本文關(guān)鍵詞：PNPLA3基因多態(tài)性與乙型肝炎病毒相關(guān)性肝細胞癌的相關(guān)性及其機制研究

  更多相關(guān)文章： PNPLA3 基因多態(tài)性 肝細胞癌 Hep G2.2.15

【摘要】：肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)個體之間發(fā)病率及疾病進程的不同,提示遺傳因素在HCC發(fā)生發(fā)展過程中至關(guān)重要。目前有研究證實PNPLA3rs738409[G](編碼:I148M)位點多態(tài)性和許多疾病所致的HCC相關(guān)聯(lián),但是PNPLA3 I148M基因多態(tài)性是否是導致HCC的獨立因素,如何引起肝臟損傷的機理目前仍不明確。本課題通過人群水平、細胞水平及分子水平系統(tǒng)地探討了PNPLA3 rs738409多態(tài)性位點對HCC的作用及可能的作用機制,以期驗證PNPLA3 rs738409多態(tài)性位點與青島漢族人群中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相關(guān)HCC的相關(guān)性,進而闡明此多態(tài)性及相關(guān)的遺傳因素對HBV相關(guān)性HCC患者的影響。首先,本文在人群水平研究了青島地區(qū)漢族人群中PNPLA3 I148M基因多態(tài)性與HBV相關(guān)性HCC的相關(guān)性。臨床收集了230例HBV相關(guān)性HCC患者及219例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者的血液樣本并進行PNPLA3基因型檢測及相關(guān)分析,同時選取254例健康人群作為對照組,同時進行相關(guān)檢測。結(jié)果提示,PNPLA3 rs738409 G等位基因的頻率分布在HCC組為24.3%,CHB組為12.8%,健康對照組為7.17%,各組間比較時均有明顯差異(P0.05)。非條件Logistic回歸分析顯示,與攜帶CC基因的人群相比,攜帶G基因的人群發(fā)生HCC的比值比(OR)是3.974(95%CI:2.712-5.824,P=0.000),發(fā)生CHB的OR為1.700(95%CI:1.179-2.451,P=0.004)。調(diào)整性別、年齡因素后,發(fā)生HCC的OR為4.099(95%CI:2.783-6.036,P=0.000),發(fā)生CHB的OR為1.709(95%CI:1.182-2.471,P=0.004)。HCC組中,血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、總膽固醇、總膽汁酸水平在突變型基因組高于野生型CC基因組(P0.05)。CHB組中,血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、總膽固醇、總膽汁酸水平在突變型基因組高于野生型CC基因組(P0.05)。上述的結(jié)果提示,青島的漢族人群中,PNPLA3 rs738409[G]I148M基因多態(tài)性與HCC及CHB的發(fā)生發(fā)展相關(guān),與肝臟損傷相關(guān)。其次,本文通過體外實驗,在細胞和分子水平對PNPLA3 I148M的作用機制進行探討。在成功構(gòu)建PNPLA3野生型及I148M突變型慢病毒過表達載體后分別轉(zhuǎn)染肝癌細胞株Hep G2.2.15,對HBV DNA表達量、促炎因子IL-8及抑癌基因p53在m RNA及蛋白水平的表達差異分別進行檢測。研究結(jié)果顯示PNPLA3蛋白在野生型及突變型中都表現(xiàn)為過表達。PNPLA3 I148M突變組HBV DNA病毒載量及IL-8表達高于對照組及野生型組,但無統(tǒng)計學差異(P0.05),提示PNPLA3I148M對HBV病毒載量和IL-8表達無顯著性影響。然而p53的表達在m RNA及蛋白水平均顯著升高。研究結(jié)果提示,PNPLA3 I148M基因多態(tài)性可通過調(diào)節(jié)抑癌基因p53的表達對肝癌細胞產(chǎn)生影響。更為深入的作用機制則需要進一步的研究探討,從而為日后開展HBV防治的個體化精準醫(yī)療提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)支持。
【關(guān)鍵詞】：PNPLA3 基因多態(tài)性 肝細胞癌 Hep G2.2.15
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7;R512.62
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-8
• 第一章 PNPLA3 I148M基因多態(tài)性與乙型肝炎病毒相關(guān)性肝細胞癌的相關(guān)性研究8-40
• 引言8-10
• 第一節(jié) 試驗資料和方法10-20
• 1.1 受試者10-13
• 1.2 設(shè)備和儀器13-14
• 1.3 分子生物學相關(guān)試劑14
• 1.4 試驗步驟14-17
• 1.5 統(tǒng)計分析17-19
• 1.6 試驗的路線圖19-20
• 第二節(jié) 結(jié)果20-30
• 2.1 一般特征比較20
• 2.2 各項生化指標的比較20-22
• 2.3 肝細胞癌及慢性乙型肝炎與PNPLA3 I148M基因多態(tài)性的相關(guān)性分析22-30
• 第三節(jié) 討論30-35
• 3.1 全基因組關(guān)聯(lián)分析與肝細胞癌的發(fā)病機制30-32
• 3.2 肝細胞癌與PNPLA3 I148M基因多態(tài)性的關(guān)系32-34
• 3.3 目前存在的問題與未來的展望34-35
• 第四節(jié) 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-40
• 第二章 PNPLA3 I148M基因多態(tài)性在體外培養(yǎng)肝細胞中的作用研究40-69
• 引言40-41
• 第一節(jié) 實驗資料41-45
• 1.1 質(zhì)粒、菌株、細胞和主要試劑41-42
• 1.2 實驗儀器與設(shè)備42-43
• 1.3 試劑的配制43-45
• 第二節(jié) 方法45-54
• 2.1 人肝癌細胞株Hep G2.2.15的培養(yǎng)45-46
• 2.2 慢病毒載體構(gòu)建46-49
• 2.3 慢病毒包裝49-50
• 2.4 慢病毒感染Hep G2.2.15細胞50
• 2.5 檢測細胞上清液中HBV的量50-51
• 2.6 RT-PCR檢測PNPLA3、炎癥因子、凋亡因子的mRNA量51-52
• 2.7 Western blot檢測PNPLA3蛋白、炎癥因子、凋亡因子過表達52-54
• 第三節(jié) 結(jié)果54-63
• 第四節(jié) 討論63-65
• 第五節(jié) 結(jié)論65-66
• 參考文獻66-69
• 結(jié)論69-70
• 文獻綜述70-98
• 1 PNPLA3概述71-72
• 2 PNPLA3功能鑒定及結(jié)構(gòu)特征72-73
• 3 PNPLA3的生物學特征73-76
• 4 PNPLA3與肝臟損傷及肝纖維化76-79
• 5 PNPLA3與肝細胞癌79-84
• 6 PNPLA3 I148M基因多態(tài)性的作用與種族及性別的關(guān)系84-85
• 7 PNPLA3的分子研究85-86
• 8 總結(jié)86-87
• 參考文獻87-98
• 攻讀學位期間的研究成果98-99
• 致謝99-100

