本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合維生素C對(duì)急性肝損傷的治療研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：急性肝損傷在諸多急性臨床病例中屢見(jiàn)不鮮，且呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著人類的健康。急性肝損傷是一種常見(jiàn)的肝臟疾病，如果治療不及時(shí)，會(huì)導(dǎo)致肝臟自身在合成、解毒、排泄和生物轉(zhuǎn)化等方面出現(xiàn)嚴(yán)重代謝失常，最終機(jī)體出現(xiàn)以凝血機(jī)制障礙、黃疸、肝性腦病和腹水為主要表現(xiàn)的臨床癥候。近年來(lái)，隨著醫(yī)藥技術(shù)的快速發(fā)展，人類多種疾病均得到了有效治療。但是，急性肝損傷這種疾病的治療現(xiàn)狀尚未得到本質(zhì)的改善。所以開(kāi)發(fā)一種治療急性肝損傷新方法，在臨床應(yīng)用方面具有重要意義。 干細(xì)胞技術(shù)是再生醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的前沿技術(shù)之一。近年來(lái)，干細(xì)胞治療手段也為多種疾病的治療提供了新的策略。這種干細(xì)胞治療策略以其毒副作用小、療效顯著等因素，受到研究人員的廣泛認(rèn)可，其治療效果也明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的藥物治療模式。特別是骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs），因其取材、培養(yǎng)等方面的可操作性，在多種疾病的治療方面均有著一定的臨床應(yīng)用，在急性肝損傷治療方面，BMSCs也具有一定的研究基礎(chǔ)。 在急性肝損傷的過(guò)程中，氧自由基對(duì)肝細(xì)胞DNA結(jié)構(gòu)以及其他代謝過(guò)程會(huì)有較大的影響，從而成為了急性肝損傷的重要致病因素。作為維生素家族的一員，維生素C具有最強(qiáng)的抗氧化效應(yīng)，對(duì)氧自由基的損傷也起到了較好的抵抗作用。這一生物學(xué)特性，使這種小分子化合物具有了緩解急性肝損傷病程，，抑制肝損傷程度，從而具有了治療急性肝損傷的應(yīng)用潛能。 本實(shí)驗(yàn)研究，采用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合維生素C對(duì)急性肝損傷進(jìn)行治療，分別在大鼠體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)中觀察治療效果，在抑制肝損傷的治療中具有一定的探索性，且二者聯(lián)合應(yīng)用呈現(xiàn)更加顯著的治療效果。 實(shí)驗(yàn)采用四氯化碳損傷的方法制備大鼠急性肝損傷模型。以骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合維生素C作用于大鼠急性肝損傷，在大鼠體內(nèi)、體外水平上對(duì)急性肝損傷程度的改善進(jìn)行觀察。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，BMSCs（2.5×106cells/kg）聯(lián)合維生素C（200mg/kg）的治療方法在改善肝功能和肝指數(shù)方面具有最佳的治療效果。在病理學(xué)改變上，聯(lián)合治療組的肝臟組織在肝細(xì)胞壞死、氣球樣變、脂肪變性和炎細(xì)胞浸潤(rùn)等方面得到有效緩解。對(duì)各組肝臟進(jìn)行腫瘤壞死因子（TNF-α，肝臟炎性指標(biāo)）、溴脫氧尿苷（BrdU，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記物）免疫組化檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合治療組的肝臟組織內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞數(shù)明顯高于單獨(dú)治療組，并且，聯(lián)合治療組TNF-α表達(dá)明顯下降，說(shuō)明維生素C可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝損傷部位遷移并增強(qiáng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的抗炎性作用。Western-blot結(jié)果顯示：各治療組肝臟內(nèi)凋亡基因Caspase3表達(dá)均有所下調(diào)，而且，聯(lián)合治療組效果最為明顯。說(shuō)明維生素C可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)受損肝臟內(nèi)細(xì)胞凋亡的抑制作用。在體外實(shí)驗(yàn)中，維生素C對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增值具有促進(jìn)作用，且隨著維生素C濃度升高促進(jìn)作用也隨之增強(qiáng)。該結(jié)果說(shuō)明了維生素C對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的優(yōu)化作用。 綜上所述，BMSCs聯(lián)合維生素C在治療大鼠急性肝損傷方面具有更強(qiáng)的治療效果。維生素C在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠急性肝損傷過(guò)程中可起到一定優(yōu)化作用。所以，本課題不僅開(kāi)發(fā)了一種針對(duì)急性肝損傷的新型生物治療模式，而且，基于Vc的經(jīng)濟(jì)性和BMSCs的易獲取、低毒副作用性，該治療模式也具有較大的臨床應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 維生素C 急性肝損傷
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R575
