目的內(nèi)臟痛覺過敏是炎癥性腸病(IBD)患者腹痛發(fā)生的主要病理生理機(jī)制,其確切的分子機(jī)制尚未完全闡明。利用小鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型和體外培養(yǎng)的小鼠來源神經(jīng)瘤母細(xì)胞(Neuro-2a),本研究旨在(1)明確脊髓趨化因子CCL8及其主要受體CCR5在內(nèi)臟痛覺過敏中的作用和可能的機(jī)制;(2)研究脊髓miR-146a-5p在內(nèi)臟疼痛過程中的功能及其對(duì)CCL8和下游信號(hào)的調(diào)控作用。方法(1)小鼠結(jié)腸內(nèi)灌注2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)以誘導(dǎo)結(jié)腸炎。(2)疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)、結(jié)腸髓過氧化物酶(MPO)活性及蘇木素-伊紅(HE)染色法用于鑒定結(jié)腸炎癥。(3)小鼠接受結(jié)直腸擴(kuò)張(CRD)測(cè)定內(nèi)臟疼痛閾值以評(píng)估內(nèi)臟高敏感性(內(nèi)臟痛覺過敏)。(4)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q PCR)檢測(cè)miR-146a-5p表達(dá)和CCL8、CCR5、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)m RNA水平。(5)采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)CCL8蛋白水平。(6)采用蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)CCR5蛋白、磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)蛋白表...

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.1調(diào)節(jié)內(nèi)臟疼痛感覺的內(nèi)源性調(diào)節(jié)系統(tǒng)的上行和下行通路[13]

NA-146a-5p/CCL8調(diào)控結(jié)腸炎小鼠內(nèi)臟痛覺過敏的作用及遞涉及到一系列的過程：傷害性刺激作用于胃腸道初級(jí)感覺神經(jīng)末梢傳導(dǎo)至背根神經(jīng)神經(jīng)元，再傳導(dǎo)至脊髓背角神經(jīng)元（spinal進(jìn)行初步的中樞整合，隨后中樞神經(jīng)系統(tǒng)將號(hào)進(jìn)行加工處理，人們就能感知到疼痛[13]（般而言，內(nèi)臟痛....

圖1.2胃腸道的脊神經(jīng)支配[15]

圖1.2胃腸道的脊神經(jīng)支配[15]Figure1.2Spinalinnervationofthegastrointestinaltract家族在疼痛中的作用最初是在1991年由Oppenheim等人發(fā)現(xiàn)的與白細(xì)胞遷移有關(guān)趨化因子家族有50多個(gè)成員，其大小通常....

圖1.3趨化因子及其受體的分類[21]

圖1.3趨化因子及其受體的分類[21]Figure1.3Classificationofchemokinesandtheirreceptors研究表明，趨化因子及其受體在許多生物學(xué)過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，如白細(xì)胞遷移、炎癥、免疫反應(yīng)和腫瘤生長(zhǎng)等[22]。它們是許多....

圖1.2MicroRNA的生物轉(zhuǎn)化途徑[8]

圖1.2MicroRNA的生物轉(zhuǎn)化途徑[8]Figure1.2MicroRNA(miRNA)biogenesispathwayroRNAs在疼痛領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀表明，在一些重要的生物學(xué)過程包括神經(jīng)發(fā)育，分化和中樞神經(jīng)系統(tǒng)miRNAs已經(jīng)成為主要的基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)....

本文編號(hào)：3891755