目的探討NLRP3炎癥小體在急性結(jié)腸炎中的作用。方法通過(guò)飼喂右旋糖酐硫酸鈉鹽(DSS)在野生型(WT)與NLRP3缺陷型(NLRP3^-/-)小鼠中建立炎癥性腸病(IBD)模型。而后將小鼠分為4組:WT對(duì)照組、WT腸炎組、NLRP3^-/-對(duì)照組和NLRP3^-/-腸炎組。DSS飼喂期間記錄小鼠體重,7 d后處死小鼠,收集其血清、腸系膜淋巴結(jié)(mLN)、派伊爾結(jié)(PPs)、脾臟以及結(jié)腸等標(biāo)本;蘇木精-伊紅染色、TUNEL染色評(píng)估其炎癥損傷以及細(xì)胞凋亡情況;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組小鼠T、B淋巴細(xì)胞比例差異;ELISA檢測(cè)血清細(xì)胞因子水平;Western blot檢測(cè)各組小鼠結(jié)腸中細(xì)胞因子表達(dá)水平;體外誘導(dǎo)初始CD4⁺ T細(xì)胞向Treg分化,比較WT小鼠與NLRP3^-/-小鼠Treg分化能力。結(jié)果 NLRP3的缺失通過(guò)增加PPs和脾臟中Foxp3⁺ Treg細(xì)胞的比例減輕DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎。NLRP3^-/-結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸中轉(zhuǎn)錄因子Foxp3和抗...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 試劑
    1.3 結(jié)腸炎的誘導(dǎo)和評(píng)估
    1.4 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)細(xì)胞因子
    1.5 Western blot檢測(cè)蛋白含量
    1.6 流式細(xì)胞術(shù)對(duì)表面標(biāo)記物和細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的檢測(cè)
    1.7 Treg的體外分化
    1.8 蘇木精-伊紅和免疫組化染色
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 NLRP3缺失可以抑制DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎
    2.2 在DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎中NLRP3的缺失會(huì)增加Treg細(xì)胞的比例
    2.3 NLRP3缺失會(huì)增加IL-10和Foxp3的表達(dá)
    2.4 NLRP3的缺失在體外調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞的分化
3 討論



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