目的:建立二甲基甲酰胺(DMF)慢性中毒性肝損傷大鼠模型,觀察其病理特點和線粒體凋亡途徑相關蛋白在DMF慢性中毒性肝損傷大鼠肝臟組織中的表達。探討細胞凋亡機制在DMF發(fā)病中的作用。方法:⑴建立二甲基甲酰胺慢性中毒性肝損傷大鼠模型:將SD大鼠隨機分為2組,每組各8只;DMF肝損傷組:腹腔注射40%DMF溶液1 ml/100g,每周1次;正常對照組:腹腔注射等體積的0.9%氯化鈉注射液,每周1次;第8周給藥后2天后抽血查肝功能(ALT、AST、ALB),并處死大鼠,進行病理及細胞凋亡相關蛋白檢測;⑵肝功生化指標檢測:采取全自動生化分析儀檢測;⑶肝組織病理學檢查:肝組織標本采取10%中性甲醛溶液中固定,常規(guī)石蠟包埋,HE及網(wǎng)狀纖維染色,顯微鏡下病理分析;⑷細胞凋亡蛋白檢測:采用免疫組織化學染色法檢測Bax、Bcl-2、Cyt-c、Caspase-3、Caspase-9線粒體細胞凋亡途徑相關蛋白,采用半定量積分法及ImageJ分析的方法對染色結果進行判斷和統(tǒng)計分析。結果:⑴大鼠一般情況:與正常對照組相比DMF組大鼠體重減輕,第8周時與對照組相比體重有明顯差異(450.2±12.6g vs 31...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2:大佩體里變化趨勢圖

實驗結果1.大鼠一般狀況DMF組大鼠給藥后活動度明顯減弱（圖1A），進食和飲水量減少，持續(xù)約2天后緩慢恢復，隨著給藥次數(shù)的增加，上述癥狀逐漸減輕，精神、食欲及活動恢復的速度加快，持續(xù)時間縮短。后期大鼠毛色皮毛凌亂枯黃，無光澤，部分大鼠還出現(xiàn)腹部膨�。▓D1B），進食量減少....

圖4人正常對照組肝臟病理〔皿心oo)，盯小葉結構正常，盯細胞條素狀排列，孩居中

3.2病理改變：對照組肝組織結構正常（圖4A），DMF組大鼠肝組織炎癥反應輕，小葉結構尚完整，肝細胞排列尚整齊，可見輕度肝細胞水腫，空泡變性，央靜脈周邊可見細胞嗜酸性病變（圖4B）及凋亡小體(圖4C)，毛細膽管輕度擴伴膽汁淤積，網(wǎng)纖染色見竇周纖維化（圖4D）。

圖7A、C），DMF組Cyt-c表達明顯，在中央靜脈周圍肝細胞胞漿內(nèi)可見大量橘黃色細顆粒沉積（圖7B、D）

4.2Bcl-2蛋白表達情況：Bcl-2主要分布于細胞漿，在胞漿內(nèi)呈棕色顆粒沉照組中未見Bcl-2表達（圖6A、C），DMF組Bcl-2呈低表達，在中央靜脈的細胞胞漿內(nèi)表達（圖6B、D）。

圖8A、8C），DMF組Caspase-3高度表達，中央靜脈周圍的肝細胞漿內(nèi)可見大量棕褐色顆粒沉積（圖8B、8D）

4.4Caspase-3蛋白表達情況：Caspase-3蛋白主要分布于細胞漿中，呈棕褐色顆對照組中未見Caspase-3表達（圖8A、8C），DMF組Caspase-3高度表達，靜脈周圍的肝細胞漿內(nèi)可見大量棕褐色顆粒沉積（圖8B、8D）。

本文編號：3956652