基于TLR4MyD88信號通路觀察糞菌移植對DSS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎干預(yù)作用機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2024-04-10 00:04
目的:探討糞菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)對葡聚糖硫酸鈉(dextran sodium sulfate, DSS)誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)干預(yù)作用及其炎癥相關(guān)的分子機(jī)制。方法:30只昆明小鼠采用DSS喂養(yǎng)建立結(jié)腸炎小鼠模型并隨機(jī)分為模型組、FMT低劑量組和FMT高劑量組,另取10只作為對照組。FMT低劑量組、FMT高劑量組自造模后第1 d開始分別給予8 g/kg、15 g/kg糞菌劑量灌腸處理,灌腸體積0.2 m L。對照組和模型組給予等體積生理鹽水灌腸處理。分別在實(shí)驗(yàn)第1、7、14及21 d稱量小鼠體重。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死小鼠,取出結(jié)直腸,觀察各組小鼠結(jié)直腸形態(tài)變化并通過HE染色觀察病變程度。ELISA檢測小鼠結(jié)直腸組織勻漿液上清中腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin 6, IL-6)、白細(xì)胞介素-4(interleukin 4, IL-4)和白細(xì)胞介素-10(interleukin 10, IL-10)的表達(dá)變化...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
前言
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動物
1.2 藥品與主要試劑
1.3 新鮮菌液制備
1.4 動物模型建立及分組
1.5 HE染色檢測小鼠結(jié)腸組織形態(tài)
1.6 ELISA檢測小鼠結(jié)直腸組織勻漿液上清中炎癥因子含量
1.7 免疫組化檢測小鼠結(jié)直腸組織NF-κB P65的表達(dá)
1.8 RT-q PCR檢測小鼠結(jié)直腸組織NF-κB P65 m RNA的表達(dá)
1.9 Western blotting檢測小鼠結(jié)直腸組織TLR4、My D88的蛋白表達(dá)
1.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 FMT對小鼠活動、飲食及體重的影響
2.2 FMT對小鼠結(jié)直腸組織形態(tài)的影響
2.3 TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10在小鼠結(jié)腸組織勻漿液上清中的表達(dá)變化
2.4 免疫組化和RT-q PCR檢測NF-κB P65在小鼠結(jié)腸組織中的表達(dá)變化
2.5 TLR4、My D88蛋白在小鼠結(jié)腸組織中的表達(dá)變化
3 討論
本文編號:3949837
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前言
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動物
1.2 藥品與主要試劑
1.3 新鮮菌液制備
1.4 動物模型建立及分組
1.5 HE染色檢測小鼠結(jié)腸組織形態(tài)
1.6 ELISA檢測小鼠結(jié)直腸組織勻漿液上清中炎癥因子含量
1.7 免疫組化檢測小鼠結(jié)直腸組織NF-κB P65的表達(dá)
1.8 RT-q PCR檢測小鼠結(jié)直腸組織NF-κB P65 m RNA的表達(dá)
1.9 Western blotting檢測小鼠結(jié)直腸組織TLR4、My D88的蛋白表達(dá)
1.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 FMT對小鼠活動、飲食及體重的影響
2.2 FMT對小鼠結(jié)直腸組織形態(tài)的影響
2.3 TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10在小鼠結(jié)腸組織勻漿液上清中的表達(dá)變化
2.4 免疫組化和RT-q PCR檢測NF-κB P65在小鼠結(jié)腸組織中的表達(dá)變化
2.5 TLR4、My D88蛋白在小鼠結(jié)腸組織中的表達(dá)變化
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