背景:潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerate colitis,UC）的病因及發(fā)病機制至今仍未完全闡明。目前普遍認為主要由環(huán)境因素、遺傳易感因素、腸道屏障功能障礙、免疫功能異常等因素相互作用所致,其中慢性炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答紊亂是造成UC的關(guān)鍵病理環(huán)節(jié),而腸道內(nèi)菌群紊亂又是造成炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答改變的重要因素。目的:探討潰瘍性結(jié)腸炎（UC）患者腸道菌群分布和種類的變化及其與IL-23/IL-17軸之間的關(guān)系。方法:收集20例UC活動期患者和20例健康對照者的新鮮糞便樣本,采用直接涂片鏡檢和傳統(tǒng)細菌培養(yǎng)鑒定法分析菌群分布;利用Real-Time PCR檢測目標菌群表達的變化;常規(guī)方法檢測血紅蛋白、白蛋白、血沉、C反應(yīng)蛋白水平;經(jīng)結(jié)腸鏡活檢取UC患者正常及病變黏膜組織,進行Mayo評分,Baron分級,HE染色觀察組織病理變化;免疫組化、Western blot觀察IL-17、IL-23蛋白表達的改變。結(jié)果:（1）與對照組比,活動期UC患者菌群失調(diào)程度明顯升高（P＜0.05）;（2）需氧培養(yǎng)結(jié)果表明,活動期UC患者的大腸桿菌菌數(shù)較正常人顯著降低（P＜0.01）,腸球菌菌數(shù)明顯增加（P＜0.01）;厭氧... 

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 研究對象的納入標準
        2.1.3 研究對象的排除標準
    2.2 實驗試劑
        2.2.1 細菌涂片及培養(yǎng)相關(guān)試劑、耗材
        2.2.2 Real-timePCR試劑及耗材
        2.2.3 Westernblot試劑和耗材
        2.2.4 HE染色、免疫組化試劑和耗材
    2.3 主要儀器及設(shè)備
    2.4 主要試劑配制
        2.4.1 不同培養(yǎng)基的配制
        2.4.2 科氏改良法(Kopeloffmodification)革蘭染色液
        2.4.3 WesternBlot試劑配制
        2.4.4 免疫組化試劑配制
    2.5 實驗方法
        2.5.1 直接涂片鏡檢和菌群分析
        2.5.2 細菌培養(yǎng)及鑒定
        2.5.3 細菌Real-timePCR熒光定量分析：
        2.5.4 血紅蛋白、白蛋白、血沉、C反應(yīng)蛋白測定
        2.5.5 疾病臨床 Mayo 評分、Baron 分級及結(jié)腸組織病理學(xué)分析
        2.5.6 結(jié)腸組織形態(tài)學(xué)觀察(HE染色法)
        2.5.7 免疫組織化學(xué)法檢測結(jié)腸IL-17、IL-23的表達
        2.5.8 Westernblot法檢測結(jié)腸IL-17、IL-23的表達
3 統(tǒng)計學(xué)處理
4 實驗結(jié)果
    4.1 直接涂片鏡檢和菌群分析結(jié)果
    4.2 細菌培養(yǎng)鑒定結(jié)果
    4.3 細菌 Real-Time PCR 熒光定量分析結(jié)果
    4.4 血紅蛋白、白蛋白、血沉、C反應(yīng)蛋白水平測定結(jié)果
    4.5 疾病臨床活動度及組織病理積分
    4.6 結(jié)腸IL-17、IL-23的表達及其與病理組織學(xué)、腸道菌群的關(guān)系
        4.6.1 IL-17、IL-23蛋白表達與定位
        4.6.2 IL-17、IL-23表達與Baron分級及病理組織學(xué)積分的相關(guān)性
        4.6.3 IL-17、IL-23表達與大腸桿菌、腸球菌、擬桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌熒光定量的相關(guān)性分析
5 討論
6 結(jié)論
7 參考文獻
致謝
綜述
    參考文獻
在讀期間發(fā)表論文


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]潰瘍性結(jié)腸炎患者糞便乳桿菌種的研究[D]. 崔熠.中南大學(xué) 2012
[2]不同濃度嗜酸乳酸桿菌對急性實驗性結(jié)腸炎的療效和結(jié)腸菌群的影響及其免疫相關(guān)機制研究[D]. 任科雨.中南大學(xué) 2010



本文編號：3715370