背景肝纖維化(Liver fibrosis,LF)是由多種慢性損傷性致病因子導(dǎo)致的肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生的病理過程,主要特征是以膠原蛋白沉積在肝臟組織為主的細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrixs,ECMs)異常堆積,最終導(dǎo)致肝臟正常結(jié)構(gòu)被破壞以及正常肝功能下降。若沒有及時干預(yù)LF的進(jìn)展,輕微的肝纖維化會變成肝硬化,最終可能會發(fā)生肝癌。ECMs的沉積與激活態(tài)的肝星狀細(xì)胞(Hepatic stellate cells,HSCs)產(chǎn)生膠原蛋白具有非常大的相關(guān)性,在LF中HSCs經(jīng)常處于激活態(tài)。有研究表明,當(dāng)去除了損傷性致病因子后,肝纖維化可以被逆轉(zhuǎn)。在肝纖維化逆轉(zhuǎn)過程中伴隨著HSC的凋亡,衰老及靜息態(tài)表型的轉(zhuǎn)換,活化的細(xì)胞數(shù)目逐漸降低。因此,在肝纖維化進(jìn)展期及逆轉(zhuǎn)期研究肝星狀細(xì)胞的活化、增殖與凋亡對治療肝纖維化有著重要的意義。類泛素化作為一種動態(tài)修飾蛋白的過程,在纖維化類疾病中相繼被報道,包括心纖維化,肺纖維化,腎纖維化等疾病。在肝纖維化中,類泛素化E2連接酶UBC9通過促進(jìn)HSCs活化增殖發(fā)揮促纖維化作用,然而類泛素化蛋白酶(sentrin/SUMO-specific pro...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞對照
中文摘要
Abstract
1 前言
2 實驗材料
    2.1 實驗動物與細(xì)胞
    2.2 實驗試劑與藥品
    2.3 實驗儀器與設(shè)備
    2.4 主要試劑和溶液的配制
3 實驗方法
    3.1 肝纖維化進(jìn)展期及逆轉(zhuǎn)期模型建立
    3.2 血清中ALT/GPT及AST/GOT的檢測
    3.3 原位灌流提取小鼠原代HSCs
    3.4 肝組織病理學(xué)檢測
    3.5 細(xì)胞實驗
    3.6 RNA的提取與RT-qPCR
    3.7 蛋白的提取與定量
    3.8 Western blot
    3.9 細(xì)胞周期檢測
    3.10 細(xì)胞凋亡檢測
    3.11 MTT法檢測細(xì)胞活力
    3.12 統(tǒng)計學(xué)處理
4 實驗結(jié)果
    4.1 CCl₄誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化進(jìn)展期及逆轉(zhuǎn)期模型建立
    4.2 在原代小鼠的肝星狀細(xì)胞中及肝組織中,TGF-β1 激活的HSC-T6細(xì)胞中SENP2的表達(dá)情況
    4.3 在HSC-T6細(xì)胞中過表達(dá)SENP2對細(xì)胞活化、增殖與凋亡的影響
    4.4 在HSC-T6細(xì)胞中沉默SENP2對細(xì)胞活化、增殖、逆轉(zhuǎn)與凋亡的影響
    4.5 SENP2對Wnt/β-catenin通路上關(guān)鍵蛋白β-catenin,C-myc與CyclinD1的影響
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 SENP2在人類癌癥中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3912496