目的：用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜法(MALDI-TOF MS)和PCR產(chǎn)物直接測序法兩種方法檢測乙型肝炎病毒P基因耐藥位點的突變情況,并進行比較分析,進一步證實MALDI-TOF MS是一種快速、早期、準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)核苷(酸)類藥物治療后耐藥位點的檢測方法。 方法：1、病例來源：(1)研究組：收集90例服用拉米夫定等核苷(酸)類藥物治療1年以上,HBV-DNA仍大于500copies/ml的慢性乙型病毒性肝炎患者血清,并根據(jù)核苷(酸)類藥物用藥情況分為6個組。(2)對照組：同時收集10名HBsAg陽性時間超過6個月,肝功能正常,HBV-DNA>1×105 copies/ml,始終未予抗病毒治療的慢性乙型病毒性肝炎患者的血清作為對照組。2、檢測方法：(1)采用MALDI-TOF MS檢測HBV P基因已知11個變異位點的變異情況；基于SEQUENON公司質(zhì)譜儀及配套芯片-試劑盒技術(shù),通過TYPE4.0軟件分析結(jié)果。(2)PCR產(chǎn)物直接測序法采用ABI3730XL測序儀,通過SequenceNavigator軟件分析得出序列。 結(jié)果：1、兩種方法檢出結(jié)果比較：在服用拉米夫定等核苷(...

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【學(xué)位級別】：碩士

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第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 病例收集
    2.2 主要試劑及儀器
    2.3 血清存放
    2.4 MALDI-TOF MS
    2.5 PCR產(chǎn)物直接測序法
    2.6 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    3.1 100例病例MALDI-TOF MS及PCR產(chǎn)物直接測序法檢測結(jié)果
        3.1.1 90例服用核苷(酸)類藥物的病例MALDI-TOF MS檢測結(jié)果
        3.1.2 90例服用核苷(酸)類藥物的病例PCR產(chǎn)物直接測序法檢測結(jié)果
        3.1.3 10例未服用核苷(酸)類藥物的病例檢測結(jié)果
    3.2 兩種檢測方法檢測結(jié)果的比較分析
        3.2.1 兩種方法變異檢出數(shù)(率)的比較
        3.2.2 兩種方法在不同病毒DNA水平檢出數(shù)(率)的比較
    3.3 MALDI-TOF MS檢測準(zhǔn)確性的結(jié)果分析
        3.3.1 不同藥物組變異位點的組合形式
        3.3.2 不同藥物組的變異與相應(yīng)藥物變異位點的相符率
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻
綜述
致謝



本文編號：3904995