趨化軸CXCL12-CXCR4/CXCR7在肝硬化脾亢大鼠脾臟組織中的表達(dá)及意義
發(fā)布時(shí)間:2023-05-05 22:12
目的:探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4/CXCR7在肝硬化脾功能亢進(jìn)大鼠脾臟組織中的表達(dá)及意義,為進(jìn)一步研究肝硬化脾亢脾組織纖維化進(jìn)程的發(fā)生機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:50只雄性SD純系大鼠,隨機(jī)分成模型組(n=40)和對(duì)照組(n=10)。對(duì)照組大鼠采用0.9%生理鹽水灌胃。模型組采用40%CCL4花生油溶液灌胃,每周2次,每次0.3ml/100g,15%白酒作為飲用水,共8周制作肝硬化脾功能亢進(jìn)大鼠模型,共8周。肉眼觀察大鼠形態(tài)變化,經(jīng)HE染色、Masson染色,行肝功能檢查及血常規(guī)驗(yàn)證肝硬化脾功能亢進(jìn)模型建立成功后,測(cè)量脾指數(shù)、脾橫徑及脾長(zhǎng)徑,Masson三色染色檢測(cè)脾臟組織纖維化程度,免疫組織化學(xué),Western-blot和qRT-PCR方法檢測(cè)兩組大鼠脾臟組織中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4/CXCR7的蛋白及基因的表達(dá)水平。正態(tài)分布的計(jì)量資料以x±s表示,兩組間的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。結(jié)果:肝功能變化:模型組大鼠肝功能ALT, AST及TBIL分別為(237.80±105.11)U/L、(685.70±246.47) U/L、(30.04±8.77)μmol/...
【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1. 引言
1.1 肝硬化脾功能亢進(jìn)的概述
1.2 肝硬化脾亢并發(fā)外周血細(xì)胞減少的原因研究進(jìn)展
1.2.1 造血功能障礙
1.2.2 細(xì)胞吞噬破壞作用
1.2.3 免疫功能紊亂
1.2.4 脾臟的過(guò)分阻留
1.3 趨化因子及趨化因子受體的概述
1.4 趨化軸CXCL12-CXCR4/CXCR7的概述
1.4.1 趨化軸CXCL12-CXCR4/CXCR7與組織纖維化的關(guān)系
1.5 本文的研究意義
1.6 技術(shù)路線
2. 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
2.3.1 肝硬化脾亢模型所需試劑
2.3.2 HE染色試劑
2.3.3 Masson三色法試劑
2.3.4 免疫組化試劑
2.3.5 Western blot試劑
2.3.6 RT-PCR試劑
2.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.4.1 肝硬化脾亢模型的建立
2.4.2 標(biāo)本的采集與處理
2.4.3 HE常規(guī)染色檢測(cè)
2.4.4 Masson三色法檢測(cè)
2.4.5 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)
2.4.6 Western blot檢測(cè)
2.4.7 RT-PCR檢測(cè)
2.4.8 熒光定量PCR反應(yīng)
2.4.9 數(shù)據(jù)處理
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3. 結(jié)果與分析
3.1 動(dòng)物模型行為表現(xiàn)
3.2 肝脾外觀形態(tài)變化
3.3 肝臟病理形態(tài)學(xué)變化
3.4 脾臟病理形態(tài)學(xué)變化
3.5 部分肝功能生化指標(biāo)變化
3.6 外周血細(xì)胞數(shù)量變化
3.7 脾指數(shù)、脾橫徑及脾長(zhǎng)徑的變化
3.8 免疫組化法檢測(cè)結(jié)果
3.9 蛋白印跡檢測(cè)結(jié)果
3.10 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果
3.11 CXCL12、CXCR4、CXCR7三者之間的相關(guān)性
3.12 CXCL12、CXCR4、CXCR7與脾臟膠原纖維面積的相關(guān)性
4. 討論
4.1 肝硬化脾亢的治療現(xiàn)狀
4.2 構(gòu)建肝硬化脾亢模型的方法
4.3 趨化軸CXCL12-CXCR4/CXCR7在脾臟組織中的表達(dá)與意義
5. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮寫(xiě)對(duì)照表
附錄
致謝
本文編號(hào):3808459
【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1. 引言
1.1 肝硬化脾功能亢進(jìn)的概述
1.2 肝硬化脾亢并發(fā)外周血細(xì)胞減少的原因研究進(jìn)展
1.2.1 造血功能障礙
1.2.2 細(xì)胞吞噬破壞作用
1.2.3 免疫功能紊亂
1.2.4 脾臟的過(guò)分阻留
1.3 趨化因子及趨化因子受體的概述
1.4 趨化軸CXCL12-CXCR4/CXCR7的概述
1.4.1 趨化軸CXCL12-CXCR4/CXCR7與組織纖維化的關(guān)系
1.5 本文的研究意義
1.6 技術(shù)路線
2. 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
2.3.1 肝硬化脾亢模型所需試劑
2.3.2 HE染色試劑
2.3.3 Masson三色法試劑
2.3.4 免疫組化試劑
2.3.5 Western blot試劑
2.3.6 RT-PCR試劑
2.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.4.1 肝硬化脾亢模型的建立
2.4.2 標(biāo)本的采集與處理
2.4.3 HE常規(guī)染色檢測(cè)
2.4.4 Masson三色法檢測(cè)
2.4.5 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)
2.4.6 Western blot檢測(cè)
2.4.7 RT-PCR檢測(cè)
2.4.8 熒光定量PCR反應(yīng)
2.4.9 數(shù)據(jù)處理
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3. 結(jié)果與分析
3.1 動(dòng)物模型行為表現(xiàn)
3.2 肝脾外觀形態(tài)變化
3.3 肝臟病理形態(tài)學(xué)變化
3.4 脾臟病理形態(tài)學(xué)變化
3.5 部分肝功能生化指標(biāo)變化
3.6 外周血細(xì)胞數(shù)量變化
3.7 脾指數(shù)、脾橫徑及脾長(zhǎng)徑的變化
3.8 免疫組化法檢測(cè)結(jié)果
3.9 蛋白印跡檢測(cè)結(jié)果
3.10 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果
3.11 CXCL12、CXCR4、CXCR7三者之間的相關(guān)性
3.12 CXCL12、CXCR4、CXCR7與脾臟膠原纖維面積的相關(guān)性
4. 討論
4.1 肝硬化脾亢的治療現(xiàn)狀
4.2 構(gòu)建肝硬化脾亢模型的方法
4.3 趨化軸CXCL12-CXCR4/CXCR7在脾臟組織中的表達(dá)與意義
5. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮寫(xiě)對(duì)照表
附錄
致謝
本文編號(hào):3808459
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