2012-2013年華山醫(yī)院抗生素相關(guān)性腹瀉患者中艱難梭菌感染的分子流行病學調(diào)查

發(fā)布時間：2017-06-21 09:11

本文關(guān)鍵詞：2012-2013年華山醫(yī)院抗生素相關(guān)性腹瀉患者中艱難梭菌感染的分子流行病學調(diào)查，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：抗生素相關(guān)性腹瀉(antibiotic-associated diarrhoea, AAD)是指應用抗生素之后出現(xiàn)且沒有其他原因可以解釋的腹瀉�？股叵嚓P(guān)性腹瀉可以表現(xiàn)為輕度、自限性的腹瀉,也可以表現(xiàn)為嚴重危及生命的腹瀉如假膜性腸炎(pseudomembranous colitis, PMC)�？股叵嚓P(guān)性腹瀉的發(fā)病大多與應用抗生素治療后腸道菌群失調(diào)有關(guān),其發(fā)生率國外文獻報道約為1.8%—6.9%,國內(nèi)報道約為6.7%—9.3%。艱難梭菌(Clostridium difficile)是抗生素相關(guān)性腹瀉中最為重要的感染性病原。自2002年起艱難梭菌所致各類腹瀉在北美和歐洲的發(fā)病率和病死率迅速上升,統(tǒng)稱為艱難梭菌感染(C. difficile infection, CDI)。國外研究者報道艱難梭菌感染約占所有抗生素相關(guān)性腹瀉的20%—30%。除此之外,90%以上的假膜性腸炎由艱難梭菌所致。迄今為止國內(nèi)對艱難梭菌在抗生素相關(guān)性腹瀉中作用的研究仍較少見。因此本課題于2012年8月至2013年7月對復旦大學附屬華山醫(yī)院抗生素相關(guān)性腹瀉病人中的艱難梭菌感染進行前瞻性調(diào)查,為今后制定中國的艱難梭菌感染指南提供依據(jù)。第一部分抗生素相關(guān)性腹瀉患者中艱難梭菌感染的臨床特征研究對2012年8月—2013年7月復旦大學附屬華山醫(yī)院診斷為抗生素相關(guān)性腹瀉住院患者的糞便進行產(chǎn)毒素艱難梭菌的檢測,分析艱難梭菌感染的臨床特征。入選標準：1.研究期間在華山醫(yī)院住院的患者；2.年齡大于18歲,急性腹瀉(Bristol分級為5-7級)；3.腹瀉前4周接受過抗生素治療；4.無法用其他原因解釋的急性腹瀉。排除標準：1.慢性腹瀉患者；2.腹瀉前3天內(nèi)服用過瀉藥�？股叵嚓P(guān)性腹瀉定義為應用抗生素之后出現(xiàn)且沒有其他原因可以解釋的腹瀉。艱難梭菌感染的診斷標準為臨床有腹瀉癥狀,伴實驗室檢測到產(chǎn)毒素的艱難梭菌菌株或者腸鏡診斷為假膜性腸炎。收集所有艱難梭菌或非艱難梭菌所致的抗生素相關(guān)性腹瀉患者的臨床資料,包括基本信息(年齡、性別、病房、社區(qū)獲得性或醫(yī)院獲得性、基礎(chǔ)疾病等)；可能的危險因素(腹瀉前4周使用抗生素、化療藥,放置鼻胃管,手術(shù)等),實驗室檢查(白蛋白、白細胞等),臨床過程(嚴重程度、診斷、治療經(jīng)過、愈后情況等)。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件統(tǒng)計分析。研究期間共206例患者診斷為AAD,其中63例(30.6%)確診為CDI,143例為其他原因引起的抗生素相關(guān)性腹瀉(其他原因AAD)。重癥監(jiān)護室AAD的發(fā)生率最高(10.7%,56/525),而老年科CDI在AAD中所占比例最高(35.7%,11/29)。CDI和其他原因AAD患者平均年齡相仿,分別為66±17歲和62±20歲,均以男性多見。糖尿病和腫瘤是最常見的基礎(chǔ)疾病。住院時間,使用免疫抑制劑、質(zhì)子泵抑制劑,鼻飼管和機械通氣,胃腸道手術(shù)史在兩組患者之間無顯著差異。但是CDI組腹瀉前應用碳青霉烯類抗生素的患者比例顯著高于其他原因AAD組,分別為42.9%和28.0%(p=0.036),多因素logistic回歸分析亦證實使用碳青霉烯類會增加CDI的風險(RR,2.31；95% CI,1.22-4.38)。