目的： 1．探討HBV是否能誘導(dǎo)肝細(xì)胞分泌趨化因子MIG，以及篩選HBV編碼的七個(gè)蛋白中能顯著影響MIG表達(dá)的蛋白。 2．探討HBx在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控MIG表達(dá)的詳細(xì)分子機(jī)制，篩選出HBx激活的核轉(zhuǎn)錄因子。 3．探討HBx蛋白誘導(dǎo)的MIG是否具有趨化體外培養(yǎng)活化PBL的生物學(xué)功能。 方法： 一．HBV能否誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞分泌MIG： 1．將包含HBV全基因組的質(zhì)粒pBlue-HBV轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞，RT-PCR和ELISA檢測(cè)MIG表達(dá)變化。 2．將包含了HBV編碼的七個(gè)基因的質(zhì)粒pCMV-S，pCMV-preS1，pCMV-preS2，pCMV-HBe，pCMV-HBc，pCMV-HBx，pCMV-HBp分別轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞，RT-PCR和ELISA檢測(cè)MIG表達(dá)變化。 3．構(gòu)建包含MIG全長啟動(dòng)子的報(bào)告基因質(zhì)粒(-983／+33)MIG，與HBV七個(gè)基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞，熒光素酶技術(shù)檢測(cè)MIG啟動(dòng)子活性變化。 4．將(-983／+33)MIG與不同劑量pCMV-HBx質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞，熒光素酶技術(shù)檢測(cè)不同劑量的HBx蛋白激活MIG基因啟動(dòng)子的水平。 二．HBx誘導(dǎo)MIG表達(dá)的分子機(jī)制： 1．構(gòu)...

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中英文縮略表
中文摘要
ABSTRACT
正文
    前言
    第一部分 乙型肝炎病毒調(diào)控趨化因子MIG表達(dá)的研究
        引言
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
    第二部分 HBx蛋白通過激活核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB調(diào)控趨化因子MIG表達(dá)
        引言
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
    第三部分 HBx蛋白誘導(dǎo)產(chǎn)生的趨化因子MIG對(duì)體外培養(yǎng)的
        引言
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 結(jié)果
        4 討論
    全文小結(jié)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào)：3756219