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乙型肝炎病毒表型耐藥分析方法建立的研究

發(fā)布時(shí)間:2025-04-01 03:37
  目前,全世界有大約3.5億的慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染者,我國(guó)約有9300萬(wàn)的HBV感染者。HBV慢性感染可以引起慢性乙型肝炎、肝硬化、肝衰竭進(jìn)而誘發(fā)為肝癌。臨床上治療HBV慢性感染的藥物主要有:1.α-干擾素(IFN-α);2.核苷(酸)類似物(NA)。α-干擾素主要是通過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白和免疫調(diào)節(jié)來(lái)達(dá)到抗病毒的作用。與核苷(酸)類似物相比,α-干擾素治療應(yīng)答持續(xù)更久,但是α-干擾素治療慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)有效率仍然較低,僅為30%~50% ,且具有副作用多,價(jià)格昂貴等缺點(diǎn),并且有其他因素決定著α-干擾素抗病毒療效。 核苷(酸)類似物是近些年來(lái)臨床治療慢性乙型肝炎患者的重要藥物,在體內(nèi)核苷(酸)類似物可在磷酸激酶作用下形成三磷酸化合物,拮抗HBV所需的天然底物脫氧鳥苷三磷酸(dGTP)。核苷(酸)類似物作用靶點(diǎn)是HBV逆轉(zhuǎn)錄酶,其可以在3個(gè)環(huán)節(jié)上抑制HBV逆轉(zhuǎn)錄酶的活性,依次是:堿基引導(dǎo)(base priming)、從mRNA前體反轉(zhuǎn)錄成負(fù)鏈DNA、HBV DNA正鏈合成。目前,在我國(guó)臨床應(yīng)用的...

【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2.1臨床檢測(cè)得到RT區(qū)突變基因,巢式PCR

圖2.1臨床檢測(cè)得到RT區(qū)突變基因,巢式PCR

1.16.1分別取出HBsAg、HBeAg檢1.16.2將分別吸取每份檢測(cè)上清50應(yīng)杯內(nèi)。1.16.3分別加入酶結(jié)合物50μl于H37℃,溫浴2h。1.16.4取出反應(yīng)杯,甩掉液體,用洗1.16.5分別加入顯色液A、B各50μ1.16.6加入50....


圖2.2臨床LAM耐藥突變株測(cè)序結(jié)果

圖2.2臨床LAM耐藥突變株測(cè)序結(jié)果

膠回收電泳圖M:分子量標(biāo)準(zhǔn);9077:臨床檢測(cè)得到RT區(qū)突變基因,巢式PCR擴(kuò)增條帶。Figure2.1ElectrophoresisofRTmutationinclinicalbyPCRamplificationM:moleculemarker;90....


圖2.3RT區(qū)突變株定點(diǎn)突變回復(fù)為野生型測(cè)序

圖2.3RT區(qū)突變株定點(diǎn)突變回復(fù)為野生型測(cè)序

M:moleculemarker;9077:RTmutationinclinicalbyPCRamplification2.2HBVRT區(qū)突變株序列測(cè)定圖:圖2.2臨床LAM耐藥突變株測(cè)序結(jié)果HBVDNART區(qū)LAM耐藥突變r(jià)tL180M(....


圖2.1實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)不同濃度LAM作用下HBV基因組轉(zhuǎn)染細(xì)胞的HBVDNA復(fù)制

圖2.1實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)不同濃度LAM作用下HBV基因組轉(zhuǎn)染細(xì)胞的HBVDNA復(fù)制

黑色雜質(zhì)本底)。(5)將膠片在流水下沖洗。(6)收集醋酸纖維膜與膠片一起做標(biāo)記(日期,樣本號(hào))。1.9采用掃描軟件讀取條帶,分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果2結(jié)果2.1HBV核心顆粒DNA水平檢測(cè),熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果加用不同濃度LAM藥物(0μmol/L、0.01μmol/L....



本文編號(hào):4038884

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