發(fā)布時間：2023-07-01 13:50

　　背景炎癥性腸病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)是一類常見的胃腸道的慢性炎癥性疾病,主要包括克羅恩病(Crohn’s Disease,CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis,UC)。目前廣泛認為Th17細胞在IBD的疾病進展過程中起到了關(guān)鍵的免疫損傷作用,但Th17細胞的功能及分化機制尚不清楚。最近研究證據(jù)表明,Ascl2在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。有文獻初步發(fā)現(xiàn)Ascl2對Th17細胞有調(diào)節(jié)作用,因此,Ascl2與Th17細胞功能之間的關(guān)系以及Ascl2如何參與IBD的發(fā)病機制需要我們進一步研究和探索。目的本研究旨在探究Ascl2如何參與IBD的發(fā)病機制,從而為IBD尋找新的治療靶點。方法首先,通過qRT-PCR檢測Ascl2在IBD患者腸黏膜組織中的表達情況。然后,通過細胞培養(yǎng)、慢病毒轉(zhuǎn)染、qRT-PCR、流式細胞術(shù)、Elisa檢測共同研究Ascl2與Th17細胞功能之間的關(guān)系及其作用機制。最后,通過構(gòu)建實驗性小鼠結(jié)腸炎模型進一步分析Ascl2在調(diào)節(jié)腸道炎癥中的作用。結(jié)果活動期IBD患者腸黏膜組織中Ascl2的表達明顯低于正常對照人...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫對照
第一章 緒論
    1.1 CD4⁺T細胞在IBD疾病中的作用
    1.2 Ascl2的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 Ascl2的結(jié)構(gòu)
        1.2.2 Ascl2在人體正常組織中的定位
        1.2.3 Ascl2的相關(guān)研究
    1.3 本論文的主要貢獻
    1.4 本論文的結(jié)構(gòu)安排
第二章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 主要實驗儀器
        2.1.3 主要實驗試劑
        2.1.4 主要實驗試劑配置
    2.2 實驗方法
        2.2.1 總RNA提取
        2.2.2 逆轉(zhuǎn)錄反應
        2.2.3 實時熒光定量PCR
        2.2.4 分離小鼠脾臟中CD4⁺T細胞
        2.2.5 慢病毒轉(zhuǎn)染CD4⁺T細胞
            2.2.5.1 Lentiviral vector包裝
            2.2.5.2 轉(zhuǎn)染CD4⁺T細胞
        2.2.6 將轉(zhuǎn)染的CD4⁺T細胞誘導分化Th17細胞
        2.2.7 流式細胞術(shù)
            2.2.7.1 細胞表面染色
            2.2.7.2 細胞內(nèi)染色
        2.2.8 酶聯(lián)免疫吸附試驗
        2.2.9 統(tǒng)計學分析
第三章 結(jié)果
    3.1 Ascl2的表達與IBD患者腸黏膜炎癥有負性相關(guān)性
    3.2 Ascl2抑制Th17細胞分化并促進IL10的產(chǎn)生
    3.3 Ascl2通過促進Blimp1的表達從而促進Th17細胞產(chǎn)生IL10
    3.4 Ascl2通過抑制腸道Th17分化改善TNBS誘導的結(jié)腸炎
    3.5 本章小結(jié)
第四章 討論
    4.1 CD4⁺T細胞具有可塑性
    4.2 Th17細胞的分型
    4.3 IL10的免疫抑制作用
    4.4 IL10信號通路的相關(guān)分子
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀碩士學位期間的研究成果



本文編號：3836360