MicroRNAs下調(diào)LXRs的分子機制及其對肝細胞脂質(zhì)生成的抑制作用研究
【文章頁數(shù)】:105 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖1-1M-MLV(Invitrogen)逆轉(zhuǎn)錄使用說明
圖1-1M-MLV(Invitrogen)逆轉(zhuǎn)錄使用說明即進行下一步的PCR反應(yīng)或凍存。PCR檢測miR-1/206/613對LXRα表達的影響如下:(產(chǎn)物137bp):'-gtgaaggtgacagcagycggtt-3''-gaagtggggtggct....
圖1-22-ΔΔCt計算法示例
第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文下游引物(10μM)ddH2O1μl17.7μleal-timePCR反應(yīng)條件如下95℃×1cycle95℃60℃30sec30sec30sec}×40cycles果分析采用Bio-RadIQ5軟件對結(jié)果進行分析采用2-ΔΔCt....
圖1-4SDS-PAGE濃縮膠配置方法
圖1-4SDS-PAGE濃縮膠配置方法2).蛋白樣品準備:各取40μg蛋白,加入5×蛋白上樣Buffer,100℃或沸水浴加熱5min。3).上樣后,保持電壓80V,待蛋白進入分離膠后,將電壓調(diào)至120V,根據(jù)預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準的電泳情況,預(yù)計目的蛋白....
圖1-5生物信息學(xué)預(yù)測miR-1/206/613在LXRα3'-UTR區(qū)的結(jié)合位點
4).洗滌:加入Western洗滌液,在側(cè)擺搖床上緩慢搖動洗滌10-15min。棄洗滌液后,再加入洗滌液,洗滌10-15min。共洗滌3次。如果結(jié)果背景較高可以適當(dāng)延長洗滌時間并增加洗滌次數(shù)。5).二抗孵育:參照二抗說明書,按照適當(dāng)比例用封閉液稀釋辣根過氧化物....
本文編號:3952180
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