向肝細(xì)胞分化。
【作者單位】： 解放軍醫(yī)學(xué)院;解放軍白求恩國際和平醫(yī)院藥劑科;
【關(guān)鍵詞】： 肝纖維化 人臍帶MSCs 細(xì)胞分化 血清 大鼠
【基金】：軍隊“十二五”重點(diǎn)課題資助項目(BWS11J002)~~
【分類號】：R575.2
【正文快照】： 目前,肝纖維化發(fā)病率和死亡率較高,已成為重要公共衛(wèi)生問題,藥物治療效果不佳[1-2]。近年來以干細(xì)胞技術(shù)為代表的再生醫(yī)學(xué),為肝纖維化的治療提供了新選擇[3-4]。人臍帶MSCs(human umbilicalcord MSCs,HUCMSCs)無倫理道德爭議,是具有應(yīng)用前景的組織工程種子細(xì)胞。研究顯示,HUCM

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李俠;田小朋;黃歡;李維祖;尹艷艷;;地頂胞霉菌絲體對免疫性肝纖維化大鼠的保護(hù)作用[J];安徽醫(yī)藥;2012年02期

2 余小虎,朱金水,朱祖明,俞華芳;肝纖維化大鼠免疫性細(xì)胞因子表達(dá)水平的變化[J];免疫學(xué)雜志;2005年03期

3 李驄;雷鴻雁;姜妙娜;張彩華;賈玉杰;;肝纖維化大鼠肝組織Raf/ERK信號通路的變化及肝復(fù)康的干預(yù)作用[J];實用肝臟病雜志;2012年02期

4 曾維政,熊碧君,李明秀,吳曉玲,鄧桂英,蔣明德,陳曉斌;肝纖維化大鼠血清纖維化酶譜的變化及意義探討[J];華西醫(yī)學(xué);2002年02期

5 李青;馬玉霞;劉殿武;劉輝;何海艷;;維生素對免疫性肝纖維化大鼠的抗纖維化作用[J];中國公共衛(wèi)生;2006年09期

6 李俠;尹艷艷;;地頂孢霉菌絲體對豬血清誘導(dǎo)的免疫性肝纖維化大鼠的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2012年12期

7 周健;田德英;張振綱;;激動素對肝纖維化大鼠肝臟膠原變化的作用研究[J];內(nèi)科急危重癥雜志;2006年05期

8 楊長青,胡國齡,周文紅,譚德明,張錚;秋水仙堿對肝纖維化大鼠肝臟基質(zhì)金屬蛋白酶-1及其抑制因子-1表達(dá)的影響[J];中華傳染病雜志;2000年03期

9 李青,張麗梅,劉殿武,賀宇彤,肖永紅,何海艷;肝再生增強(qiáng)因子重組質(zhì)粒對肝纖維化大鼠的實驗治療作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年08期

10 王蓬波;羅琳;張洪;周愛玲;;山莨菪堿對肝纖維化大鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β_1及受體表達(dá)的影響[J];南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾維政;吳曉玲;蔣明德;秦建平;徐輝;;肝纖維化大鼠肝組織Smads基因表達(dá)狀況及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會第12次全國內(nèi)科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

2 郭燕;高嘯;張芳杰;晏維;唐望先;;肝纖維化大鼠肝組織中中樞神經(jīng)遞質(zhì)水平變化[A];第五屆全國肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

3 吳曉玲;曾維政;蔣明德;鄭淑梅;秦建平;徐輝;張勇;;肝纖維化大鼠肝組織Smads基因表達(dá)狀況及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

4 楊壯智;陽韜;陳永平;林鐲;;SnoN蛋白在肝纖維化大鼠肝組織中的表達(dá)及其意義[A];第四屆中國醫(yī)師協(xié)會感染科醫(yī)師大會暨傳染病診治高峰論壇、浙江省醫(yī)學(xué)會肝病、感染病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2011年

5 田力;趙國強(qiáng);李繼昌;陳奎生;蔡慶春;;基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1 siRNA病毒表達(dá)載體對肝纖維化大鼠血清及肝形態(tài)學(xué)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

6 曹友德;范莎莎;聶盛丹;石奰中;袁友紅;;肝纖維化大鼠血清體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第九次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

7 謝建萍;譚德明;汪玲;周建亮;劉菲;黃柳云;;雌二醇納米粒對免疫性肝纖維化大鼠肝臟的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會全國第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

8 何文艷;劉樹賢;姜慧卿;;肝纖維化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)類肝細(xì)胞的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

9 黃月紅;陳運(yùn)新;鄭偉達(dá);陳治新;王小眾;;外源性IL-10干預(yù)對肝纖維化大鼠致纖維化細(xì)胞因子表達(dá)的影響[A];全國臨床免疫檢驗研討會暨第六屆全國臨床免疫學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

10 何文艷;劉靜;劉樹賢;;肝纖維化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)類肝細(xì)胞的實驗研究[A];第一屆全國疑難重型肝病大會、第四屆全國人工肝及血液凈化學(xué)術(shù)年會論文集[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉永平邋岳麗穎;第四軍醫(yī)大學(xué)肝纖維化研究取得重大突破[N];中國醫(yī)藥報;2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張傳峰;H_2S在PI3K/Akt信號通路中對肝纖維化大鼠肝組織中Bad和GSK-3β蛋白表達(dá)的影響[D];石河子大學(xué);2015年

2 鄭娜娜;硫化氫在p38MAPK通路中對肝細(xì)胞增殖/凋亡的影響[D];石河子大學(xué);2015年

3 李俠;地頂孢霉菌絲體對豬血清誘導(dǎo)的免疫性肝纖維化大鼠的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

4 劉冉;骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞移植在肝纖維化大鼠肝內(nèi)的示蹤研究[D];河南大學(xué);2012年

5 王昶;胰島素樣生長因子-1在肝纖維化大鼠中的表達(dá)及中藥的干預(yù)作用[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊雅閣;復(fù)合營養(yǎng)素對CCl_4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠血生長激素、胰島素樣生長因子-1表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2014年

7 李敏;雞尾酒療法作用肝纖維化大鼠的肝組織定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

8 黃大健;TGF-β1和OPN在肝纖維化大鼠肝組織的表達(dá)及荔枝核總黃酮的干預(yù)[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2014年

9 盧順玉;老鼠|生物堿A及其衍生物對肝纖維化大鼠COX-2和NF-κB的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

10 王孝彬;紅景天聯(lián)合沙棘防治肝纖維化大鼠的實驗研究[D];青海大學(xué);2015年

，

本文編號：591961