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-13
• 第1章 緒論13-23
• 1.1 肝損傷13-17
• 1.1.1 急性肝損傷13-15
• 1.1.2 慢性肝損傷15-17
• 1.2 肝臟疾病治療方法17-19
• 1.2.1 肝細(xì)胞移植在肝損傷治療中的研究17-18
• 1.2.2 肝干細(xì)胞/祖細(xì)胞在肝損傷治療中的研究18
• 1.2.3 循環(huán)干細(xì)胞在肝損傷治療中的研究18-19
• 1.2.4 間充質(zhì)干細(xì)胞治療肝損傷的臨床研究19
• 1.3 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞19-20
• 1.3.1 干細(xì)胞簡(jiǎn)介19-20
• 1.3.2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及對(duì)肝病治療的作用20
• 1.4 維生素 C20-21
• 1.4.1 維生素 C 一般知識(shí)20-21
• 1.4.2 維生素 C 與肝病21
• 1.5 干細(xì)胞聯(lián)合維生素 C 用于急性肝損傷的治療21-23
• 第2章 材料與試劑23-26
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物23
• 2.2 儀器23-24
• 2.3 試劑24
• 2.4 主要試劑的配制24-26
• 2.4.1 磷酸鹽緩沖液（PBS）的配制24-25
• 2.4.2 基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制25
• 2.4.3 成骨培養(yǎng)基25
• 2.4.4 成脂培養(yǎng)基25
• 2.4.5 0.25%胰酶-EDTA 配制(10×)25-26
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法26-31
• 3.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定26-27
• 3.1.1 BMSCs 的分離與培養(yǎng)26
• 3.1.2 BMSCs 的鑒定26-27
• 3.2 急性肝損傷模型的制備及治療27-28
• 3.2.1 大鼠急性肝損傷模型的制備27
• 3.2.2 大鼠急性肝損傷的治療27-28
• 3.3 體內(nèi)治療結(jié)果檢測(cè)28-29
• 3.3.1 肝功能與病理檢測(cè)28
• 3.3.2 TNF-α、BrdU 免疫組化28-29
• 3.3.3 凋亡基因 Caspase3 的 western-blot 分析29
• 3.4 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果：維生素 C 對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖活性分析29-30
• 3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)30-31
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-42
• 4.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定31-32
• 4.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-40
• 4.2.1 治療后大鼠肝指數(shù)變化32
• 4.2.2 治療后大鼠肝功能指標(biāo)的變化32-35
• 4.2.3 治療后大鼠肝臟組織的病理學(xué)改變35-37
• 4.2.4 治療后大鼠肝臟組織中 TNF-α表達(dá)結(jié)果37-38
• 4.2.5 治療后大鼠肝臟組織中 Caspase3 表達(dá)結(jié)果38-39
• 4.2.6 治療后大鼠肝臟組織中 BrdU 檢測(cè)結(jié)果39-40
• 4.3 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-42
• 4.3.1 維生素 C 對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖作用結(jié)果40-42
• 第5章 討論42-45
• 第6章 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-54
• 作者簡(jiǎn)介54-55
• 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 Andre Castro lyra;Milena Botelho Pereira Soares;luiz Flavio Maia da Silva;Marcos Fraga Fortes;André Goyanna Pinheiro Silva;Augusto César de Andrade Mota;Sheilla A Oliveira;Eduardo lorens Braga;Wilson Andrade de Carvalho;Bernd Genser;Ricardo Ribeiro dos Santos;luiz Guilherme Costa lyra;;Feasibility and safety of autologous bone marrow mononuclear cell transplantation in patients with advanced chronic liver disease[J];World Journal of Gastroenterology;2007年07期

2 ;Stromal cell derived factor-1 enhances bone marrow mononuclear cell migration in mice with acute liver failure[J];World Journal of Gastroenterology;2009年21期

  本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合維生素C對(duì)急性肝損傷的治療研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：370871