發(fā)布時間：2017-05-27 01:01

  本文關(guān)鍵詞：自噬在急性胰腺炎發(fā)病過程中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景 急性胰腺炎是外科常見的急腹癥，其發(fā)病原因尚不清楚，總體死亡率約為5%，其中重癥壞死性胰腺炎死亡率高達(dá)35~50%。目前大多研究者認(rèn)為胰酶原在胰腺細(xì)胞內(nèi)非正常激活，是造成急性胰腺炎發(fā)生的原因。然而胰腺細(xì)胞內(nèi)的胰酶原又是如何激活的，目前也沒有明確闡明，有研究報道自噬參與到該過程中，可是，自噬在該過程中究竟是起到保護(hù)作用還是損害作用，尚存在很大爭議。 目的 探索自噬在急性胰腺炎發(fā)病過程中的作用，闡述急性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制。 方法 1.動物體內(nèi)觀察胰腺炎時自嗜的改變：采用C57小鼠腹腔間斷注射雨蛙素誘導(dǎo)急性胰腺炎模型，檢測血清淀粉酶、干濕重和胰腺組織病理變化評價胰腺炎損傷度，通過Western-blot檢測自噬特異蛋白LC3及胰腺組織透射電鏡檢測，對比正常及饑餓組小鼠，觀察自噬在胰腺炎中的變化。2.建立胰腺炎細(xì)胞模型，觀察其自嗜的改變：雨蛙素刺激AR42J細(xì)胞誘導(dǎo)胰腺炎細(xì)胞模型，通過Western-blot及免疫熒光檢測自噬特異蛋白LC3，觀察雨蛙素作用于腺體細(xì)胞后自噬的改變。3.雨蛙素誘導(dǎo)自噬對胰腺炎細(xì)胞模型的影響：不同濃度雨蛙素刺激胰腺細(xì)胞或者同一雨蛙素濃度刺激胰腺細(xì)胞不同時間后，觀察細(xì)胞毒性、細(xì)胞活性及凋亡等細(xì)胞狀態(tài)。4.自噬對胰酶活化的影響：不同濃度雨蛙素刺激胰腺細(xì)胞或者同一雨蛙素濃度刺激胰腺細(xì)胞不同時間，并給予3甲基腺嘌呤、羥氯喹、E64D在三個不同環(huán)節(jié)抑制自噬后，采用BZiPAR（胰酶熒光底物），檢測胰酶活化情況，了解胰酶活化與自嗜的關(guān)系；5.觀察不同嚴(yán)重程度胰腺炎小鼠模型自嗜變化間斷腹腔注射CR，，通過不同的注射次數(shù)，誘導(dǎo)出不同嚴(yán)重程度的急性胰腺炎動物模型，用Western-blot檢測自噬特異蛋白LC3，觀察自噬同胰腺炎嚴(yán)重程度的關(guān)系。 結(jié)果 1.胰腺炎動物模型自噬體數(shù)目增多，包繞酶原顆粒并降解。2.雨蛙素誘導(dǎo)胰腺炎細(xì)胞模型，自噬體增加，自噬功能障礙。3.雨蛙素刺激并不能直接引起AR42J細(xì)胞壞死或凋亡，相反，雨蛙素反而會促進(jìn)AR42J細(xì)胞增殖，這種增殖作用是可以通過抑制自噬來抑制的。4.在雨蛙素的刺激下，AR42J細(xì)胞的胰酶原部分活化，酶原活化并不能隨時間的延長而累積，也不隨雨蛙素濃度增加而提高；不同環(huán)節(jié)抑制自噬，均可抑制胰酶活化。5.自噬障礙程度同胰腺炎的嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)，當(dāng)胰腺炎表現(xiàn)越重，自噬障礙越明顯。 結(jié)論 本研究證實(shí)了自噬障礙參與急性胰腺炎胰酶原的活化，但單純自噬障礙引起的胰酶活化，并不能進(jìn)一步引起胰腺細(xì)胞凋亡或壞死；然而雨蛙素誘導(dǎo)的急性胰腺炎動物模型，胰腺組織可出現(xiàn)壞死，并且自噬障礙程度同疾病的嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)。因此我們推測，當(dāng)自噬障礙后，能通過某種機(jī)制（可能是激活炎癥系統(tǒng)），而非胰酶活化，損傷胰腺組織，進(jìn)一步加重疾病病情。
【關(guān)鍵詞】：急性胰腺炎 自噬 雨蛙素 AR42J
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R576
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 文獻(xiàn)回顧13-20
• 引言20-21
• 實(shí)驗(yàn)一 動物體內(nèi)觀察胰腺炎時自嗜的改變21-28
• 1. 材料21-22
• 2. 方法22-24
• 3. 結(jié)果24-25
• 4. 討論25-28
• 實(shí)驗(yàn)二 建立胰腺炎細(xì)胞模型，觀察其自嗜的改變28-32
• 1. 材料28
• 2. 方法28-29
• 3. 結(jié)果29-30
• 4. 討論30-32
• 實(shí)驗(yàn)三 雨蛙素誘導(dǎo)自噬對胰腺炎細(xì)胞模型的影響32-41
• 1. 材料32
• 2. 方法32-34
• 3. 結(jié)果34-38
• 4. 討論38-41
• 實(shí)驗(yàn)四 自噬對胰酶活化的影響41-46
• 1. 材料41
• 2. 方法41-42
• 3. 結(jié)果42-43
• 4. 討論43-46
• 實(shí)驗(yàn)五 自噬在不同程度小鼠急性胰腺炎模型中的變化46-50
• 1. 材料46
• 2. 方法46-47
• 3. 結(jié)果47-48
• 4. 討論48-50
• 小結(jié)50-51
• 參考文獻(xiàn)51-58
• 個人簡歷和研究成果58-59
• 致謝59

【共引文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：自噬在急性胰腺炎發(fā)病過程中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：398459