目的:1.檢測NIRF蛋白和HBV核心蛋白在人正常肝組織和HBV感染的肝組織內(nèi)表達(dá)的相關(guān)性;檢測人正常肝組織和肝癌組織中NIRF基因的蛋白表達(dá)情況;2.構(gòu)建NIRF基因真核表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)染人胚腎上皮細(xì)胞HEK-293;3.構(gòu)建好的重組載體轉(zhuǎn)染能分泌HBV DNA的HepG2.2.15細(xì)胞,觀察NIRF蛋白與HBV核心蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位。 方法:1.通過免疫組化方法檢測人正常肝組織(n=25)、HBV感染的肝組織(n=25)中NIRF蛋白和HBV核心蛋白表達(dá)的相關(guān)性,并分析NIRF基因的蛋白表達(dá)是否有差異;通過免疫組化方法檢測人正常肝組織(n=25)、肝癌組織(n=25)中NIRF基因的蛋白表達(dá)情況;2.通過RT-PCR方法,從人肝癌組織中獲得NIRF基因,將其插入真核表達(dá)載體pIRES2-EGFP中,構(gòu)建成重組載體pIRES2-EGFP-NIRF,并轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH5α,篩選出含有正確插入片段的克隆,經(jīng)PCR、酶切及DNA測序鑒定;實(shí)驗(yàn)分三組:HEK-293 - NIRF組(利用脂質(zhì)體將構(gòu)建成功的重組載體轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞)、HEK-293-Null組(空載體轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號說明
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 NIRF 蛋白與HBV 核心蛋白在人肝組織內(nèi)的表達(dá)
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
第二部分 NIRF 基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建、鑒定及轉(zhuǎn)染
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
第三部分NIRF 蛋白與HBV 核心蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位分析
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表文章及參加會議



本文編號：3753453