目的探究H. pylori空泡毒素VacA對(duì)胃上皮細(xì)胞NLRP3炎性小體激活的影響。方法采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695感染AGS細(xì)胞,Western blotting、q RT-PCR、ELISA檢測(cè)NLRP3、Pro-Caspase-1、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β的表達(dá)。siRNA-NC、siRNA-NLRP3轉(zhuǎn)染AGS后,分別用PBS、WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695刺激,qRT-PCR和細(xì)胞因子ELISA檢測(cè)試劑盒分別檢測(cè)pro-IL-1β的mRNA表達(dá)水平和IL-1β的蛋白表達(dá)水平。收集慢性胃炎患者標(biāo)本,鑒別出H. pylori陽(yáng)性患者的VacA基因型(s1m1型和s1m2型),通過(guò)q RT-PCR檢測(cè)NLRP3、caspase-1、pro-IL-1β的mRNA表達(dá)水平及采用細(xì)胞因子ELISA試劑盒檢測(cè)IL-1β蛋白表達(dá)水平。C57BL/6小鼠腹腔注射DMSO或者DMSO+Mcc950,H. pylori菌液灌胃,qRT-PCR和ELISA檢測(cè)胃組織IL-1β的...

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑、菌株、臨床樣品及細(xì)胞來(lái)源
    1.2 AGS細(xì)胞與H.pylori的培養(yǎng)
    1.3 H.pylori感染胃炎模型的建立及管理
    1.4 AGS細(xì)胞的體外感染
    1.5 siRNA-NLRP3轉(zhuǎn)染AGS細(xì)胞
    1.6 胃黏膜組織及AGS細(xì)胞總RNA提取
    1.7 定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR)
    1.8 Western blotting
    1.9 ELISA定量檢測(cè)
    1.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 慢性胃炎患者中不同VacA基因型患者炎性小體相關(guān)分子的表達(dá)水平
    2.2 WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695分別作用AGS細(xì)胞后炎性小體分子的表達(dá)水平
    2.3 WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695分別作用AGS細(xì)胞后IL-1β的表達(dá)水平
    2.4 siRNA-NLRP3阻斷WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695作用AGS細(xì)胞后IL-1β的表達(dá)
    2.5 Mcc950抑制WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695感染小鼠胃黏膜細(xì)胞IL-1β的表達(dá)
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