氧化苦參堿改善棕櫚酸誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂質(zhì)沉積及氧化應(yīng)激的研究
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【摘要】:目的:觀察氧化苦參堿對(duì)高脂誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂質(zhì)沉積的干預(yù)作用及其機(jī)制。方法:高脂干預(yù)法培養(yǎng)HepG2細(xì)胞建立非酒精性脂肪性肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)體外細(xì)胞模型。造模成功后隨機(jī)分為高脂組(Pa組)、氧化苦參堿組(Omt組)和二甲雙胍組(Met組),同時(shí)設(shè)立正常培養(yǎng)基對(duì)照組(N組)。藥物干預(yù)48 h后收集細(xì)胞,利用相應(yīng)試劑盒及2,7-二氯氫化熒光素二乙酸酯(2,7-dichlorofuorescin diacetate,DCFH-DA)熒光探針評(píng)估各組細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)沉積水平和氧化應(yīng)激狀態(tài);通過(guò)PCR和Western blot分別檢測(cè)參與脂代謝關(guān)鍵分子的基因和蛋白表達(dá)。結(jié)果:與Pa組相比,氧化苦參堿及二甲雙胍干預(yù)后可顯著降低細(xì)胞內(nèi)甘油三酯(triglyceride,TG)含量(POmt=0.023,PMet=0.043),上調(diào)肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶-1(carnitine palmitoyl transferase-1,CPT-1)的m RNA表達(dá)(POmt=0.000,PMet=0.000),下調(diào)脂肪酸轉(zhuǎn)位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)的m RNA(POmt=0.000,PMet=0.000)及蛋白表達(dá)水平(POmt=0.000,PMet=0.000);DCFH-DA熒光染色、總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的測(cè)定結(jié)果顯示藥物干預(yù)可顯著增強(qiáng)T-SOD(POmt=0.007,PMet=0.007)及GSH-Px(POmt=0.183,PMet=0.020)的活性,減少活性氧(reactive oxygen species,ROS)和MDA(POmt=0.016,PMet=0.001)的生成。結(jié)論:氧化苦參堿可改善高脂誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積,可能是通過(guò)改善脂代謝及細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激狀態(tài)實(shí)現(xiàn)的。
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院;河北省老年醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;河北省人民醫(yī)院內(nèi)分泌科;
【關(guān)鍵詞】: 非酒精性脂肪性肝病 氧化苦參堿 氧化應(yīng)激 Hep G細(xì)胞 脂代謝
【基金】:國(guó)家自然基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81370900)
【分類號(hào)】:R575
【正文快照】: to palmitic acid for 24 h,while the lipid accumulation ame-liorated obviously after oxymatrine and metformin administra-tion(POmt=0.023,PMet=0.043).Compared with Pa group,oxyma-trine and met formin administration increased the m RNA ex-pression of carnit
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,本文編號(hào):579096
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