兩組患者發(fā)熱、腹痛、血白細胞數(shù)、糞便常規(guī)等臨床表現(xiàn)和實驗室檢查結(jié)果均無明顯差異。絕大多數(shù)腹瀉為輕至中度,僅一例患者診斷為假膜性腸炎。分別有36.5%(23/63)的CDI患者和5.6%(8/143)其他原因AAD患者接受了甲硝唑或萬古霉素治療。CDI或其他原因所致AAD的患者治愈率均約90%,僅CDI組有2名患者出現(xiàn)復發(fā)。上述結(jié)果顯示艱難梭菌是抗生素相關(guān)性腹瀉的主要病原,占30.6%。艱難梭菌感染和其他原因所致抗生素相關(guān)性腹瀉相比,僅碳青酶烯類的應用是艱難梭菌感染的獨立危險因素,臨床表現(xiàn)和實驗室檢查結(jié)果無顯著差異。僅36.5%的艱難梭菌患者接受了甲硝唑/萬古霉素治療。因此,國內(nèi)應重視艱難梭菌的檢測,嚴重急性腹瀉病人,特別是近3個月內(nèi)曾經(jīng)接受過抗菌藥物治療者,應送檢糞便標本。臨床微生物室應開展艱難梭菌毒素的檢測,以便于臨床醫(yī)生早診早治。第二部分艱難梭菌臨床分離株的核糖體分型、毒素以及對常用抗菌藥物的耐藥性研究連續(xù)收集2012年8月—2013年7月復旦大學附屬華山醫(yī)院抗生素相關(guān)性腹瀉患者糞便中分離的艱難梭菌臨床菌株。PCR法檢測毒素基因tcdA,tcdB,cdtA和cdtB,細胞毒中和試驗對毒素B加以確證。PCR核糖體分型法對所有產(chǎn)毒株進行分子分型。瓊脂稀釋法測定甲硝唑等10種抗菌藥物對產(chǎn)毒艱難梭菌分離株的最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration, MIC) 。研究期間共獲得64株艱難梭菌產(chǎn)毒株,其中同時產(chǎn)A毒素和B毒素的菌株以及只產(chǎn)B毒素的菌株分別占67.2%和32.8%,未檢測到二元毒素。共檢測到18個核糖體型,以H型最多見(18.8%),其次是012和017型(14.1%,12.5%)。未檢測到027型菌株。所有艱難梭菌臨床分離產(chǎn)毒株對甲硝嘩和萬古霉素均呈敏感,但分別有73.4%、84.4%、48.4%、42.2%、47.4%、35.9%、7.8%與6.2%的菌株對紅霉素、克林霉素、四環(huán)素、莫西沙星、左氧氟沙星、夫西地酸、利福平和亞胺培南呈耐藥。對氟喹諾酮類、紅霉素和克林霉素呈多重耐藥的菌株占32.8%。核酸型H型所有菌株和62.5%(5/8)的017型菌株為多重耐藥株。上述結(jié)果顯示艱難梭菌臨床分離產(chǎn)毒株中,毒素型別以A+B+為主；核糖體分型以H型、012型、017型最常見；艱難梭菌體外對甲硝唑和萬古霉素仍高度呈敏感,但對克林霉素等多種抗菌藥物耐藥率高,約1/3的菌株為多重耐藥株。綜上所述,本課題研究結(jié)果顯示：1.艱難梭菌是抗生素相關(guān)性腹瀉的主要病原,占30.6%；2.艱難梭菌感染與其他原因引起的抗生素相關(guān)性腹瀉在臨床癥狀及實驗室常規(guī)檢查上并無明顯差異；應用碳青霉烯類藥物是艱難梭菌感染的獨立危險因素；3.艱難梭菌臨床分離產(chǎn)毒株仍以毒素A+B+為主,以核糖體型H為多見。上述菌株對甲硝唑和萬古霉素呈敏感,但對紅霉素、克林霉素和氟喹諾酮類等多種抗菌藥物耐藥率高。本課題在國內(nèi)首次對抗生素相關(guān)性腹瀉患者中艱難梭菌感染進行了系統(tǒng)的臨床和實驗室研究,結(jié)果提示國內(nèi)臨床實驗室應重視艱難梭菌感染的檢測,以利于醫(yī)生早診早治；同時研究結(jié)果亦為制定符合中國國情的艱難梭菌感染診治和防控指南提供了科學依據(jù)。本研究的不足之處為僅對上海華山醫(yī)院一家醫(yī)院的患者進行研究,不能反映中國其他地區(qū)艱難梭菌感染的流行病學狀況,因此有待于今后進行多地區(qū)、多中心的臨床研究以進一步了解艱難梭菌在中國的感染狀況。
【關(guān)鍵詞】：艱難梭菌感染 臨床特征 核糖體分型 毒素型別 抗菌藥物耐藥性
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R574.62
【目錄】：