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脂氧素對鼠源性巨噬細(xì)胞內(nèi)TLR4/NF-κB信號通路的影響及其作用機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2024-04-14 06:32
  背景與目的:巨噬細(xì)胞及其TLRs/NF-κB信號通路的過度激活在炎癥性腸病(IBD)的發(fā)病中起重要作用。脂氧素(Lipoxins,LXs)是花生四烯酸的重要代謝產(chǎn)物,它能夠調(diào)節(jié)多種炎癥相關(guān)基因的表達(dá)和多種炎性細(xì)胞的功能,對炎癥反應(yīng)的及時(shí)消退具有重要的作用,在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中起重要的作用。本文旨在體外觀察脂氧素及其受體激動劑、拮抗劑對LPS作用的鼠源性巨噬細(xì)胞株RAW264.7,明確脂氧素對巨噬細(xì)胞中TLR4/NF-κB信號通路的影響及其可能機(jī)制,以期為IBD的藥物治療開辟新的思路。方法:(1)實(shí)驗(yàn)分組:①對照組;②脂氧素(LXA4)組:300nM LXA4處理巨噬細(xì)胞;③脂氧素受體激動劑(BML-111)組:10uM BML-111處理巨噬細(xì)胞;④脂氧素受體拮抗劑(BOC-2)組:10uM BOC-2處理巨噬細(xì)胞;上述四組再分為LPS作用與無LPS作用2組。(2)CCK-8檢測LPS的細(xì)胞毒性及脂氧素的作用。(3)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)法檢測巨噬細(xì)胞內(nèi)TLR4、TRAF6、SOCS2mRNA的表達(dá)。(4)Western blot檢測細(xì)胞內(nèi)TLR4、TRAF6、SOCS...

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