背景肝纖維化(Liver fibrosis,LF)是由多種慢性損傷性致病因子導(dǎo)致的肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生的病理過(guò)程,主要特征是以膠原蛋白沉積在肝臟組織為主的細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrixs,ECMs)異常堆積,最終導(dǎo)致肝臟正常結(jié)構(gòu)被破壞以及正常肝功能下降。若沒(méi)有及時(shí)干預(yù)LF的進(jìn)展,輕微的肝纖維化會(huì)變成肝硬化,最終可能會(huì)發(fā)生肝癌。ECMs的沉積與激活態(tài)的肝星狀細(xì)胞(Hepatic stellate cells,HSCs)產(chǎn)生膠原蛋白具有非常大的相關(guān)性,在LF中HSCs經(jīng)常處于激活態(tài)。有研究表明,當(dāng)去除了損傷性致病因子后,肝纖維化可以被逆轉(zhuǎn)。在肝纖維化逆轉(zhuǎn)過(guò)程中伴隨著HSC的凋亡,衰老及靜息態(tài)表型的轉(zhuǎn)換,活化的細(xì)胞數(shù)目逐漸降低。因此,在肝纖維化進(jìn)展期及逆轉(zhuǎn)期研究肝星狀細(xì)胞的活化、增殖與凋亡對(duì)治療肝纖維化有著重要的意義。類(lèi)泛素化作為一種動(dòng)態(tài)修飾蛋白的過(guò)程,在纖維化類(lèi)疾病中相繼被報(bào)道,包括心纖維化,肺纖維化,腎纖維化等疾病。在肝纖維化中,類(lèi)泛素化E2連接酶UBC9通過(guò)促進(jìn)HSCs活化增殖發(fā)揮促纖維化作用,然而類(lèi)泛素化蛋白酶(sentrin/SUMO-specific pro...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
    2.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.4 主要試劑和溶液的配制
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 肝纖維化進(jìn)展期及逆轉(zhuǎn)期模型建立
    3.2 血清中ALT/GPT及AST/GOT的檢測(cè)
    3.3 原位灌流提取小鼠原代HSCs
    3.4 肝組織病理學(xué)檢測(cè)
    3.5 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
    3.6 RNA的提取與RT-qPCR
    3.7 蛋白的提取與定量
    3.8 Western blot
    3.9 細(xì)胞周期檢測(cè)
    3.10 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
    3.11 MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力
    3.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 CCl₄誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化進(jìn)展期及逆轉(zhuǎn)期模型建立
    4.2 在原代小鼠的肝星狀細(xì)胞中及肝組織中,TGF-β1 激活的HSC-T6細(xì)胞中SENP2的表達(dá)情況
    4.3 在HSC-T6細(xì)胞中過(guò)表達(dá)SENP2對(duì)細(xì)胞活化、增殖與凋亡的影響
    4.4 在HSC-T6細(xì)胞中沉默SENP2對(duì)細(xì)胞活化、增殖、逆轉(zhuǎn)與凋亡的影響
    4.5 SENP2對(duì)Wnt/β-catenin通路上關(guān)鍵蛋白β-catenin,C-myc與CyclinD1的影響
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 SENP2在人類(lèi)癌癥中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3912496