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;早期發(fā)現(xiàn)肝細胞癌可增加治療機會[J];河南醫(yī)學研究;2000年02期

2 Schafer DF,潘朝法,李蘇云;肝細胞癌[J];第四軍醫(yī)大學吉林軍醫(yī)學院學報;2000年01期

3 中沼安二,林淑蘭,姚楨;有關(guān)小肝細胞癌病理學的最新認識[J];日本醫(yī)學介紹;2000年05期

4 靜雨;;美國肝細胞癌發(fā)病率增高[J];國外醫(yī)學情報;2000年01期

5 張玉勛;;肝細胞癌的非手術(shù)治療[J];國外醫(yī)學情報;2000年05期

6 徐宏勇,李開宗,付由池,竇科峰,李景夢,何揚舉;bcl-x,bax基因表達與肝細胞癌臨床病理特征的關(guān)系[J];第四軍醫(yī)大學學報;2001年14期

7 蔡端;多中心源肝細胞癌的特征:與肝內(nèi)轉(zhuǎn)移的比較[J];國外醫(yī)學.外科學分冊;2002年02期

8 張春平;與白介素-18水平升高有關(guān)的肝細胞癌自發(fā)性消退[J];國外醫(yī)學(內(nèi)科學分冊);2003年03期

9 薛海鷗,岳莉;兒童肝細胞癌1例報告[J];錦州醫(yī)學院學報;2003年04期

10 德力,白志剛,牧榮,賴玉書,金燦浩,夏醫(yī)君;血管內(nèi)皮細胞生長因子在肝細胞癌中的表達和預(yù)后的關(guān)系[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學雜志;2003年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 卞讀軍;;肝細胞癌經(jīng)導管動脈化療栓塞前后磁共振波譜研究[A];2009中華醫(yī)學會影像技術(shù)分會第十七次全國學術(shù)大會論文集[C];2009年

2 賈建偉;趙潔;;肝細胞癌領(lǐng)域研究現(xiàn)狀與進展[A];中醫(yī)藥防治感染病之研究（九）——第九次全國中醫(yī)藥防治感染病學術(shù)交流大會論文集[C];2009年

3 陳孝平;;肝細胞癌外科治療進展[A];湖北省第21屆腫瘤學術(shù)大會論文匯編[C];2011年

4 張杰;劉軍建;韓云;張寧;芮靜安;金城;周柔麗;;用熒光差異顯示法篩選肝細胞癌相關(guān)新基因[A];2000全國腫瘤學術(shù)大會論文集[C];2000年

5 馮仕庭;李子平;譚國勝;孫燦輝;彭振鵬;;中晚期肝細胞癌的多層螺旋CT血管造影表現(xiàn)及臨床應(yīng)用[A];中華醫(yī)學會第十三屆全國放射學大會論文匯編（下冊）[C];2006年

6 張法標;方哲平;王義;董輝;叢文銘;;上皮鈣粘素和β-連接素在兒童肝細胞癌中的表達及其臨床意義[A];2007年浙江省外科學學術(shù)會議論文匯編[C];2007年

