目的:探討白細(xì)胞介素13(IL-13)對(duì)膽管成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)/Smads通路活性的影響及地塞米松(Dex)的干預(yù)作用。方法:分離、培養(yǎng)兔膽管成纖維細(xì)胞并鑒定后分別給予IL-13、IL-13聯(lián)合不同濃度的Dex(0.01、0.05、0.25 mg/mL)干預(yù)48 h,以無(wú)處理的膽管成纖維細(xì)胞為空白對(duì)照,分別用CCK-8細(xì)胞計(jì)數(shù)法測(cè)定各組細(xì)胞增殖水平;real-time PCR檢測(cè)各組細(xì)胞TGF-β1、Smad3及Smad4基因mRNA表達(dá);Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞TGF-β1及Smad4蛋白表達(dá)。結(jié)果:與空白對(duì)照組比較,在IL-13干預(yù)48 h后,膽管成纖維細(xì)胞增殖明顯加速、TGF-β1、Smad3及Smad4 mRNA表達(dá)均明顯上調(diào),TGF-β1、Smad4蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(均P<0.05),而Dex對(duì)IL-13引起的上述變化有明顯的抑制作用,并呈一定的濃度依賴趨勢(shì)(部分P<0.05)。結(jié)論:IL-13能增加膽管成纖維細(xì)胞TGF-β1/Smads通路的活性,削弱該通路的活化可能是Dex抑制良性膽道狹窄形成的機(jī)制之一。

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 動(dòng)物模型的建立、細(xì)胞的獲取及細(xì)胞鑒定
    1.3 實(shí)驗(yàn)分組及各組細(xì)胞的處理
    1.4 觀察指標(biāo)及測(cè)定方法
        1.4.1 細(xì)胞免疫熒光法鑒定成纖維細(xì)胞
        1.4.2 CCK-8法測(cè)定成纖維細(xì)胞增殖水平
        1.4.3 real-time PCR測(cè)定各組細(xì)胞中TGF-β1、Smad3及Smad4 m RNA的表達(dá)
        1.4.4 Western blot檢測(cè)組細(xì)胞中TGF-β1及Smad4蛋白表達(dá)
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 成纖維細(xì)胞的鑒定
    2.2 各組細(xì)胞增殖水平的測(cè)定
    2.3 各組細(xì)胞TGF-β1、Smad3及Smad4基因m RNA表達(dá)水平
    2.4 各組細(xì)胞TGF-β1及Smad4蛋白表達(dá)水平的測(cè)定
3 討論



本文編號(hào)：3739125