發(fā)布時(shí)間：2025-05-26 23:25

　　第一部分HBV RNase H活性位點(diǎn)氨基酸變異對(duì)HBV復(fù)制的影響 摘要目的:探討HBV RNase H結(jié)構(gòu)域區(qū)活性位點(diǎn)關(guān)鍵氨基酸及其變異對(duì)病毒復(fù)制的影響。方法:采用計(jì)算機(jī)軟件對(duì)HBV (adw2), DHBV、Heron HBV(蒼鷺HBV)和WHV(土撥鼠HBV)四種病毒的RNase H區(qū)域的氨基酸序列進(jìn)行比較,并參考HIV、大腸桿菌RNase H活性位點(diǎn)D-E-D-D motif結(jié)構(gòu),采用Mega-PCR (Mega-primer PCR,大引物法PCR)將HBV (adw2) RNase H序列第D702、H728、E731和D790位氨基酸定向突變,構(gòu)建了D702A、H728V、E731A和D790A 4個(gè)RNase H突變體的表達(dá)質(zhì)粒。將構(gòu)建的RNase H突變體、陽(yáng)性對(duì)照D750V(RNase H功能缺陷)、陰性對(duì)照pCMV-HBV-LE-(RNase H功能正常)表達(dá)質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染Huh7細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后第5天從細(xì)胞胞漿中回收病毒顆粒、提取病毒核酸。為明確病毒顆粒中核酸組分,各樣本取2等份,其中一份加RNase H(來(lái)自于大腸桿菌),另一份不加RNase H,進(jìn)行體外消...

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞
中文摘要
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前言
第一部分 HBV RNase H 活性位點(diǎn)氨基酸變異對(duì)病毒復(fù)制的影響
    引言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 HBV RNase H 引物套區(qū)氨基酸變異對(duì)病毒復(fù)制的影響
    引言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 HCV 準(zhǔn)種差異性與早期病毒學(xué)應(yīng)答關(guān)系的研究
    中文摘要
    英文摘要
    引言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
學(xué)習(xí)期間發(fā)表文獻(xiàn)
致謝



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