7 陳鐘杰;;螺旋CT診斷原發(fā)型肝細胞癌28例[A];2008年浙江省放射學年會論文匯編[C];2008年

8 賈克東;;肝細胞癌的診斷進展及治療現(xiàn)狀[A];全國中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展講習班、江西省第二次中西醫(yī)結(jié)合肝病學術(shù)會議資料匯編[C];2010年

9 李秋萍;龍順欽;楊小兵;鄧宏;蔡姣芝;潘宗奇;河文峰;周宇姝;歐陽育樹;廖桂雅;吳萬垠;;癌服靈治療晚期肝細胞癌的臨床研究[A];2012·中國醫(yī)師協(xié)會中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師大會第三次會議論文集[C];2012年

10 朱明華;祝峙;劉曉紅;林靜;曲建慧;陳穎;曹曉哲;王力;倪燦榮;;乙型肝炎病毒感染與肝細胞癌發(fā)生關(guān)系的分子病理學研究[A];中華醫(yī)學會病理學分會2009年學術(shù)年會論文匯編[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 中國抗癌協(xié)會臨床腫瘤學協(xié)作專業(yè)委員會主任委員 秦叔逵;治療肝細胞癌 別只盯著靶向藥[N];健康報;2013年

2 記者 王丹 管九蘋;肝細胞癌標志物研究獲新進展[N];健康報;2013年

3 吳一福;四軍醫(yī)大唐都醫(yī)院發(fā)現(xiàn)硒蛋白P與肝細胞癌發(fā)生有關(guān)[N];中國醫(yī)藥報;2007年

4 黎彬;肝癌研究重要進展——預(yù)測肝癌轉(zhuǎn)移成為可能[N];中國醫(yī)藥報;2004年

5 錢文彩;α2δ1陽性細胞為新的肝細胞癌干細胞[N];中國醫(yī)藥報;2013年

6 新美;基礎(chǔ)研究進展推動肝臟病學進步[N];中國醫(yī)藥報;2008年

7 周金蓮;MIB-1和bcl-2表達預(yù)測肝癌發(fā)生[N];中國醫(yī)藥報;2004年

8 張金山;要靈活運用影像學提供的方法和手段[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導報;2001年

9 李杰;不能手術(shù)切除肝細胞癌的治療[N];科技日報;2006年

10 ;修復(fù)肝細胞 改善肝功能[N];人民日報海外版;2006年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 白蘭;乙肝病毒捕獲細胞因子和信號級聯(lián)以逃避宿主免疫并維持持續(xù)感染[D];武漢大學;2014年

2 何洪衛(wèi);肝細胞癌內(nèi)γδT細胞浸潤減少及功能缺陷的機制研究[D];復(fù)旦大學;2014年

3 蔡曉燕;淋巴細胞在肝細胞癌和癌旁組織中的差異性表達研究[D];復(fù)旦大學;2014年

4 向?qū)?細胞周期因子FoxM1促進肝臟再殖的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

5 康富標;共刺激分子B7-H3在肝細胞癌的表達及相關(guān)機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

6 楊純;Gankyrin正反饋調(diào)控Nrf2在肝細胞癌中發(fā)揮抗氧化作用[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

7 陳媛媛;BTG2與肝細胞癌放療敏感性的相關(guān)研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

8 高霞;PNPLA3基因單核苷酸多態(tài)性及基因表達與乙肝病毒感染易感性及乙肝相關(guān)肝細胞癌的關(guān)聯(lián)性研究[D];河北醫(yī)科大學;2016年

9 彭晨星;microRNA結(jié)合位點單核苷酸多態(tài)性對肝細胞癌預(yù)后影響的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學;2016年

10 田偉;γδT細胞免疫治療肝細胞癌的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學;2016年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王飛;CDH17調(diào)控肝細胞癌的生物學機制的研究[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 陳中博;咖啡攝入與肝細胞癌發(fā)病風險的Meta分析[D];河北醫(yī)科大學;2015年

3 張華鵬;核受體輔激活蛋白5在肝細胞癌組織中的表達及其臨床意義[D];鄭州大學;2015年

4 郭慧敏;血清sCD25測定在肝細胞癌診斷中的意義[D];鄭州大學;2015年

5 凌青霞;雙氧化酶1（Duox1）在肝細胞癌中的表達調(diào)控及作用研究[D];復(fù)旦大學;2014年

6 李會芬;血清Talin-1在肝細胞癌診斷中的作用[D];鄭州大學;2015年

7 蒙錦瑩;血管生長相關(guān)因子的血清濃度與肝細胞癌預(yù)后的相關(guān)性研究[D];蘭州大學;2015年

8 戰(zhàn)勇;肝細胞癌術(shù)前造影參數(shù)與生物學表現(xiàn)相關(guān)性及術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)因素討論[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

9 姚樂;microRNA-32在肝細胞癌中的表達及其臨床預(yù)后意義[D];河北醫(yī)科大學;2015年

10 吳華;MACC1在肝細胞癌中的表達與臨床意義[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

，

本文編號：590784